试剂盒和样本中抗结核药物及其代谢物的检测方法技术

本发明专利技术具体提供一种试剂盒和样本中抗结核药物及其代谢物的检测方法。所述试剂盒用于检测样本中抗结核药物及其代谢物，包括校准品、质控品、仪器质控品以及同位素内标准品；校准品和质控品中均含有利福平、异烟肼、利福喷丁、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、氯法齐明、环丝氨酸、莫西沙星、左氧氟沙星、利奈唑胺、乙酰异烟肼、贝达喹啉及去乙酰利福平；仪器质控品包括含有利福平、异烟肼、利福喷丁、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、氯法齐明、环丝氨酸、莫西沙星、左氧氟沙星、利奈唑胺、乙酰异烟肼、贝达喹啉及去乙酰利福平的甲醇溶液；同位素内标准品中包含校准品中所含物质对应的内标物。本发明专利技术的试剂盒可检测多种样本类型中抗结核药物及其代谢物的浓度。样本类型中抗结核药物及其代谢物的浓度。样本类型中抗结核药物及其代谢物的浓度。

【技术实现步骤摘要】
试剂盒和样本中抗结核药物及其代谢物的检测方法


[0001]本专利技术属于抗结核药物检测
，尤其涉及一种试剂盒和样本中抗结核药物及其代谢物的检测方法。

技术介绍

[0002]结核病具有耐多药(MDR
‑
TB)和极度耐药(XDR
‑
TB)的特性，因此如何抑制结核病的耐药性显得十分重要，治疗药物浓度监测(TDM)有利于为临床医生对结核病患者的早期个性化治疗和优化治疗提供借鉴。现有抗结核药物浓度监测方法一般通过试剂盒进行检测，但是目前的试剂盒只能进行单一药物分析或者同时评估一线抗结核药物，同时只能检测血浆或血清中抗结核药物的浓度，可检测的样本较少，并且根据目前的试剂盒的检测结果，并不能获得患者的药物代谢状况，也不能有效分析患者同时使用多种抗结核药物时药物之间是否有相互影响。

