【技术实现步骤摘要】
一种蛋白质标记效果快速检测方法
[0001]本专利技术涉及蛋白质标记
，具体涉及一种蛋白质标记效果快速检测方 法。
技术介绍
[0002]虽然显示出较高的特异性与灵敏度，但存在着反应体系复杂、探针设计合成 难度高或需要结合PCR技术放大信号等局限性；本专利技术以凝血酶作为目标蛋白， 发展了一种更为简单、灵敏的基于接近效应的蛋白质检测新方法；该方法简化了 核酸适体探针的设计，直接将凝血酶的两个核酸适体设计成具有末端互补碱基序 列的线性探针；当二者同时结合到凝血酶的两个识别位点时，探针末端互补部分 借助蛋白质介导下的接近效应形成稳定的杂交，从而可以在聚合酶作用下引发聚 合反应。
技术实现思路
[0003]针对上述现有技术存在的问题，本专利技术提供一种蛋白质标记效果快速检测方 法，随着SELEX技术的进一步发展，将会有更多的与蛋白质不同位点结合的核酸 适体被筛选出来；通过发展二步法SELEX技术，即第一步筛选出一个结合位点的 核酸适体后，在已筛选出的核酸适体的饱和浓度下进行第二步筛选，得到另一个 结合位点的核...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种蛋白质标记效果快速检测方法，其特征在于，包括通过SELEX技术，筛选出凝血酶两个独立结合位点的核酸适体，作为基于接近效应原理检测方法的研究对象；分别在核酸适体的末端设计了一段较短的互补碱基序列，在37℃时互补末端不能形成稳定的杂交，因而在聚合酶的作用下无法进行聚合反应；而当两个核酸适体探针同时与凝血酶的两个位点结合时，互补末端在凝血酶介导下相互接近，从而形成稳定的杂交，通过聚合酶的作用分别向末端进行聚合反应；两条探针所结合的凝血酶量越多，则形成稳定杂交的探针对越多，聚合反应的初速度也就越大，反之则越慢；凝血酶的量决定了形成稳定杂交的探针对的数目，后者与聚合反...
【专利技术属性】
技术研发人员：洪斌，李俊峰，余澹台，陈耀真，
申请(专利权)人：湖北普罗金科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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