一种分离黑乳菇伴生真菌齿梗孢霉菌的优质培养基配方组成比例

本发明专利技术公开了一种分离黑乳菇伴生真菌齿梗孢霉菌的优质培养基配方，其特征在于，包括以下原料及重量分数：葡萄糖3

【技术实现步骤摘要】
一种分离黑乳菇伴生真菌齿梗孢霉菌的优质培养基配方


[0001]本专利技术属于菌菇种植
，具体涉及一种分离黑乳菇Lactarius lignyotus伴生真菌齿梗孢霉菌Calcarisporium arbuscula的优质培养基配方。

技术介绍

[0002]黑乳菇隶属于担子菌门Basidiomycota、蘑菇纲Agaricomycetes、红菇目Russulales、红菇科Russulaceae、乳菇属Lactarius，以子实体入药，具有祛风散寒，舒筋活络的功效；黑乳菇为外生菌根真菌，可以与杨柳科Salicaceae、壳斗科Fagaceae、桦木科Betulaceae、松科Pinaceae、龙脑香科Dipterocarpaceae、桃金娘科Myrtaceae、豆科Fabaceae形成外生菌根。齿梗孢霉菌能够与菌根真菌特异性结合，并促进菌根真菌在宿主植物根部的定植和生长，进而间接地促进植物生长和黑乳菇子实体的形成。
[0003]齿梗孢霉菌是黑乳菇重要的经济型伴生真菌，但是对齿梗孢霉菌的分离却很困难，原因是现在使用的培养基在分离培养齿梗孢霉菌的同时其它杂菌也会同时生长，很难对齿梗孢霉菌进行纯化分离，分离成功率不高。

