一种改造的人工核酸酶系统及其应用技术方案

本发明专利技术涉及核酸编辑领域。具体而言，本发明专利技术提供了人工改造的Cas蛋白以及编码蛋白的核酸分子。本发明专利技术还提供了用于核酸编辑的复合物和组合物，例如基因组编辑的组合物，其包含人工改造的Cas蛋白以及编码蛋白的核酸分子。本发明专利技术还提供了用于核酸编辑的方法，例如基因敲除或基因敲入的方法，其使用包含本发明专利技术的人工改造的Cas蛋白或编码蛋白的核酸分子。改造的Cas蛋白或编码蛋白的核酸分子。

【技术实现步骤摘要】
一种改造的人工核酸酶系统及其应用


[0001]本专利技术涉及核酸编辑领域。具体而言，本专利技术涉及人工改造的Cas蛋白以及编码蛋白的核酸分子。本专利技术还涉及用于核酸编辑的复合物和组合物。本专利技术还涉及用于核酸编辑的方法，其使用包含本专利技术的蛋白或编码蛋白的核酸分子。

技术介绍

[0002]CRISPR/Cas技术是一种被广泛使用的基因编辑技术，它通过RNA引导对基因组上的靶序列进行特异性结合并切割DNA产生双链断裂，利用生物非同源末端连接或同源重组进行定点基因编辑。
[0003]目前已知的CRISPR/Cas系统分为两个大类，6个类型。第二大类包括了II型、V型和VI型，其中V型的特征在于仅有一个RuvC核酸酶结构域，两次切割形成双链断裂，切割位点远离PAM。V型Cas核酸酶是一种庞大的类型，可分为多个亚型，分别为Cas12a(又名Cpf1)、Cas12b、Cas12c、Cas12d和Cas12e等。其中CRISPR/Cas12a系统的双链DNA酶活性最高，被广泛开发并应用。与Cas9不同的是，Cas12a同时具有RNA内切酶活性本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种融合蛋白，其特征在于，包括ErCas12a蛋白及融合于其N端的T5外切酶。2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，其中所述T5外切酶和ErCas12a蛋白通过接头连接，所述接头优选为(GGGS)n、(EAAAK)n、SGGS
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XTEN
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SGGSS和Xten
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linker，优选地，所述接头为Xten
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linker。3.根据权利要求1或2所述的融合蛋白，其特征在于，其中所述融合蛋白还包含一个或多个核定位信号序列。4.根据权利要求1至3中任一项所述的融合蛋白，其特征在于，其中所述融合蛋白的序列如SEQ ID NO.1所示，或者与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有一个或者更多个氨基酸的替换、缺失或插入，但是具有相同功能的变体。5.一种核酸分子，其特征在于，其能够编码权利要求1至4中任一项所述的融合蛋白。6.根据权利要求5所述的核酸分子，其特征在于，所述的核酸分子具有以下任一核苷酸序列：(1)SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列；或，(2)SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列经过一个或多个核苷酸的替换、缺失或插入获得的具有相同功能蛋白的编码核苷酸序列；或，(3)在严格条件下可以与SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列进行杂交的核苷酸序列；或，(4)与SEQ ID NO.2所示的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％的序列同一性的序列。7.一种生物材料，其特征在于，包含权利要求1至4中任一项所述的蛋白和/或权利要求5或6所述的核酸分子。8.一种组合物，其特征在于，包...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩冰舟，张亚鸽，周阳，张博，张彪，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：