一种结合肉毒杆菌的自体胶原蛋白注射剂制造技术

本发明专利技术涉及医学美容技术领域，尤其为一种结合肉毒杆菌的自体胶原蛋白注射剂，包括自体成纤维组织、冰醋酸溶液、胶原酶、DMEM培养液、胃蛋白酶溶液、NaCl溶液、非离子型表面活性剂、透明质酸溶液、柠檬酸溶液、肉毒杆菌、磷酸氢二钠溶液、交联剂以及缓冲液，本发明专利技术可以有效解决目前除皱有许许多多的办法，局部外用各种各样的除皱霜、抗皱霜、防晒霜只能改善外观，它对皱纹的消除不会有较大的作用，医用胶原注射充填术有效，但因为是非自身物质，只能存在几个月就会被机体清除，同时注射后会有一定的过敏反应的问题。反应的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种结合肉毒杆菌的自体胶原蛋白注射剂


[0001]本专利技术涉及医学美容
，具体为一种结合肉毒杆菌的自体胶原蛋白注射剂。

技术介绍

[0002]皱纹是指皮肤受到外界环境影响，形成游离自由基，自由基破坏正常细胞膜组织内的胶原蛋白、活性物质，氧化细胞而形成的小细纹、皱纹，皱纹的发生归结起来有4个原因：自然老化、地心引力作用、阳光中紫外线照射使皮肤发生光老化与光损伤和面部表情肌过多的收缩，其中面部表情肌过多的收缩产生的皱纹称动力性皱纹，主要表现为眶外侧的鱼尾纹，额头纹和眉间纹、鼻唇沟纹和唇上纹和颈阔肌纹。
[0003]除皱有许许多多的办法，局部外用各种各样的除皱霜、抗皱霜、防晒霜只能改善外观，它对皱纹的消除不会有较大的作用，医用胶原注射充填术有效，但因为是非自身物质，只能存在几个月就会被机体清除，同时注射后会有一定的过敏反应。
[0004]综上所述，本专利技术通过设计一种结合肉毒杆菌的自体胶原蛋白注射剂来解决存在的问题。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种结合肉毒杆菌的自体胶原蛋白注射剂，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种结合肉毒杆菌的自体胶原蛋白注射剂，包括自体成纤维组织、冰醋酸溶液、胶原酶、DMEM培养液、胃蛋白酶溶液、NaCl溶液、非离子型表面活性剂、透明质酸溶液、柠檬酸溶液、肉毒杆菌、磷酸氢二钠溶液、交联剂以及缓冲液，且各成分按照重量比分别为：自体成纤维组织25～30份、冰醋酸溶液15～30份、胶原酶5～8份、DMEM培养液50～60份、胃蛋白酶溶液3～5份、NaCl溶液45～50份、非离子型表面活性剂10～20份、透明质酸溶液30～35份、柠檬酸溶液20～25份、肉毒杆菌7～10份、磷酸氢二钠溶液10～15份、交联剂2～3份以及缓冲液30～35份。
[0007]作为本专利技术优选的方案，包括以下步骤：S1，在常温下用生理盐水清洗自体成纤维组织，低温干燥后，将自体成纤维组织送入粉碎机中进行粉碎，向粉碎产物加入冰醋酸溶液搅拌混合均匀，室温下离心去除下层液体，再加入胶原酶，放置于41℃恒温震荡箱中震荡65min～75min，再次离心去除上清液，然后加入DMEM培养液，恒温培养2～3天后，去除剩余的培养液，得到自体成纤维组织培养物；S2，向自体成纤维组织培养物中加入胃蛋白酶溶液进行消化反应，消化反应结束后静置分层，将上层悬浮液放入离心机中离心，收集上清液，把收集的上清液与NaCl溶液混合，静置后得到粗制自体胶原蛋白原液，把粗制自体胶原蛋白原液进行浓缩、过滤除菌后与非离子型表面活性剂、透明质酸溶液、柠檬酸溶液以及肉毒杆菌混合，制成自体胶原蛋白注
射剂原液；S3，将自体胶原蛋白注射剂原液pH值调节至5.3，加入交联剂进行交联反应，反应结束后向反应产物中加入缓冲液搅拌均匀后，取上层澄清液进行高压均质，得到自体胶原蛋白注射剂。
[0008]作为本专利技术优选的方案，所述非离子型表面活性剂为聚山梨酯－80，交联剂为N－羟基琥珀酰亚胺，缓冲液由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠以及盐酸利多卡因混合制成，且磷酸氢二钠的浓度为0.03mol/L、磷酸二氢钠的浓度为0.025mol/L、盐酸利多卡因内的为0.35％(w/v)，透明质酸溶液的质量百分比浓度为11％～12％，所述柠檬酸溶液的质量百分比浓度为4.1％～4.5％。
[0009]作为本专利技术优选的方案，所述胃蛋白酶溶液的制备方法为将胃蛋白酶溶于醋酸中制成胃蛋白酶溶液，且胃蛋白酶溶液的浓度为10mg/mL。
[0010]作为本专利技术优选的方案，所述S2中将粗制自体胶原蛋白原液浓缩的方法为：把粗制自体胶原蛋白原液放入透析袋中，在透析袋外放置聚乙烯吡咯进行浓缩。
[0011]作为本专利技术优选的方案，所述S2中将粗制自体胶原蛋白原液过滤除菌的方法为：在9℃～10℃的条件下，将粗制自体胶原蛋白原液浸入质量浓度为2.1mg/mL～2.5mg/mL的乙酸溶液中溶解5h～8h。
[0012]作为本专利技术优选的方案，所述S2中肉毒杆菌与自体成纤维组织培养物的质量比为1∶10。
