一种肾透明细胞癌辅助免疫治疗靶基因LPR8检测试剂盒及应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，涉及一种肾透明细胞癌辅助免疫治疗靶基因LPR8检测试剂盒及应用。本发明专利技术研究证实肾透明细胞癌中LPR8表达显著下降。LPR8表达水平与免疫微环境指标StromalScore，ImmuneScore和ESTIMATEScore均呈正相关，与多种免疫细胞浸润正相关，且与免疫检查点基因表达正相关，由此说明，LPR8可以作为肾透明细胞癌免疫治疗新靶点。作为肾透明细胞癌免疫治疗新靶点。作为肾透明细胞癌免疫治疗新靶点。

【技术实现步骤摘要】
一种肾透明细胞癌辅助免疫治疗靶基因LPR8检测试剂盒及应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体地，涉及一种检测LPR8表达水平的试剂在制备用于肾透明细胞癌检测和/或辅助免疫治疗的制剂中的应用，以及一种肾透明细胞癌辅助免疫治疗靶基因LPR8检测试剂盒及应用。

技术介绍

[0002]肾透明细胞癌(Kidney renal clear cell carcino，KIRC)是肾肿瘤中最常见且预后相对较差的一种类型。随着时代发展和当代高通量测序技术的进步，人们在分子层面上对肾透明细胞癌有了更深入的理解，然而目前其发生、进展及转移机制仍不清楚，并且缺乏有效的生物标志物。近几十年来，越来越多的研究表明，肿瘤细胞与微环境之间的相互作用对治疗和预后有重要影响。免疫治疗是一种具有前景的肾透明细胞癌治疗新方式，存在治疗响应率不高、副作用等问题，开发新型辅助免疫治疗新靶点对于临床肿瘤免疫治疗具有重要意义。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供一种肾透明细胞癌免疫治疗新靶点LPR8，并由此提供一种检测LPR8表达水平的试剂在制备用于肾透明细胞癌检测和/或辅助免疫治疗的制剂中的应用，以及一种肾透明细胞癌辅助免疫治疗靶基因LPR8检测试剂盒及应用。
[0004]本专利技术的第一方面提供一种检测LPR8表达水平的试剂在制备用于肾透明细胞癌检测和/或辅助免疫治疗的制剂中的应用。
[0005]进一步地，所述检测LPR8表达水平包括检测LPR8的mRNA表达水平和/或检测LPR8的蛋白表达水平。/>[0006]进一步地，所述检测LPR8表达水平的方法包括：通过RT
‑
qPCR方法检测肾透明细胞癌和癌旁组织中LPR8 mRNA的表达量；通过分子探针技术检测肾透明细胞癌和癌旁组织中LPR8 mRNA表达量；通过免疫组化或Western
‑
Blot检测肾透明细胞癌和癌旁组织中LPR8蛋白表达量。
[0007]更具体地，所述检测LPR8表达水平的试剂为靶向LPR8 DNA序列或mRNA序列的寡核酸探针、PCR引物，或者为靶向LPR8的抗体。
[0008]根据本专利技术，优选地，所述检测LPR8表达水平的试剂为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示核苷酸序列的实时荧光定量PCR特异性引物。
[0009]5’‑
CTTGCTGTGCATGGGAGGAT
‑3’
(SEQ ID NO：1)
[0010]5’‑
AGTCCGCCCAATGTGGATTT
‑3’
(SEQ ID NO：2)
[0011]本专利技术的第二方面提供一种肾透明细胞癌辅助免疫治疗靶基因LPR8检测试剂盒，该试剂盒包括：检测LPR8表达水平的试剂。
[0012]进一步地，所述检测LPR8表达水平的试剂为靶向LPR8 DNA序列或mRNA序列的寡核
酸探针、PCR引物，或者为靶向LPR8的抗体。
[0013]具体地，所述检测LPR8表达水平的试剂为具有SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示核苷酸序列的实时荧光定量PCR特异性引物。
[0014]根据本专利技术，所述试剂盒还可以含有其他常规的用于实时荧光定量的试剂，优选地，所述试剂盒还包括以下组分中的至少一种：Trizol、异丙醇、氯仿、无水乙醇、无RNA酶水、随机引物、5
×
M
‑
MLV缓冲液、dNTPs、RNA酶抑制剂、M
‑
MLV逆转录酶、具有SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示核苷酸序列的ACTB实时荧光定量PCR特异性引物。
