一种基于薄层色谱法的鉴别肝精膏真伪的方法技术

本发明专利技术涉及一种基于薄层色谱法的鉴别肝精膏真伪的方法，具体步骤如下：供试品溶液的制备；猪肝对照药材溶液的制备：取新鲜猪肝低温烘干后打粉，得猪肝粉，取猪肝粉1g，加水4ml，加2％盐酸1滴，摇匀，90

【技术实现步骤摘要】
一种基于薄层色谱法的鉴别肝精膏真伪的方法


[0001]本专利技术涉及肝精膏鉴别
，尤其涉及一种基于薄层色谱法的鉴别肝精膏真伪的方法。

技术介绍

[0002]肝精膏为猪牛羊等动物肝脏，经提取浓缩精制而成的一种肝脏提取物。以猪肝为原料制得的肝精膏是药物制剂肝精补血素口服液的重要中间体。猪肝载于《中华本草》，具有补肝明目，养脾健血之功效。用于肝虚目昏，夜盲。血虚萎黄等。肝精膏既为猪肝等原料提取精制而来，也具备其功效。尤其猪肝制成的肝精膏为肝精补血素口服液等药品的主要成分。现其执行标准为卫生部中药成方制剂标准，其中对肝精膏制法及质量标准描述较为粗疏，标准中对于肝精膏的化学特性并无合适的鉴别方法。历年中国药典版及地方标准均未收载其针对化学性质的质量标准，仅有物理指标，不能反映其主要性质。
[0003]据现有的文献可查阅到猪肝中主要成分有：蛋白质、脂肪、维生素A、维生素D、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B
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、烟酰胺、维生素C、叶酸、维生素E、磷、钾、镁、铁、锌、钙、硒等。经过提取浓缩精制后，肝精膏所含成分大体包括以上部分成分，有一些成分含量大幅提高，也有某些成分减少甚至缺失。
[0004]目前收载的质量标准现状：
[0005](1)部颁标准中药成方制剂第十三册WS3
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B
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2530
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97，收载肝浸膏标准，此为猪肝提取物精制前工序，仅有检查项，无鉴别项目；
[0006](2)江苏省药品标准1997年版收载肝浸膏标准，仅有检查项，无鉴别项目；
[0007](3)化药地标升国标标准第9册肝浸膏标准WS
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10001
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(HD
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0812)
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2002，鉴别项为化学鉴别，为氨基酸对茚三酮的显色反应，专属性较差。
[0008]综上所述，现有的标准中对肝精膏类动物肝脏提取物或无鉴别项标准或仅为简单的专属性较差的化学鉴别。其标准并不能反映出猪肝中的应有成分，更不能反映肝精膏的质量特征。因此，现有方法的专属性不强，结果不准确。

