一种多糖和病毒抗原共递送纳米疫苗、其制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种多糖和病毒抗原共递送纳米疫苗、其制备方法及应用，该纳米疫苗，其包括多糖、禽腺病毒

【技术实现步骤摘要】
一种多糖和病毒抗原共递送纳米疫苗、其制备方法及应用


[0001]本专利技术涉及治疗性或预防性纳米疫苗制剂
，特别涉及一种多糖和病毒抗原共 递送纳米疫苗、其制备方法及应用。

技术介绍

[0002]疫苗是指接种机体后，能使机体对特定疾病产生免疫力的生物制品的统称。疫苗接种 是预防传染病的最重要、最有效的手段，现在已有20余种疫苗用于人类疾病预防，其中 半数以上是病毒疫苗。由于疫苗的广泛使用，使曾经严重危害人类生命与健康的急性传染 病如天花、脊髓灰质炎、麻疹、白喉等疾病的流行得到了有效控制。疫苗大多是由杀死的 或减毒的病原体制备而成，目前也开发了几种其他类型的疫苗，即基于病原体起免疫作用 成分制成的第二代疫苗，以及基于RNA或DNA的第三代疫苗，这些疫苗在免疫原性方面均 显示出令人鼓舞的结果。虽然疫苗接种显示出针对不同疾病的保护性免疫，但仍然存在一 些问题，从而限制了它们在临床应用中的有效性。例如减毒活疫苗存在毒力回复的可能性； 灭活苗免疫效果较差，维持时间短，需多次接种；亚单位疫苗仅有几种主要抗原，免疫原 性弱，预防接种效果稍差；用量较大DNA和RNA疫苗感染风险小，但易被降解，因此较难 靶向运输到目标部位。
[0003]在过去的十多年里，纳米技术在疫苗学中得到了广泛应用，由此研制的纳米疫苗在乙 肝、流感、艾滋病毒及肿瘤等传染病和重大疾病的预防和治疗中展现出了广阔的应用前景。 相比于纯抗原疫苗，纳米疫苗的优势主要包括：(1)纳米载体可避免抗原被快速降解，提 高了疫苗制剂的稳定性；(2)提供良好的佐剂性能，促进抗原提呈细胞的激活；(3)纳米 尺寸增强了抗原在淋巴结的富集，进一步提升其免疫应答能力。近年来，许多新型无机和 有机纳米颗粒(NPs)(如金纳米颗粒、硅基纳米颗粒、脂蛋白纳米盘和纳米凝胶等)在纳 米疫苗的开发中取得了令人瞩目的成果。然而这些纳米疫苗制备技术都需使用化学合成方 法，或者需要进一步将合成方法与基于细胞的半生物合成步骤相结合，制备工艺较为繁琐， 抗原的活性无法有效保证。利用工程化的细菌或哺乳动物细胞只需一步即可实现蛋白质的 合成，由此开发的如病毒样颗粒、铁蛋白等生物合成的蛋白纳米疫苗不仅具有生产时间短、 成本低等优点，还具有更高的生物相容性和安全性。然而，该策略仍然面临抗原装载率低， 难以偶联具有复杂结构的多糖抗原等技术难点。

