几丁质酶突变体的制备及其应用制造技术

本发明专利技术借助重组蛋白技术实现BcchiA1在枯草芽孢杆菌中的分泌型表达，显著降低菌株本底蛋白的干扰，简化下游蛋白纯化工艺，控制生产成本。同时，本发明专利技术涉及公开几株高酶活几丁质酶突变体，酶比活力较BcchiA1野生型提高了18.47％

【技术实现步骤摘要】
几丁质酶突变体的制备及其应用


[0001]本专利技术属于基因工程
，具体涉及环状芽孢杆菌几丁质酶突变体重组菌的构建及其相关应用。

技术介绍

[0002]几丁质酶是一类用于断裂几丁质β
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(1,4)糖苷键的水解酶，是几丁质降解过程中发挥关键作用的专一性酶，能够生成几丁寡糖、几丁二糖以及N
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乙酰葡萄糖胺等。几丁质酶广泛分布于病毒、细菌、真菌、昆虫、高等植物和动物等多种生物体内，并在生命周期中执行诸多生物功能。此外，几丁质酶还可用于几丁质废物的生物处理、几丁寡糖的制备、生物防治剂以及用于菌株改良的真菌和酵母中分离原生质体等，在农业和环境等各个方面具有不可估量的应用潜力。
[0003]但是由于几丁质结晶度高，使几丁质酶与底物无法充分接触，导致生物酶法效率低下。因此，我们致力于找寻几丁质酶活性优异的菌株。其中，环状芽孢杆菌几丁质酶BcchiA1，对于不溶性的几丁质具有很高的亲和力和水解活性，应用价值巨大。
[0004]目前，许多微生物能够分泌一定量的几丁质酶，但是普遍存在分泌量不足的问题。重组蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种几丁质酶突变体，其特征在于，所述几丁质酶突变体的氨基酸序列在SEQ ID No.2所示的氨基酸序列的55位Pro突变为Thr。2.根据权利要求1所述的几丁质酶突变体，其特征在于，所述几丁质酶突变体的氨基酸序列在SEQ ID No.2所示的氨基酸序列的55位Pro突变为Thr和81位Asp突变为Glu，或55位Pro突变为Thr和299位Tyr突变为Met。3.根据权利要求1所述的几丁质酶突变体，其特征在于，所述几丁质酶突变体的氨基酸序列在SEQ ID No.2所示的氨基酸序列的55位Pro突变为Thr、216位Ser突变为Met和301位Arg突变为Thr，或55位Pro突变为Thr、216位Ser突变为Met和299位Tyr突变为Met，或55位Pro突变为Thr、216位Ser突变为Met和326位Trp突变为Arg，或55位Pro突变为Thr、127位Trp突变为Leu和215位Ala突变为Val，或55位Pro突变为Thr、81位Asp突变为Glu和299位Tyr突变为Met，或10位Tyr突变为Met、55位Pro突...

【专利技术属性】
技术研发人员：张大伟，李金龙，王思佳，付刚，
申请(专利权)人：中国科学院天津工业生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：