技术实现思路

[0004]为了解决上述技术问题，本专利技术设计了一种分离黑乳菇伴生真菌齿梗孢霉菌的优质培养基配方，通过该培养基可以高效分离出纯度较高的齿梗孢霉菌；
[0005]为了达到上述技术目的，本专利技术是通过以下技术方案实现的：一种分离黑乳菇伴生真菌齿梗孢霉菌的优质培养基配方，其特征在于，包括以下原料及重量分数：葡萄糖3
‑
5g、蔗糖3
‑
5g、麦芽糖3
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5g、酵母浸粉3
‑
5g、蛋白胨1
‑
2g、氯化钙0.5
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1g、氯化铁0.5
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1g、磷酸二氯钾0.25
‑
0.5g、磷酸二氢铵0.25
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0.5g、柠檬酸0.1
‑
0.2g、硫酸镁0.15
‑
0.3g、维生素B1 0.01
‑
0.05g、琼脂10
‑
20g、水800
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1000ml；
[0006]优选的，所述分离黑乳菇伴生真菌齿梗孢霉菌的优质培养基配方，包括以下原料及重量分数：葡萄糖5g、蔗糖5g、麦芽糖5g、酵母浸粉5g、蛋白胨2g、氯化钙0.5g、氯化铁0.5g、磷酸二氯钾0.25g、磷酸二氢铵0.25g、柠檬酸0.1g、硫酸镁0.15g、维生素B1 0.01g、琼脂20g、水1000ml；
[0007]黑乳菇伴生真菌齿梗孢霉菌的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0008]S1：选取新鲜、无虫的黑乳菇子实体，切除菇脚部位，用75％酒精轻微擦拭表面；
[0009]S2：用刀片或手从中间将子实体一分为二，用手术刀或镊子选取菌盖与菌柄交界处黄豆大小的组织块；
[0010]S3：将组织块放在本专利技术提供的培养基中，贴上封口膜，将平板倒置于25℃培养箱中培养。
[0011]本专利技术的有益效果：
[0012]本专利技术提供的培养基配发，专门针对于黑乳菇的共生真菌——齿梗孢霉菌进行分离培养，分离成功率高。
附图说明
[0013]图1是实施例1使用本专利技术提供基质配方成功分离出齿梗孢霉菌图片；
[0014]图2是实施例2基质配方分离结果图片；
[0015]图3是实施例3基质配方分离结果图片；
[0016]图4是实施例4基质配方分离结果图片；
[0017]图5是实施例5基质配方分离结果图片；
[0018]图6是基于ITS序列建立的NJ系统发育树。
具体实施方式
[0019]为了对本专利技术的方案及效果做详细描述，通过以下实施例进行详细说明；
[0020]实施例1
[0021]一种分离黑乳菇伴生真菌齿梗孢霉菌的优质培养基配方，其特征在于，包括以下原料及重量分数：葡萄糖5g、蔗糖5g、麦芽糖5g、酵母浸粉5g、蛋白胨2g、氯化钙0.5g、氯化铁0.5g、磷酸二氯钾0.25g、磷酸二氢铵0.25g、柠檬酸0.1g、硫酸镁0.15g、维生素B10.01g、琼脂20g、水1000ml。
[0022]分离结果如图实施例1所示，由图实施例1可知，使用实施例1的培养基配方可以分离出齿梗孢霉菌。对成功分离出的齿梗孢霉菌进行了NDA提取和PCR扩增，获得的DNA序列在NCBI上进行blast比对，选取相似度大于90％、覆盖率大于95％的序列构建矩阵，并构建发育树。如图6基于ITS序列建立的NJ系统发育树所示。
[0023]实施例2
[0024]黑乳菇伴生真菌齿梗孢霉菌的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0025]S1：选取新鲜、无虫的黑乳菇子实体，切除菇脚部位，用75％酒精轻微擦拭表面；
[0026]S2：用刀片或手从中间将子实体一分为二，用手术刀或镊子选取菌盖与菌柄交界处黄豆大小的组织块；
[0027]S3：将组织块放在本专利技术提供的培养基中，贴上封口膜，将平板倒置于25℃培养箱中培养。
[0028]采用与实施例1相同的分离方法，分离结果如图实施例2所示，由图实施例2可知，使用实施例2的培养基配方无法分离出齿梗孢霉菌。
[0029]实施例3
[0030]一种分离黑乳菇伴生真菌齿梗孢霉菌的培养基配方，其特征在于，包括以下原料及重量分数：葡萄糖5g、蔗糖5g、酵母浸粉5g、蛋白胨2g、氯化钙0.5g、氯化铁0.5g、磷酸二氢铵0.25g、柠檬酸0.1g、硫酸镁0.15g、维生素B1 0.01g、琼脂20g、水1000ml。
[0031]采用与实施例1相同的分离方法，分离结果如图实施例3所示，由图实施例3可知，使用实施例3的培养基配方无法分离出齿梗孢霉菌。
[0032]实施例4
[0033]一种分离黑乳菇伴生真菌齿梗孢霉菌的培养基配方，其特征在于，包括以下原料及重量分数：葡萄糖5g、酵母浸粉5g、蛋白胨2g、磷酸二氢铵0.25g、柠檬酸0.1g、硫酸镁0.15g、维生素B1 0.01g、琼脂20g、水1000ml。
[0034]采用与实施例1相同的分离方法，分离结果如图实施例4所示，由图实施例4可知，
使用实施例4的培养基配方无法分离出齿梗孢霉菌。
[0035]实施例5
[0036]一种分离黑乳菇伴生真菌齿梗孢霉菌的培养基配方，其特征在于，包括以下原料及重量分数：葡萄糖5g、酵母浸粉5g、蛋白胨2g、磷酸二氢铵0.25g、柠檬酸0.1g、硫酸镁0.15g、维生素B1 0.01g、肌醇0.04g、琼脂20g、水1000ml。
[0037]采用与实施例1相同的分离方法，分离结果如图实施例5所示，由图实施例5可知，使用实施例5的培养基配方无法分离出齿梗孢霉菌。
[003本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分离黑乳菇伴生真菌齿梗孢霉菌的优质培养基配方，其特征在于，包括以下原料及重量分数：葡萄糖3
‑
5g、蔗糖3
‑
5g、麦芽糖3
‑
5g、酵母浸粉3
‑
5g、蛋白胨1
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2g、氯化钙0.5
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1g、氯化铁0.5
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1g、磷酸二氯钾0.25
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0.5g、磷酸二氢铵0.25
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0.5g、柠檬酸0.1
‑
0.2g、硫酸镁0.15
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0.3g、维生素B1 0.01
‑
0.05g、琼脂10
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20g、水800

【专利技术属性】
技术研发人员：杨彝华，王晶，郑旋，曾维军，邓春英，王万坤，康超，向准，李鹏，杨玲，任昂，刘忠玄，和耀威，
申请(专利权)人：贵州省生物研究所，
类型：发明
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