一种用于检测抗体-免疫激动剂偶联药物活性的细胞株和检测方法技术

本发明专利技术提供一种用于检测抗体

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测抗体
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免疫激动剂偶联药物活性的细胞株和检测方法


[0001]本专利技术涉及抗体
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免疫激动剂偶联药物的活性和药效的检测方法，具体涉及一种用于检测抗体
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免疫激动剂偶联药物活性的细胞株和检测方法。

技术介绍

[0002]肿瘤免疫疗法是一种非常有前景的癌症治疗方法，在药物开发中也属于热门方向。肿瘤免疫疗法的原理是通过增强宿主免疫功能来消除肿瘤并防止肿瘤复发。目前在临床上广泛应用的肿瘤免疫疗法是使用以靶向PD
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1和PD
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L1的单克隆抗体为代表的检查点抑制剂 (checkpoint inhibitor，CPI)，其在多个瘤种上显示出不错的疗效，但许多癌症患者仍然对检查点抑制剂没有反应或在治疗后疾病出现新进展。原因之一是许多实体瘤内部处于免疫抑制状态，新抗原可用性低、T细胞浸润少，使其对免疫治疗无效。这些肿瘤通常含有丰富的肿瘤相关骨髓样细胞 （myeloid cell），提供免疫抑制环境。
[0003]TLR7/8（Toll 样受体7/8）本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测抗体
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免疫激动剂偶联药物活性的细胞株，其特征在于，所述的细胞株表达能够结合所述抗体
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免疫激动剂偶联药物中抗体的抗原或其片段、能够结合所述抗体
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免疫激动剂偶联药物中免疫激动剂的受体，以及免疫信号通路报告基因。2.根据权利要求1所述的用于检测抗体
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免疫激动剂偶联药物活性的细胞株，其特征在于，所述的抗原为靶点蛋白HER2、CD47、Trop2、CEACAM5、CD22、SIRPα、PD
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L2或PD
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L1，所述的抗体为抗HER2抗体、抗CD47抗体、抗Trop2抗体、抗CEACAM5抗体、抗CD22抗体、抗PD
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L2抗体或抗PD
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L1抗体。3.根据权利要求1所述的用于检测抗体
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免疫激动剂偶联药物活性的细胞株，其特征在于，所述的免疫激动剂为Toll 样受体激动剂或干扰素基因刺激蛋白激动剂，所述的免疫信号通路报告基因为NF
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κB信号通路报告基因或IRF信号通路报告基因。4.根据权利要求3所述的用于检测抗体
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免疫激动剂偶联药物活性的细胞株，其特征在于，所述的Toll 样受体为TLR7和/或TLR8，所述的免疫激动剂为、、、、或。5.根据权利要求1所述的用于检测抗体
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免疫激动剂偶联药物活性的细胞株，其特征在
于，所述的细胞株采用HEK293细胞，和/或，所述的免疫信号通路报告基因中的报告基因序列为荧光素酶基因序列或碱性磷酸酶基因序列。6.根据权利要求1所述的用于检测抗体
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免疫激动剂偶联药物活性的细胞株，其特征在于，所述的抗原或其片段由抗原或其片段慢病毒感染细胞株后表达得到，所述的抗原或其片段慢病毒表达质粒包括CMV启动子、位于所述的CMV启动子下游的所述的抗原或其片段的基因编码区序列、用于筛选阳性细胞株的第一筛选基因以及用于连接所述的抗原或其片段的基因编码区序列和所述的第一筛选基因的编码2A连接肽的核酸序列；和/或，所述的免疫激动剂的受体由免疫激动剂的受体慢病毒感染细胞株后表达得到，所述的免疫激动剂的受体慢病毒表达质粒包括CMV启动子、位于所述的CMV启动子下游的所述的免疫激动剂的受体的基因编码区序列、用于筛选阳性细胞株的第二筛选基因以及连接所述的免疫激动剂的受体的基因编码区序列和所述的第二筛选基因的编码2A连接肽的核酸序列，和/或，所述的免疫信号通路报告基因由NF
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κB信号通路报告基因慢病毒或IRF信号通路报告基因慢病毒感染进入细胞株，所述的NF
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κB信号通路报告基因慢病毒表达质粒包括CMV启动子、位于所述的CMV启动子下游的第三筛选基因、NF
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κB反应元件、IFN
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β启动子以及报告基因序列，所述的IRF信号通路报告基因慢病毒表达质粒包括CMV启动子、位于所述的CMV启动子下游的第三筛选基因、ISRE反应元件、TATA启动子以及报告基因序列，其中，所述的第一筛选基因、所述的第二筛选基因和所述的第三筛选基因两两之间互不相同以便于对各个慢病毒感染后的细胞株进行阳性筛选。7.根据权利要求6所述的用于检测抗体
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免疫激动剂偶联药物活性的细胞株，其特征在于，所述的第一筛选基因、所述的第二筛选基因和所述的第三筛选基因独立地为荧光蛋白基因或抗性基因。8.一种如权利要求1至7中任一项所述的用于检测抗体
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免疫激动剂偶联药物活性的细胞株的构建方法，其特征在于，所述的构建方法包括：一、构建含有所述的抗原或其片段的基因编码区序列的抗原或其片段慢病毒表达质粒；二、将步骤一的抗原或其片段慢病毒感染报告基因细胞株，所述的报告基因细胞株中还同时表达所述的免疫激动剂的受体和所述的免疫信号通路报告基因；三、采用荧光蛋白标签筛选和/或抗性筛选的方式筛选阳性细胞株，即得到所述的用于检测抗体
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免疫激动剂偶联药物活性的细胞株。9.根据权利要求8所述的构建方法，其特征在于，所述的构建方法具体包括以下步骤：1）在CMV启动子下游嵌入所述的抗原或其片段的基因编码区序列，并以编码2A连接肽的核酸序列连接第一筛选基因构建抗原或其片段慢病毒表达质粒；2）将步骤1）的抗原或其片段慢病毒表达质粒进行慢病毒包装得到慢病毒；3）采用步骤2）的慢病毒感染报告基因细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐涵文，马赛，秦刚，
申请(专利权)人：启德医药科技苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：