一种用于病毒检测的高通量液相悬浮式生物芯片及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种用于病毒检测的高通量液相悬浮式生物芯片，包括悬浮介质以及均匀分散在悬浮介质中的多功能微球；所述多功能微球包括无机/聚合物复合微球以及包被在所述无机/聚合物复合微球表面的生物探针；所述无机/聚合物微球包括石墨烯纳米片、分散在石墨烯纳米片表面的石墨烯量子点壳层以及修饰在所述石墨烯量子点壳层表面的聚合物层；所述聚合物层为羧基化的纳米纤维素晶体/聚丙烯酰胺二元网络凝胶层。本发明专利技术还公开了该液相悬浮式生物芯片的制备方法。本发明专利技术制得的液相悬浮式生物芯片，单分散性好，灵敏度高。灵敏度高。

【技术实现步骤摘要】
一种用于病毒检测的高通量液相悬浮式生物芯片及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种多功能无机/聚合物复合微球及其制备方以及在病毒检测中的应用。

技术介绍

[0002]在过去十年中，半导体量子点作为一种纳米尺寸的晶体材料，在生物医学领域引起了很多研究人员的极大关注。与传统染料以及荧光蛋白相比，量子点具有独特的光学特性，比如随尺寸大小变化的发射光谱、高亮度、超强抗光漂白的光稳定性以及同时可激发多种荧光。这些特性使量子点及其偶联物做为一种可靠的光学标记，在病毒检测等生物领域有着广泛的应用。
[0003]专利CN201210073965.4提供了一种基于量子点和氧化石墨烯均相免疫检测多种病毒的方法。首先将一定量的不同颜色的链霉亲和素修饰的量子点溶液分别与不同种类病毒的生物素化抗体混合制备偶联物，将不同颜色的量子点偶联物混合后再加入过量氧化石墨烯使量子点的荧光被猝灭，再加入与抗体相对应的病毒后，量子点的荧光分别回升，然后根据不同颜色量子点的荧光强度是否回升对病毒种类进行定性识别，或根据量子点的荧光强度回升强度值对病毒含量本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于病毒检测的高通量液相悬浮式生物芯片，其特征在于，包括悬浮介质以及均匀分散在悬浮介质中的多功能微球；所述多功能微球包括无机/聚合物复合微球以及包被在所述无机/聚合物复合微球表面的生物探针；所述无机/聚合物微球包括石墨烯纳米片、分散在石墨烯纳米片表面的石墨烯量子点壳层以及修饰在所述石墨烯量子点壳层表面的聚合物层；所述聚合物层为羧基化的纳米纤维素晶体/聚丙烯酰胺二元网络凝胶层。2.根据权利要求1所述的一种用于病毒检测的高通量液相悬浮式生物芯片，其特征在于，所述生物探针为所述生物探针为病毒抗原、抗体中的一种或两种混合。3.根据权利要求1至2任一所述的一种用于病毒检测的高通量液相悬浮式生物芯片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将石墨烯量子点溶液和石墨烯纳米片分散液混合500
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1000W下超声处理30
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120min，制得复合分散液；(2)将微晶纤维素与硫酸溶液混合搅拌均匀后，以1℃/min的速率升温至40℃反应1
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2h，反应结束后加入去离子水终止反应，得到的反应液离心处理，离心得到的沉淀重新分散后制得的分散液在
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10～
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20℃下冷冻干燥10
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20h，制得纳米纤维素晶体；(3)将上述制得的纳米纤维素晶体分散于去离子水中，然后加入TEMPO、NaBr，搅拌溶解后加入次氯酸钠溶液，并添加碱液调节pH至10
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11,反应至pH无变化后滴加乙醇终止反应，离心收集上清液，将上清液
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10～
‑
20℃下冷冻干燥10
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24h，制得羧基化纤维素纳米晶体；(4)将羧基化纳米纤维素晶体加入到复合分散液中，继续加入丙烯酰胺、N,N
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亚甲基双丙烯酰胺，升温至70
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80℃，加入过硫酸钾，搅拌反应2
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5h，反应结束后冷却至室温，将反应液冷冻干燥处理，制得多功能微球；(5)将多功能微球分散去去离子水中制得分散液，然后加入磷酸二氢钠和5mol/L氢氧化钠溶液的混合液进行搅拌分散，之后加入浓度为50mg/ml的EDC和50mg/ml S
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NHS的PBS溶液，继续搅拌分散处理，加入探针，10℃、500rpm下震荡处理并在遮光条件下孵育处理10
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12h，结束后采用细胞洗涤液洗涤除去微被包被的探针，加入细胞封闭液，遮光封闭反应20
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3...

【专利技术属性】
技术研发人员：李育修，
申请(专利权)人：苏州育德扬生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：