[0013]作为本专利技术优选的方案，所述S1中恒温培养的温度为42℃，空气中CO2的含量为5％～7％。
[0014]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：1、本专利技术中，通过将自体成纤维组织配制得到自体胶原蛋白注射剂原液，再向自体胶原蛋白注射剂原液加入交联剂进行交联反应，从而得到自体胶原蛋白注射剂，自体成纤维组织具有合成和分泌蛋白质的功能，成可合成和分泌胶原纤维、弹性纤维、网状纤维及有机基质，它合成的前胶原蛋白分子经内切酶作用，聚合和重排，可形成与成骨细胞合成分泌的胶原原纤维一样具有64nm周期横纹的胶原原纤维，胶原原纤维经互相粘合形成胶原纤维，同时利用N－羟基琥珀酰亚胺作为交联剂，使胶原纤维发生了分子内或分子间的交联，从而降低了胶原蛋白的降解速率，提高其在体内的存留时间，在作为自体胶原蛋白注射剂后能够减少人体排异反应，并将肉毒杆菌与自体胶原蛋白注射剂结合，在利用肉毒杆菌造成皱纹的肌肉麻痹，使肌肉不收缩的同时，利用注射剂内的成纤维细胞和其他活性成分，保证机体内组织相容性，提高皱纹祛除效果。
具体实施方式
[0015]下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0016]除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同，本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具
体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术，本文所使用的术语“及／或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
[0017]本专利技术提供一种技术方案：一种结合肉毒杆菌的自体胶原蛋白注射剂，包括自体成纤维组织、冰醋酸溶液、胶原酶、DMEM培养液、胃蛋白酶溶液、NaCl溶液、非离子型表面活性剂、透明质酸溶液、柠檬酸溶液、肉毒杆菌、磷酸氢二钠溶液、交联剂以及缓冲液，且各成分按照重量比分别为：自体成纤维组织25～30份、冰醋酸溶液15～30份、胶原酶5～8份、DMEM培养液50～60份、胃蛋白酶溶液3～5份、NaCl溶液45～50份、非离子型表面活性剂10～20份、透明质酸溶液30～35份、柠檬酸溶液20～25份、肉毒杆菌7～10份、磷酸氢二钠溶液10～15份、交联剂2～3份以及缓冲液30～35份。
[0018]进一步的，包括以下步骤：S1，在常温下用生理盐水清洗自体成纤维组织，低温干燥后，将自体成纤维组织送入粉碎机中进行粉碎，向粉碎产物加入冰醋酸溶液搅拌混合均匀，室温下离心去除下层液体，再加入胶原酶，放置于41℃恒温震荡箱中震荡65min～75min，再次离心去除上清液，然后加入DMEM培养液，恒温培养2～3天后，去除剩余的培养液，得到自体成纤维组本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种结合肉毒杆菌的自体胶原蛋白注射剂，包括自体成纤维组织、冰醋酸溶液、胶原酶、DMEM培养液、胃蛋白酶溶液、NaCl溶液、非离子型表面活性剂、透明质酸溶液、柠檬酸溶液、肉毒杆菌、磷酸氢二钠溶液、交联剂以及缓冲液，且各成分按照重量比分别为：自体成纤维组织25～30份、冰醋酸溶液15～30份、胶原酶5～8份、DMEM培养液50～60份、胃蛋白酶溶液3～5份、NaCl溶液45～50份、非离子型表面活性剂10～20份、透明质酸溶液30～35份、柠檬酸溶液20～25份、肉毒杆菌7～10份、磷酸氢二钠溶液10～15份、交联剂2～3份以及缓冲液30～35份。2.一种结合肉毒杆菌的自体胶原蛋白注射剂的制备方法，包括以下步骤：S1，在常温下用生理盐水清洗自体成纤维组织，低温干燥后，将自体成纤维组织送入粉碎机中进行粉碎，向粉碎产物加入冰醋酸溶液搅拌混合均匀，室温下离心去除下层液体，再加入胶原酶，放置于41℃恒温震荡箱中震荡65min～75min，再次离心去除上清液，然后加入DMEM培养液，恒温培养2～3天后，去除剩余的培养液，得到自体成纤维组织培养物；S2，向自体成纤维组织培养物中加入胃蛋白酶溶液进行消化反应，消化反应结束后静置分层，将上层悬浮液放入离心机中离心，收集上清液，把收集的上清液与NaCl溶液混合，静置后得到粗制自体胶原蛋白原液，把粗制自体胶原蛋白原液进行浓缩、过滤除菌后与非离子型表面活性剂、透明质酸溶液、柠檬酸溶液以及肉毒杆菌混合，制成自体胶原蛋白注射剂原液；S3，将自体胶原蛋白注射剂原液pH值调节至5.3，加入交联剂进行交联反应，反应结束后向反应产物中加入缓冲液搅拌均匀后，取上层...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱晓晖，朱雪瑶，
申请(专利权)人：江苏爱薇诗医疗美容集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：