技术实现思路

[0003]本专利技术实施例的第一个目的在于提供一种试剂盒，以解决现有抗结核药物检测只能监测抗结核药物浓度而不能监测其相应的代谢状况的问题。
[0004]本专利技术实施例采用的技术方案如下：
[0005]一种试剂盒，用于检测样本中抗结核药物及其代谢物；
[0006]所述试剂盒包括：
[0007]校准品，所述校准品中含有利福平、异烟肼、利福喷丁、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、氯法齐明、环丝氨酸、莫西沙星、左氧氟沙星、利奈唑胺、乙酰异烟肼、贝达喹啉以及去乙酰利福平；
[0008]质控品，所述质控品中含有利福平、异烟肼、利福喷丁、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、氯法齐明、环丝氨酸、莫西沙星、左氧氟沙星、利奈唑胺、乙酰异烟肼、贝达喹啉以及去乙酰利福平；
[0009]仪器质控品，所述仪器质控品包括含有利福平、异烟肼、利福喷丁、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、氯法齐明、环丝氨酸、莫西沙星、左氧氟沙星、利奈唑胺、乙酰异烟肼、贝达喹啉以及去乙酰利福平的甲醇溶液；
[0010]以及，同位素内标准品，所述同位素内标准品中包含有利福平
‑
内标、异烟肼
‑
内标、利福喷丁
‑
内标、吡嗪酰胺
‑
内标、乙胺丁醇
‑
内标、氯法齐明
‑
内标、环丝氨酸
‑
内标、莫西沙星
‑
内标、左氧氟沙星
‑
内标、利奈唑胺
‑
内标、乙酰异烟肼
‑
内标、贝达喹啉
‑
内标以及去乙酰利福平
‑
内标。
[0011]优选地，所述试剂盒还包括C18
‑
PFP混合型色谱柱以及校准品稀释液。
[0012]优选地，所述试剂盒还包括流动相A和流动相B；所述流动相A包括去离子水和溶于所述去离子水中的添加剂；所述流动相B包括甲醇和乙腈的混合液以及溶于所述混合液中的添加剂。
[0013]优选地，所述添加剂包括甲酸、乙酸、三乙胺、三氟乙酸中的任一种。
[0014]优选地，所述试剂盒还包括微孔板、前处理板封膜以及上机板封膜。
[0015]优选地，所述校准品还含有普瑞玛尼、利福布丁、阿米卡星、特立齐酮、乙硫异烟胺、丙硫乙酰胺、对氨基水杨酸、帕司烟肼以及美罗培南中的至少一种；
[0016]所述质控品还含有普瑞玛尼、利福布丁、阿米卡星、特立齐酮、乙硫异烟胺、丙硫乙酰胺、对氨基水杨酸、帕司烟肼以及美罗培南中的至少一种；
[0017]所述同位素内标准品还含有普瑞玛尼
‑
内标、利福布丁
‑
内标、阿米卡星
‑
内标、特立齐酮
‑
内标、乙硫异烟胺
‑
内标、丙硫乙酰胺
‑
内标、对氨基水杨酸
‑
内标、帕司烟肼
‑
内标以及美罗培南
‑
内标中的至少一种。
[0018]相对于现有技术而言，本专利技术实施例提供的试剂盒，不仅可以监测患者抗结核药物的浓度，而且还能监测抗结核药物在患者体内的代谢物以及多种抗结核药物在患者体内的相互影响关系，同时还能够通过血浆、血清、脑脊液以及尿液来实现抗结核药物的监测，能有效地提高抗结核药物监测的通量和获得患者更多的药物服用信息和药物代谢信息。
[0019]本专利技术实施例的第二个目的在于提供一种样本中抗结核药物及其代谢物的检测方法，其采用的具体技术方案如下：
[0020]采用上述所述的试剂盒进行检测，包括以下步骤：
[0021]采用溶剂对所述同位素内标准品进行溶解处理，以获得释放剂；
[0022]将样本溶于所述释放剂中并纯化处理，以获得上清液；
[0023]对所述上清液进行稀释处理后，在液相色谱串联质谱仪中进行上机检测，以获取所述样本中的抗结核药物以及所述抗结核药物的代谢物状况。
[0024]优选地，所述样本包括血浆、血清、脑脊液以及尿液中的任一种。
[0025]优选地，所述上机检测的检测指标包括异烟肼、利福平、利福喷丁、环丝氨酸、乙胺丁醇、左氧氟沙星、莫西沙星、吡嗪酰胺、氯法齐明、贝达喹啉、利奈唑胺中至少一种的浓度；
[0026]以及，检测乙酰异烟肼、异烟酸、25
‑
O
‑
去乙酰利福平、25
‑
O
‑
去乙酰利福喷丁、吡嗪酸、5
‑
羟吡嗪酸和贝达喹啉M2中至少一种的浓度。
[0027]优选地，还包括检测普瑞玛尼、利福布丁、阿米卡星、特立齐酮、乙硫异烟胺、丙硫乙酰胺、对氨基水杨酸、帕司烟肼、美罗培南中至少一种的浓度；以及，检测25
‑
O
‑
去乙酰利福布丁的浓度；
[0028]和/或，所述纯化处理为包括对溶于所述释放剂中的所述样本进行沉淀处理、冷冻处理和离心处理。
[0029]相对于现有技术，本专利技术实施例提供的样本中抗结核药物及其代谢物的检测方法，具有简单快捷无需分步操作的特点，不仅能够检测血浆样本，而且还能够检测血清样本、脑脊液样本以及尿液样本，从而可以有效地扩大了抗结核药物样本检测的种类，同时本检测方法采用同位素内标进行归一化校正，有效地提高检测结果的可靠性；更重要地是，本专利技术的检测方法，不但可以获取抗结核药物的浓度，还能够获取抗结核药物的代谢物浓度等相关信息，从而可以为患者给药提供可靠的方案，还可以获取多种抗结核药物的相互作用关系以及代谢是否异常等信息。
附图说明
[0030]为了更清楚地说明本专利技术施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0031]图1是本专利技术实施例一中校准曲线中11种抗结核药物及2种抗结核药物的代谢物的提取离子流色谱图谱；
[0032]图2是本专利技术实施例二结核病患者在服用抗结核药物后血清样本中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒用于检测样本中抗结核药物及其代谢物；所述试剂盒包括：校准品，所述校准品中含有利福平、异烟肼、利福喷丁、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、氯法齐明、环丝氨酸、莫西沙星、左氧氟沙星、利奈唑胺、乙酰异烟肼、贝达喹啉以及去乙酰利福平；质控品，所述质控品中含有利福平、异烟肼、利福喷丁、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、氯法齐明、环丝氨酸、莫西沙星、左氧氟沙星、利奈唑胺、乙酰异烟肼、贝达喹啉以及去乙酰利福平；仪器质控品，所述仪器质控品包括含有利福平、异烟肼、利福喷丁、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、氯法齐明、环丝氨酸、莫西沙星、左氧氟沙星、利奈唑胺、乙酰异烟肼、贝达喹啉以及去乙酰利福平的甲醇溶液；以及，同位素内标准品，所述同位素内标准品中包含有利福平
‑
内标、异烟肼
‑
内标、利福喷丁
‑
内标、吡嗪酰胺
‑
内标、乙胺丁醇
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内标、氯法齐明
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内标、环丝氨酸
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内标、莫西沙星
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内标、左氧氟沙星
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内标、利奈唑胺
‑
内标、乙酰异烟肼
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内标、贝达喹啉
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内标以及去乙酰利福平
‑
内标。2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括C18
‑
PFP混合型色谱柱以及校准品稀释液。3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括流动相A和流动相B；所述流动相A包括去离子水和溶于所述去离子水中的添加剂；所述流动相B包括甲醇和乙腈的混合液以及溶于所述混合液中的添加剂。4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述添加剂包括甲酸、乙酸、三乙胺、三氟乙酸中的任一种。5.如权利要求1至4任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括微孔板、前处理板封膜以及上机板封膜。6.如权利要求1至4任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述校准品还含有普瑞玛尼、利福布丁、阿米卡星、特立齐酮、乙硫异烟胺、丙硫乙酰胺、对氨基水杨酸、帕司烟...

【专利技术属性】
技术研发人员：曲久鑫，林梁，邹瑾，饶维桥，廖云莉，张健聪，
申请(专利权)人：深圳市第三人民医院深圳市肝病研究所，
类型：发明
国别省市：