非洲猪瘟病毒CD2v蛋白及由其制备的试剂盒和抗体制造技术

本发明专利技术涉及一种非洲猪瘟病毒CD2v蛋白及由其制备的试剂盒和抗体。本发明专利技术提供的非洲猪瘟病毒CD2v蛋白的基因序列包括SEQ ID No.1所示的核苷酸序列或与SEQ ID No.1序列至少90％同源的核苷酸序列。本发明专利技术根据CHO表达系统偏爱密码子对非洲猪瘟病毒CD2v蛋白基因序列进行密码子优化，再通过CHO表达系统制备融合蛋白mFc

【技术实现步骤摘要】
非洲猪瘟病毒CD2v蛋白及由其制备的试剂盒和抗体


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种CHO表达非洲猪瘟病毒CD2v蛋白，用该蛋白制备的ELISA抗体检测试剂盒及其制备方法与应用，以及用该蛋白制备的单克隆抗体及其应用。

技术介绍

[0002]非洲猪瘟(African swine fever，ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的猪的一种急性、热性、高度接触的烈性传染性疾病，临床上以高热、皮肤发绀、淋巴结及脏器广泛出血为主要特征，病程短，病死率可高达100％。临床症状和病理变化均类似于急性猪瘟，在诊断时极易误诊，表现高热、皮肤充血发绀、流产、水肿及脏器出血。该病在我国被列为一类动物疫病，属于世界动物卫生组织(OIE)的法定报告的动物疫病。该病于1921年以来陆续在肯尼亚、西班牙等欧洲各国、高加索地区及俄罗斯等国家爆发，于2018年8月在我国东北爆发并迅速蔓延至各个省(区)。中国的生猪数量占全球的50％，ASFV在中国的传播，严重威胁着世界养殖业。
[0003]ASFV CD2v是由EP402R基因编码的一种囊膜糖蛋白，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种非洲猪瘟病毒CD2v蛋白的基因序列，所述基因序列包括SEQ ID No.1所示的核苷酸序列或与SEQ ID No.1序列至少90％同源的核苷酸序列；优选地，所述基因序列根据CHO表达系统偏爱密码子进行密码子优化所得。2.一种包含根据权利要求1所述的基因序列的融合蛋白，优选地，所述融合蛋白包括融合蛋白mFc
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CD2v和/或融合蛋白gD
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CD2v，所述融合蛋白mFc
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CD2v的基因序列包括SEQ ID No.2所示的核苷酸序列，所述融合蛋白gD
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CD2v的基因序列包括SEQ ID No.3所示的核苷酸序列。3.一种根据权利要求2所述的融合蛋白的制备方法，以包括以下步骤：S1：将权利要求1所述的基因序列分别与鼠Fc片段的基因序列和/或猪伪狂犬病病毒gD蛋白的基因序列通过融合连接在一起，分别构建表达质粒；S2：将步骤S1构建的表达质粒分别转染CHO细胞，表达融合蛋白mFc
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CD2v和/或融合蛋白gD
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CD2v；S3：收获所述融合蛋白mFc
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CD2v和/或所述融合蛋白gD
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CD2v。4.根据权利要求2所述的融合蛋白或根据权利要求3所述的制备方法得到的融合蛋白在非洲猪瘟病毒CD2v蛋白单克隆抗体中作为免疫原或筛选用抗原或在ELISA抗体检测试剂盒中作为包被原的应用。5.一种非洲猪瘟病毒的ELISA抗体检测试剂盒，其包括包被有权利要求2所述的融合蛋白中的融合蛋白mFc
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CD2v的支持介质、酶标试剂、阳性对照、阴性对照和检测试剂；优选地，所述融合蛋白mFc
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CD2v的包被浓度为0.5
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0.8μg/...

【专利技术属性】
技术研发人员：田克恭，郝丽影，张超林，邓均华，
申请(专利权)人：洛阳普泰生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：