阳离子胆固醇衍生物、纳米复合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种阳离子胆固醇衍生物、纳米复合物及其制备方法和应用，具体涉及一种阳离子脂质类基因转染试剂，特别是涉及一种含有天然胆固醇骨架和赖氨酸头基的阳离子胆固醇衍生物合成、纳米复合物制备方法和其作为高效基因载体用于小分子干扰RNA(siRNA)和microRNA转染试剂的应用；本发明专利技术提供的含有天然胆固醇骨架和赖氨酸头基的阳离子胆固醇衍生物选择了最适于siRNA结合的Linker链长，且本发明专利技术所提供的纳米复合物优选的采用微流控技术，对多种参数进行系统优化(包括总流速、流速比、缓冲体系、芯片结构等)，形成稳定的纳米复合物，无需辅助脂质即可实现高效的基因递送能力。需辅助脂质即可实现高效的基因递送能力。需辅助脂质即可实现高效的基因递送能力。

【技术实现步骤摘要】
阳离子胆固醇衍生物、纳米复合物及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及阳离子脂质类基因转染试剂，具体涉及一种阳离子胆固醇衍生物、纳米复合物及其制备方法和应用，特别涉及一种含有天然胆固醇骨架和赖氨酸头基的阳离子胆固醇衍生物、及纳米复合物及其制备方法和其作为高效基因载体用于小分子干扰RNA(siRNA)、microRNA转染试剂的应用。

技术介绍

[0002]构建生物相容性好、基因稳定、转染效率高的基因传递系统是当前研究的热点之一。随着基因治疗和基因药物的成功应用，非病毒载体可能推动基因传递系统的进一步创新。近年来，用于基因传递的非病毒载体发展迅速，其中各种阳离子脂质和阳离子聚合物被报道为有前途的纳米载体。胆固醇是一种重要的天然脂质，经常参与许多重要的生物过程，如膜形成、脂质运输、代谢等。胆固醇是构建功能性基因载体最常用的类固醇脂质之一。由于羟基赋予胆固醇可修饰性，因此多项研究合成了多种胆固醇衍生物，使其凭借卓越的特性，以利于基因载体，如水溶性、正电荷和柔韧性。其中，阳离子胆固醇衍生物成为焦点，其中胆固醇作为疏水位点发挥作用，阳离子头作为基因本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种含有天然胆固醇骨架和赖氨酸头基的阳离子胆固醇衍生物，其特征在于，其化学结构可由通式(Ⅰ)表示：上式结构中，连接基团Linker选自：
‑
(CH2)6
‑
或
‑
(CH2)7
‑
，A
‑
表示阴离子反离子部分：氯负离子、磷酸根负离子、甲磺酸根负离子或三氟乙酸根负离子。2.一种如权利要求1所述的含有天然胆固醇骨架和赖氨酸头基的阳离子胆固醇衍生物的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：将烷基二醇溶于充分脱水干燥的有机溶剂中，在碱催化下缓慢滴加到事先溶于有机溶剂的胆固醇氯甲酸酯中，于0
‑
50℃搅拌反应12
‑
24h，得到中间体胆固醇单取代二醇碳酸酯；S2：将BOC保护的天然赖氨酸砌块化合物溶于脱水干燥的有机溶剂中，在碱催化下缓慢滴加到溶于有机溶剂的S1制备所得的中间体胆固醇单取代二醇碳酸酯中，加入缩合剂后于0
‑
50℃搅拌反应12
‑
24h，去除有机溶剂，进行柱层析；然后产品溶于过量酸中室温搅拌反应1
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2h，加醚沉淀后过滤干燥得到含有天然胆固醇骨架和赖氨酸头基的阳离子胆固醇衍生物。3.根据权利要求2所述的含有天然胆固醇骨架和赖氨酸头基的阳离子胆固醇衍生物的合成方法，其特征在于，步骤S1中，碱、烷基二醇、胆固醇氯甲酸酯的摩尔比为0.05
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0.1：4.0
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6.0：1.0。4.根据权利要求2所述的含有天然胆固醇骨架和赖氨酸头基的阳离子胆固醇衍生物的合成方法，其特征在于，步骤S2中，BOC保护的天然赖氨酸与中间体胆固醇单取代二醇碳酸酯的摩尔比为1...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈剑，朱照远，张莉，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：