一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法技术

本发明专利技术一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，该检测方法采用液相色谱法检测待测样品中的基因毒性杂质，所述待测样品为托拉塞米原料及制剂，所述基因毒性杂质为对甲苯胺、4

【技术实现步骤摘要】
一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法


[0001]本专利技术属于化学分析领域，具体涉及一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法。

技术介绍

[0002]托拉塞米是新一代高效髓袢利尿剂，于1993年在德国上市，次年在美国上市。20多年临床应用证实，托拉塞米适应证广，利尿作用迅速强大且持久，不良反应发生率低，更符合药物经济学要求，是临床上值得推广的一类高效利尿剂。化学结构式如下：适应症：适用于需要迅速利尿或不能口服利尿的充血性心力衰竭、肝硬化腹水、肾脏疾病所致的水肿患者。
[0003]作用机制：本品为磺酰脲吡啶类利尿药，其作用于亨利氏髓袢升支粗段，抑制Na＋／K＋／2CL－载体系统，使尿中Na＋，CL－和水的排泄增加，但对肾小球滤过率，肾血浆流量或体内酸碱平衡无显著影响。用法用量：充血性心力衰竭所致的水肿、肝硬化腹水：一般初始剂量为5mg或10mg，每日一次，缓慢静脉注射，也可以用5％葡萄糖溶液或生理盐水稀释后进行静脉推注；如疗效不满意可增加剂量至20mg，每日一次，每日最大剂量为40mg，疗程不超过一周。托拉塞米具有以下特点：（1）利尿作用强：作用强度至少是呋噻米的2倍。（2）抗高血压作用强：降压作用比氢氯噻嗪强，与吲哒帕胺相当，副作用小于吲哒帕胺。（3）作用持续时间长：本品只需日服一次。（4）口服生物利用度高，可达76～92％，约为呋塞米的2倍。口服和非肠道给药疗效几乎相同。（5）耐受性好，毒副反应发生率低，排钾作用弱，长期使用不致低血钾症，无肝、肾毒性。（6）本品临床应用广泛，市场和用量大。
[0004]CN102079721B提供托拉塞米化合物及其新制法，该方法包括：(1)在合适的溶剂或溶剂混合物存在下，在碱性条件下，在加热下用碱金属或碱土金属烷氧化物处理原料托拉塞米；(2)用合适的酸调节pH值；(3)用强碱性离子交换树脂对托拉塞米进行吸附，然后洗脱；(4)用合适的酸调节pH值，获得三级提纯的托拉塞米。
[0005]CN102512360B制备一种稳定安全的供注射用的托拉塞米药物组合物，特别是一种适用于需要迅速利尿或不能口服利尿的充血性心力衰竭、肝硬化腹水、肾脏疾病所致的水肿患者的托拉塞米药物组合物，优选的是注射液。主要由活性成分托拉塞米、乙醇、聚山梨酯80组成。本专利技术得到的供注射用托拉塞米药物组合物pH值稳定，杂质含量低，有效地提高了产品的治疗效果，减少了副反应；同时提高了收率，降低了成本，创造了更高的效益。
[0006]到目前为止，还没有公开的方法报道可有效对托拉塞米及其潜在基因毒性杂质进行分离和定量测定。
[0007]因此开发一种同时分离测定托拉塞米及其潜在基因毒性杂质的方法，对于托拉塞米及其质量控制具有极其重要的意义。