技术实现思路

[0004]本部分的目的在于概述本专利技术的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在 本部分以及本申请的说明书摘要和专利技术名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说 明书摘要和专利技术名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本专利技术的范围。
[0005]鉴于上述的技术缺陷，提出了本专利技术一种多糖和病毒抗原共递送纳米疫苗、其制备方 法及应用，目的是提供了一种以多糖为佐剂和以病毒重组蛋白为抗原以维生素E聚乙
二醇 琥珀酸酯为载体的共递送纳米疫苗制备方法。该疫苗用于防治病毒性疾病具有显著的效果。 在畜牧养殖中，可以用于烈性传染性疾病如禽腺病毒等的防治，为畜牧养殖业带来巨大的 经济效益。
[0006]因此，作为本专利技术其中一个方面，本专利技术克服现有技术中存在的不足，提供一种多糖 和病毒抗原共递送纳米疫苗、其制备方法及应用。
[0007]为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：一种多糖和病毒抗原共递送纳米 疫苗，其包括包括多糖、病毒抗原和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯，所述多糖、病毒抗原和 维生素E聚乙二醇琥珀酸酯的质量比为(0.5
‑
2):1:(0.5
‑
2)。
[0008]优选的，所述多糖包括益生菌胞外多糖、植物多糖中的一种或几种。
[0009]优选的，所述病毒抗原为腺病毒抗原
[0010]优选的，所述病毒抗原为腺病毒
‑
4型Penton重组蛋白
[0011]优选的，所述纳米疫苗的粒径大小范围为1～110nm
[0012]优选的，所述纳米疫苗的粒径大小范围为40～60nm。
[0013]作为本专利技术其中一个方面，本专利技术提供一种多糖和病毒抗原共递送纳米疫苗的制备方 法，其包括以下步骤，混合多糖、病毒抗原和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯得到混合液，所 述混合液在400～1000rpm/min，25℃～37℃条件下进行自组装反应0.5h～2h。
[0014]优选的，所述进行自组装反应，其为匀速滴加所述混合液进行自组装反应，滴加速度 为2mL/min
‑
4mL/min。
[0015]作为本专利技术其中一个方面，本专利技术提供一种多糖和病毒抗原共递送纳米疫苗在防治腺 病毒传染性疾病方面的应用。
[0016]优选的，所述腺病毒传染性疾病为禽腺病毒
‑
4型JS株感染引起的疾病。
[0017]本专利技术的有益效果：
[0018]本专利技术一方面提供了一种多糖和病毒抗原共递送纳米疫苗，由多糖、病毒抗原和维生 素E聚乙二醇琥珀酸酯组成。与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：
[0019]1.本专利技术中的共递送纳米疫苗显著降低了禽腺病毒发病率和死亡率。各组试验鸡在免 疫后三周进行攻毒，攻毒后2天内对照组的鸡只全部死亡，各免疫组鸡只均正常采食和饮 水，精神状态也正常。将死亡鸡只进行剖检，对照组鸡剖检后可见明显的心包积液，颜色 呈浅黄色、较浓稠；肝脏肿大变性，触之易碎，外观呈土黄色，而免疫组鸡的肝脏和心脏 均正常。
[0020]2.本专利技术中的共递送纳米疫苗不仅能够降低禽腺病毒发病率和死亡率，还能够刺激机 体迅速产生更强的免疫应答，并维持机体较高水平的免疫应答。
[0021]3.本专利技术中的共递送纳米疫苗不仅能够降低禽腺病毒发病率和死亡率，刺激机体迅速 产生免疫应答，还能降低鸡只排毒，缓解器官损伤。
附图说明
[0022]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附 图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领 域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的 附图。其中：
[0023]图1为制备共递送纳米疫苗中自制的纳米混合仪；
[0024]图2为实施例1中益生菌胞外多糖和禽腺病毒
‑
4型Penton重组蛋白共递送纳米疫苗的 透射电镜观察；
[0025]图3为实施例1中益生菌胞外多糖和禽腺病毒
‑
4型Penton重组蛋白共递送纳米疫苗的 粒径分布检测；
[0026]图4为实施例2中白术多糖和禽腺病毒
‑
4型Penton重组蛋白共递送纳米疫苗的透射电 镜观察；
[0027]图5为实施例2中白术多糖和禽腺病毒
‑
4型Penton重组蛋白共递送纳米疫苗的粒径分 布检测；
[0028]图6为对照例1中所制备的18种纳米材料的粒径结果；
[0029]图7为对照例1中所制备的18种纳米材料的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多糖和病毒抗原共递送纳米疫苗，其特征在于：包括多糖、病毒抗原和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯，所述多糖、病毒抗原和维生素E聚乙二醇琥珀酸酯的质量比为(0.5
‑
2):1:(0.5
‑
2)。2.根据权利要求1所述的多糖和病毒抗原共递送纳米疫苗，其特征在于：所述多糖包括益生菌胞外多糖、植物多糖中的一种或几种。3.根据权利要求1或2所述的多糖和病毒抗原共递送纳米疫苗，其特征在于：所述病毒抗原为腺病毒抗原。4.根据权利要求3所述的多糖和病毒抗原共递送纳米疫苗，其特征在于：所述病毒抗原为腺病毒
‑
4型Penton重组蛋白。5.根据权利要求1或2或4所述的多糖和病毒抗原共递送纳米疫苗，其特征在于：所述纳米疫苗的粒径大小范围为1～110nm。6.根据权利要求5所述的多糖和病毒抗原共递送纳米疫苗，其特征在于：所述纳米疫苗的粒径大...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋素泉，范文韬，闫丽萍，张硕，吴钰亭，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：