技术实现思路

[0009]本专利技术的目的在于克服现有技术点的不足，填补肝精膏鉴别方法的空白，解决或至少减轻目前肝浸膏的鉴别方法专属性不强，结果不准确的问题，提供一种基于薄层色谱法的鉴别肝精膏真伪的方法。
[0010]本专利技术是通过以下技术方案实现的：
[0011]一种基于薄层色谱法的鉴别肝精膏真伪的方法，具体步骤如下：
[0012]供试品溶液的制备：取待测品1g，加乙醇20ml，超声处理30min后过滤，过滤后的滤液作为供试品溶液；
[0013]猪肝对照药材溶液的制备：取新鲜猪肝低温烘干后打粉，得猪肝粉，取猪肝粉1g，加水4ml，加2％盐酸1滴，摇匀，90
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100℃保温40min，离心分离，取上层清液，浓缩至近干，加
乙醇4ml使溶解，再次离心分离，取上层清液作为猪肝对照药材溶液；
[0014]对照品溶液的制备：分别取缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸及瓜氨酸对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；
[0015]薄层色谱法检测：吸取供试品溶液2
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4μl、猪肝对照药材溶液2
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4μl、对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇
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冰乙酸
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水为展开剂，展开，取出硅胶G薄层板并晾干，向硅胶G薄层板上均匀喷洒一层茚三酮溶液，将硅胶G薄层板放入105℃恒温的烘箱内加热至斑点显色清晰；观察供试品溶液的色谱中出现斑点的位置处的主要斑点颜色和数量，在猪肝对照药材的色谱中相对应的位置处出现相同颜色和数量的斑点，且在对照品溶液的色谱中相对应的位置处也出现四个红色斑点，其位置由上到下依次为缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸以及瓜氨酸，在供试品溶液的色谱中相对应的位置处也出现相同颜色和数量的斑点时，即可确定待测品为肝精膏。当斑点较弱不易分辨时，可放置1天后待颜色加深后观察。
[0016]为了进一步实现本专利技术，可优先选用以下技术方案：
[0017]优选的，所述正丁醇
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冰乙酸
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水为正丁醇、冰乙酸与水以体积比6
‑
8:2
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3:1配制成。
[0018]优选的，所述茚三酮溶液的配制方法是1
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2g茚三酮，用乙醇稀释至100ml。
[0019]优选的，所述新鲜猪肝的烘干温度不高于60℃，烘干后水分不超过5％。
[0020]通过上述技术方案，本专利技术的有益效果是：
[0021]本专利技术专属性强可以检测肝精膏中特有成分，重现性良好，且检测时间短、速度快，直观，步骤简便，仪器简单，检测成本低。猪肝经提取浓缩精制后其主要成分为氨基酸或多肽类、维生素类以及矿物质类。其氨基酸类成分的薄层图谱具有专一性，其各斑点的颜色深度、数目及位置的组合是特有的，与其他物质不尽相同。肝精膏含有至少缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸及瓜氨酸等四种氨基酸成分，并有一定的比例关系，以此为特征即可进行鉴别。以鲜猪肝制成猪肝粉作为对照药材，替代鲜猪肝对照药材作为标准物质，其图谱与鲜猪肝一致，且可以长期保存，使用方便，大大提高了方法的可行性。
附图说明
[0022]图1为本专利技术的肝精膏样品与瓜氨酸及甘氨酸对照品溶液的色谱图；
[0023]图2为本专利技术的肝精膏样品与丙氨酸及缬氨酸对照品溶液的色谱图；
[0024]图3为本专利技术的肝精膏样品与猪肝对照药材溶液的色谱图；
[0025]图4为本专利技术的肝精膏样品、鲜猪肝制得猪肝对照药材溶液与猪肝粉制得猪肝对照药材溶液的对比色谱图；
[0026]图5为本专利技术的肝精膏样品与与瓜氨酸、甘氨酸、丙氨酸及缬氨酸对照品溶液的色谱图；
[0027]图6为本专利技术的猪肝对照药材溶液与缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸及瓜氨酸对照品溶液的色谱图之一；
[0028]图7为本专利技术的猪肝对照药材溶液与缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸及瓜氨酸对照品溶液的色谱图之二；
具体实施方式
[0029]下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0030]实施例1：
[0031]一种基于薄层色谱法的鉴别肝精膏真伪的方法，具体步骤如下：
[0032]供试品溶液的制备：取待测样品1g，加乙醇20ml，超声处理30min后过滤，过滤后的滤液作为供试品溶液；
[0033]猪肝对照药材溶液的制备：取新鲜猪肝低温烘干后打粉，得猪肝粉，取猪肝粉1g，加水4ml，加2％盐酸1滴，摇匀，100℃保温40min，离心分离，取上层清液，浓缩至近干，加乙醇4ml使本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于薄层色谱法的鉴别肝精膏真伪的方法，其特征在于，具体步骤如下：供试品溶液的制备：取待测样品1g，加乙醇20ml，超声处理30min后过滤，过滤后的滤液作为供试品溶液；猪肝对照药材溶液的制备：取新鲜猪肝低温烘干后打粉，得猪肝粉，取猪肝粉1g，加水4ml，加2％盐酸1滴，摇匀，90
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100℃保温40min，离心分离，取上层清液，浓缩至近干，加乙醇4ml使溶解，再次离心分离，取上层清液作为猪肝对照药材溶液；对照品溶液的制备：分别取缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸及瓜氨酸对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法检测：吸取供试品溶液2
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4μl、猪肝对照药材溶液2
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4μl、对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇
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冰乙酸
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水为展开剂，展开，取出硅胶G薄层板并晾干，向硅胶G薄层板上均匀喷洒一层茚三酮溶液，将硅胶G薄层板放入105℃恒温的烘箱内加热至斑点显色清晰；观察供...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦兴国，张留记，段友朋，屈淑灵，焦伟，李会芳，海红勤，牛巧利，
申请(专利权)人：河南省奥林特药业有限公司，
类型：发明
国别省市：