技术实现思路

[0008]本专利技术旨在提供一种同时分离测定托拉塞米或其制剂基因毒性杂质的方法。
[0009]为实现上述专利技术目的，本专利技术一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，具体实施方案为：本专利技术所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，该检测方法采用液相色谱法检测待测样品中的基因毒性杂质，所述待测样品为托拉塞米原料及制剂，所述基因毒性杂质为对甲苯胺、4-羟基吡啶-3-磺酸、异氰酸异丙酯、4-氯-3-吡啶磺酰氯、间乙基苯胺、邻甲苯胺、间硝基甲苯中的一种或者俩种组合。
[0010]本专利技术所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，所述检测方法流动相A:以0.01~0.1mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液，用2~5mol/L磷酸调节pH值至3-7）。
[0011]本专利技术所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，所述检测方法色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂或性能相当色谱柱，柱温25~40℃。
[0012]色谱柱1 Luna Omega Polar C18 4.6*250mm，5
µ
m；色谱柱2：Agilent TC-C18 250*4.6mm,5
µ
m；色谱柱3：Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18 250*4.6mm,5um）。
[0013]本专利技术所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，其特征在于，所述检测方法进样量：5~20ul。
[0014]本专利技术所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，所述检测方法流速：0.5~1.0ml/min，检测波长：200nm~260nm。
[0015]本专利技术所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，所述检测方法溶剂：0.05%~0.2磷酸溶液-乙腈（80:20）。
[0016]本专利技术所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，所述检测方法混合对照品溶液：精密称取杂质1~7对照品适量，加溶剂溶解并稀释制成每1ml中含各杂质均为0.3μg的混合溶液。
[0017]本专利技术所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，供试品溶液：取托拉塞米适量，
加溶剂溶解并稀释制成每1ml中含托拉塞米为20mg的溶液。。
[0018]本专利技术所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，所述检测方法按下表进行梯度洗脱：梯度洗脱程序时间流动相A（%）流动相B（%）090~955~101563~7525~373046~5545~545590~955~106090~955~10
[0019]本专利技术所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，所述检测方法为：色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂或性能相当色谱柱流动相A:以0.01~0.1mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液，用2~5mol/L磷酸调节pH值至3-7）流动相B:乙腈柱温25~40℃进样量：5~20ul流速：0.5~1.0ml/min检测波长：200nm~260nm溶剂：0.05%~0.2磷酸溶液-乙腈（80:20）混合对照品溶液：精密称取杂质1~7对照品适量，加溶剂溶解并稀释制成每1ml中含各杂质均为0.3μg的混合溶液。
[0020]供试品溶液：取托拉塞米适量，加溶剂溶解并稀释制成每1ml中含托拉塞米为20mg的溶液。
[0021]按下表进行梯度洗脱梯度洗脱程序时间流动相A（%）流动相B（%）090~955~101563~7525~373046~5545~545590~955~106090~955~10
[0022]本专利技术所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，所述检测方法为：色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂或性能相当色谱柱流动相A:以0.02mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液，用2mol/L磷酸调节pH值至3.5）流动相B:乙腈柱温35℃进样量：10ul流速：0.8ml/min检测波长：210nm
溶剂：0.04%磷酸溶液-乙腈（80:20）混合对照品溶液：精密称取杂质1~7对照品适量，加溶剂溶解并稀释制成每1ml中含各杂质均为0.3μg的混合溶液。
[0023]供试品溶液：取托拉塞米适量，加溶剂溶解并稀释制成每1ml中含托拉塞米为20mg的溶液。
[0024]按下表进行梯度洗脱梯度洗脱程序时间流动相A（%）流动相B（%）095515663430524855901060955<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，其特征在于，该检测方法采用液相色谱法检测待测样品中的基因毒性杂质，所述待测样品为托拉塞米原料及制剂，所述基因毒性杂质为对甲苯胺、4-羟基吡啶-3-磺酸、异氰酸异丙酯、4-氯-3-吡啶磺酰氯、间乙基苯胺、邻甲苯胺、间硝基甲苯中的一种或者俩种组合。2.根据权利要求1所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，其特征在于，所述检测方法流动相A:以0.01~0.1mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液，用2~5mol/L磷酸调节pH值至3-7）。3.根据权利要求1所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，其特征在于，所述检测方法色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂或性能相当色谱柱，柱温25~40℃。4.根据权利要求1所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，其特征在于，所述检测方法进样量：5~20ul。5.根据权利要求1所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，其特征在于，所述检测方法流速：0.5~1.0ml/min，检测波长：200nm~260nm。6.根据权利要求1所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，其特征在于，所述检测方法溶剂：0.05%~0.2磷酸溶液-乙腈（80:20）。7.根据权利要求1所述一种托拉塞米基因毒性杂质检测方法，其特征在于，所述检测方法混合对照品溶液：精密称取杂质1~7对照品适量，加溶剂溶解并稀释制成每1ml中含各杂质均为0.3μg的混合溶液。8.根据权利要求1所述一...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾灿丽，贺莲，杨世平，张静，刘娟，曾文洁，
申请(专利权)人：康普药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：