一种猪流行性腹泻病毒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种猪流行性腹泻病毒及其应用，该猪流行性腹泻病毒命名为PEDV

【技术实现步骤摘要】
一种猪流行性腹泻病毒及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种猪流行性腹泻病毒及其应用。

技术介绍

[0002]猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)是一种可引起猪发生以水样呕吐、腹泻、脱水为主要特征的肠道传染病，死亡率高达100％。PEDV感染除会造成仔猪的直接经济损失外，同时也会感染母猪，造成母猪泌乳减少或停止、回乳、情期紊乱等，对养猪业具有极高的危害性。
[0003]经典PEDV毒株感染力弱，传播速度慢，主要以地方性流行为主要流行特点。但近年来，世界范围内不断出现新的PEDV变异流行毒株，其特点主要为传播速度快、高发病率和高死亡率。这些PEDV变异毒株无论是在致病性还是流行特点方面都与以往的经典毒株有所不同，其基因水平差异甚大，同一性相对较低。但尽管不同国家和地区的分离毒株在基因序列有所差异，但它们都仍处在一个遗传分支上，而经典PEDV毒株则处在另外一个遗传分支。相关研究表明，相对经典毒株，变异毒株的主要抗原基因出现较大范围的插入、缺失和点突变，这表明变异毒株在整体上发生较大变异，这个PEDV的防治工作提出了较大的挑战。
[0004]因此，由于PEDV变异株的流行，市售商品化疫苗已无法产生有效的防护作用，开发能够有效防护PEDV变异株的疫苗及相关成产品对于养殖业具有极为重要的意义。

