一种SAA重组蛋白及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种SAA重组蛋白及其制备方法和应用，该制备方法，包括以下步骤：S1重组质粒、转化与培养：将具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列对应的核苷酸序列的SAA重组质粒转化至BLR(DE3)菌，培养获得活化菌株，然后1:1000接种到LB培养基中，恒温振荡培养，进行摇瓶实验，诱导，离心得菌体；S2纯化：将所述步骤S1中离心得到的菌体沉淀进行细胞裂解，获得包涵体蛋白，His柱过柱纯化，8M尿素和260mM咪唑洗脱，获得SAA重组蛋白，透析复性获得最终SAA重组蛋白。本发明专利技术的制备方法可大幅提高重组血清淀粉样蛋白SAA抗原的产量和活性，且SAA重组蛋白在液体状态下稳定性好，能满足作为临床诊断的校准品要求，用作SAA免疫诊断试剂校准品和SAA检测试剂盒的制备。测试剂盒的制备。

【技术实现步骤摘要】
一种SAA重组蛋白及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及基因工程
，具体涉及一种SAA重组蛋白的制备方法及应用。

技术介绍

[0002]血清淀粉样蛋白(SAA)是组织淀粉样蛋白A的前体物质，与C反应蛋白(CRP)相似，是一种由肝脏细胞产生的急性时相反应蛋白。在正常人的血清中SAA以恒量存在，但在炎症或感染急性期的48～72h内SAA可增加数百至上千倍，并且在疾病的恢复期迅速下降恢复至正常水平，是一种比CRP更灵敏的诊断细菌或病毒感染的标志物。
[0003]SAA的特点包括：第一，快升快降，SAA是急性相蛋白，机体受感染后，4
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6h内即可迅速升高约1000倍，清除病原体后又可迅速的降低至正常水平，是反映机体感染情况和炎症恢复的灵敏指标；第二，互补应用，SAA与目前临床最广泛使用的CRP相比较，有一个最重要的不同之处：SAA升高见于病毒、支原体、细菌感染，且敏感性高于CRP；CRP升高见于细菌感染，病毒及支原体等病原体感染不升高或仅轻微升高。
[0004]大肠杆菌表达，生长周期短，生产成本低，转化率本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种SAA重组蛋白，其特征在于，具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。2.权利要求1所述的SAA重组蛋白在免疫诊断中的应用。3.根据权利要求2所述的SAA重组蛋白在免疫诊断中的应用，其特征在于，所述的SAA重组蛋白用作SAA免疫诊断试剂校准品。4.根据权利要求2所述的SAA重组蛋白在免疫诊断中的应用，其特征在于，所述的SAA重组蛋白用于制备SAA检测试剂盒。5.一种权利要求1的SAA重组蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1重组质粒、转化与培养：将具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列对应的核苷酸序列的SAA重组质粒转化至BLR(DE3)菌，培养获得活化菌株，然后1:1000接种到LB培养基中，恒温振荡培养，进行摇瓶实验，诱导，离心得菌体；S2纯化：将所述步骤S1中离心得到的菌体沉淀进行细胞裂解，获得包涵体蛋白，His柱过柱纯化，8M尿素和260mM咪唑洗脱，获得SAA重组蛋白，透析复性获得最终SAA重组蛋白。6.根据权利要求5所述的SAA重组蛋白的制备方法，其特征在于，在所述步骤S1中，培养获得活化菌株的温度为37℃；恒温振荡培养的...

【专利技术属性】
技术研发人员：许行尚，杰弗瑞，
申请(专利权)人：江苏华控生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：