[0015]5’‑
GGCACCCAGCACAATGAAGA
‑3’
(SEQ ID NO：3)
[0016]5’‑
ACTCCTGCTTGCTGATCCAC
‑3’
(SEQ ID NO：4)
[0017]本专利技术第三方面提供上述试剂盒在制备用于肾透明细胞癌检测和/或辅助免疫治疗的制剂中的应用。
[0018]LPR8是一种蛋白编码基因，本专利技术研究证实肾透明细胞癌中LPR8表达显著下降。LPR8表达水平与免疫微环境指标StromalScore，ImmuneScore和ESTIMATEScore均呈正相关，与多种免疫细胞浸润正相关，且与免疫检查点基因表达正相关，由此说明，LPR8可以作为肾透明细胞癌免疫治疗新靶点。并且基于此设计了LPR8检测试剂盒。
[0019]本专利技术的其它特征和优点将在随后具体实施方式部分予以详细说明。
附图说明
[0020]通过结合附图对本专利技术示例性实施方式进行更详细的描述，本专利技术的上述以及其它目的、特征和优势将变得更加明显。
[0021]图1示出了肾透明细胞癌中靶基因LPR8的表达变化。肾透明细胞癌组织中LPR8表达显著下调。
[0022]图2示出了肾透明细胞癌中LPR8表达与免疫细胞浸润的相关性。LPR8表达与多种免疫细胞浸润显著正相关。
[0023]图3示出了肾透明细胞癌中LPR8表达与免疫检查点基因的相关性。LPR8表达与免疫检查点基因显著正相关。
[0024]图4示出了肾透明细胞癌中LPR8的表达变化。
具体实施方式
[0025]下面将更详细地描述本专利技术的优选实施方式。虽然以下描述了本专利技术的优选实施方式，然而应该理解，可以以各种形式实现本专利技术而不应被这里阐述的实施方式所限制。
[0026]实施例中未注明具体条件者，皆按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0027]实施例1
[0028]本实施例用于说明肾透明细胞癌中靶基因LPR8的表达显著下调。
[0029]肾透明细胞癌中LPR8表达分析：
[0030]1、数据下载与整理：
[0031]利用UCSC XENA网站(https://xenabrowser.net/datapages/)下载TCGA肾透明细胞癌表达谱数据和临床数据资料，LPR8表达谱数据经log2转化后进行组间比较。
[0032]2、肾透明细胞癌中LPR8的表达差异分析
[0033]利用R软件包分析肾透明细胞癌组织与正常组织间LPR8 mRNA水平差异，ggplot2包用于可视化，如图1所示。
[0034]图1示出了肾透明细胞癌中靶基因LPR8的表达变化。肾透明细胞癌中LPR8表达显著下调。****p<0.0001。
[0035]实施例2
[0036]本实施例用于说明肾透明细胞癌中LPR8表达与肿瘤免疫微环境指标呈显著正相关。
[0037]肾透明细胞癌中LPR8表达与肿瘤免疫微环境相关性分析：
[0038]利用R软件包ESTIMATE计算了每位肾透明细胞癌患者组织StromalScore，ImmuneS本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测LPR8表达水平的试剂在制备用于肾透明细胞癌检测和/或辅助免疫治疗的制剂中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其中，所述检测LPR8表达水平包括检测LPR8的mRNA表达水平和/或检测LPR8的蛋白表达水平。3.根据权利要求1所述的应用，其中，所述检测LPR8表达水平的方法包括：通过RT
‑
qPCR方法检测肾透明细胞癌和癌旁组织中LPR8 mRNA的表达量；通过分子探针技术检测肾透明细胞癌和癌旁组织中LPR8 mRNA表达量；通过免疫组化或Western
‑
Blot检测肾透明细胞癌和癌旁组织中LPR8蛋白表达量。4.根据权利要求1所述的应用，其中，所述检测LPR8表达水平的试剂为靶向LPR8 DNA序列或mRNA序列的寡核酸探针、PCR引物，或者为靶向LPR8的抗体。5.根据权利要求4所述的应用，其中，所述检测LPR8表达水平的试剂为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示核苷酸序列的实时荧光定量PCR特异性引物。6.一种肾透明细胞癌辅助免疫治疗靶...

【专利技术属性】
技术研发人员：李梦琳，梅峰，胡明，张虎，
申请(专利权)人：江苏医药职业学院，
类型：发明
国别省市：