技术实现思路

[0005]本专利技术旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种猪流行性腹泻病毒及其应用，专利技术人通过分离得到的新的流行性腹泻病毒毒株CH
‑
HuN，基于该毒株制备得到的疫苗相较于传统毒株疫苗，产生更多的抗体，具有更好的保护效果，能够很好的应对当下流行的流行性腹泻病毒。
[0006]本专利技术的第一个方面，提供一种猪流行性腹泻病毒。
[0007]根据本专利技术的第一个方面，在本专利技术的一些实施方式中，所述猪流行性腹泻病毒被命名为猪传染性腹泻病毒(在实施例中，代称为CH
‑
HuN或PEDV
‑
HuN)，其于2021年06月02日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏编号为：CGMCC No.20280。
[0008]专利技术人经过测序发现，该毒株属于猪流行性腹泻病毒，但其与经典的猪流行性腹泻病毒株分属于不同分支，且同一性较低。该毒株的TCID
50
值为10
‑
6.46
TCID
50
/0.2mL。
[0009]本专利技术的第二个方面，提供本专利技术第一个方面所述的猪流行性腹泻病毒作为猪流行性腹泻病毒疫苗候选株的应用。
[0010]专利技术人经过测序发现，该毒株属于猪流行性腹泻病毒，但其与经典的猪流行性腹泻病毒株分属于不同分支，因此，可以作为猪流行性腹泻病毒疫苗候选株，以应对当下流行的猪流行性腹泻病毒的爆发。
[0011]本专利技术的第三个方面，提供本专利技术第一个方面所述的猪流行性腹泻病毒在制备用
于预防和/或控制猪流行性腹泻病毒引起的相关疾病的药物中的应用。
[0012]本专利技术的第四个方面，提供本专利技术第一个方面所述的猪流行性腹泻病毒在制备猪流行性腹泻病毒疫苗中的应用。
[0013]根据本专利技术的第四个方面，在本专利技术的一些实施方式中，所述猪流行性腹泻病毒疫苗的适用对象包括妊娠期母猪和仔猪。
[0014]当然，本领域技术人员也可以根据实际使用需求，将该猪流行性腹泻病毒疫苗用于其他类型的猪或用于其他牲畜。
[0015]根据本专利技术的第四个方面，在本专利技术的一些实施方式中，所述猪流行性腹泻病毒疫苗为灭活疫苗。
[0016]根据本专利技术的第四个方面，在本专利技术的一些实施方式中，用于制备猪流行性腹泻病毒疫苗的猪流行性腹泻病毒的病毒液中的病毒含量≥10
‑
6.0
TCID
50
/0.2mL。
[0017]在本专利技术的一些优选实施方式中，所述猪流行性腹泻病毒疫苗还含有药学上可接受的佐剂或载体。
[0018]在本专利技术的一些优选实施方式中，所述佐剂为化学类免疫佐剂、微生物类免疫佐剂和生化类免疫佐剂中的一种或几种。
[0019]根据本专利技术的第四个方面，在本专利技术的一些实施方式中，所述猪流行性腹泻病毒疫苗的制备方法为：
[0020](1)取本专利技术第一个方面所述的猪流行性腹泻病毒(病毒含量≥10
‑
6.0
TCID
50
/0.2mL)接种至Vero细胞上进行扩繁；
[0021](2)离心回收病毒液，灭活得到抗原；
[0022](3)将抗原加入水相中，与油相溶液混合后即得灭活疫苗。
[0023]在本专利技术的一些优选实施方式中，步骤(2)中所述灭活采用终浓度0.2％的甲醛进行灭活。
[0024]在本专利技术的一些优选实施方式中，步骤(3)的具体操作为：
[0025]油相制备：将注射用白油与司本
‑
80按96∶4比例(v/v)混合，以质量份计，再加入硬脂酸铝2份，充分混匀后，高压蒸气灭菌后得到油相溶液。
[0026]水相制备：以质量份计，将96份步骤(1)中得到的抗原液与4份灭菌后的吐温
‑
80混合，充分振摇后使吐温
‑
80完全溶解，制成水相溶液。
[0027]乳化：将上述制备得到的油相溶液和水相溶液按1:1的比例(v/v)进行混合，8000～12000r/min条件下乳化3次，每次2～3分钟，得到免疫用灭活疫苗。
[0028]本专利技术的第五个方面，提供一种猪流行性腹泻病毒疫苗，该疫苗中包括本专利技术第一个方面所述的猪流行性腹泻病毒。
[0029]根据本专利技术的第五个方面，在本专利技术的一些实施方式中，所述猪流行性腹泻病毒疫苗的适用对象包括妊娠期母猪和仔猪。
[0030]当然，本领域技术人员也可以根据实际使用需求，将该猪流行性腹泻病毒疫苗用于其他类型的猪或用于其他牲畜。
[0031]根据本专利技术的第五个方面，在本专利技术的一些实施方式中，所述猪流行性腹泻病毒疫苗为灭活疫苗。
[0032]根据本专利技术的第五个方面，在本专利技术的一些实施方式中，用于制备猪流行性腹泻
病毒疫苗的猪流行性腹泻病毒的病毒液中的病毒含量≥10
‑
6.0
TCID
50
/0.2mL。
[0033]在本专利技术的一些优选实施方式中，所述猪流行性腹泻病毒疫苗还含有药学上可接受的佐剂或载体。
[0034]在本专利技术的一些优选实施方式中，所述佐剂为化学类免疫佐剂、微生物类免疫佐剂和生化类免疫佐剂中的一种或几种。
[0035]根据本专利技术的第五个方面，在本专利技术的一些实施方式中，所述猪流行性腹泻病毒疫苗的制备方法为：
[0036](1)取本专利技术第一个方面所述的猪流行本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种猪流行性腹泻病毒，其特征在于，所述猪流行性腹泻病毒命名为猪传染性腹泻病毒，于2021年06月02日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.20280。2.权利要求1所述的猪流行性腹泻病毒作为猪流行性腹泻病毒疫苗候选株的应用。3.权利要求1所述的猪流行性腹泻病毒在制备用于预防和/或控制猪流行性腹泻病毒引起的相关疾病的药物中的应用。4.权利要求1所述的猪流行性腹泻病毒在制备猪流行性腹泻病毒疫苗中的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述猪流行性腹泻病毒疫苗的适用对象包括妊娠期母猪和仔猪。6.一种猪流行性腹泻病毒疫苗，其特征在于，所述疫苗中包括如权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏平华，
申请(专利权)人：广州格雷特生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：