一种基于AM真菌的脐橙园磷素面源污染消减方法技术

本发明专利技术公开了一种基于AM真菌的脐橙园磷素面源污染消减方法，所述方法包括以下步骤(1)、脐橙园AM真菌调查，决定脐橙园AM真菌调控策略；(2)、利用AM真菌

【技术实现步骤摘要】
一种基于AM真菌的脐橙园磷素面源污染消减方法


[0001]本专利技术涉及环境治理
，具体涉及一种基于AM真菌的脐橙园磷素面源污染消减 方法。

技术介绍

[0002]磷素的污染下限是氮素的十分之一，因此，磷素是水体富营养化的主要限制因子，且磷 素流失相对容易控制。如果能控制住磷素向水体迁移，便能遏制水体富营养化问题。江西省 水果栽植历史悠久，果树栽培在在种植业中仅次于水稻，是我省提升农业经济效益和精准扶 贫的重要方向。我省的水果产业以亚热带水果为主，其中赣南脐橙、南丰蜜桔、奉新猕猴桃、 信丰甜柚等水果品牌闻名全国。但是，南方红壤区旱地土壤普遍缺磷，其中总磷含量严重缺 乏(<0.04g/kg)的面积达到28.5％，有效磷严重缺乏(<5mg/kg)的面积高达77.8％。因此， 果农在建园初期，大量施用磷肥。但由于磷肥的当季利用率仅有10％
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15％，且地表覆盖度不 够，过剩磷肥易随泥沙迁移至水体，造成面源污染。因此，消减果园建园初期磷素流失是控 制南方果园面源污染的重中之重。r/>
技术实现思路
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于AM真菌的脐橙园磷素面源污染消减方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤(1)、脐橙园AM真菌调查，决定脐橙园AM真菌调控策略；(2)、利用AM真菌
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植物联合实现脐橙园台面和梯壁，减少源头磷素流失；(3)、基于AM真菌在草沟磷素流失中的关键作用，优化脐橙园杀菌剂施用方法，强化过程拦截磷素。2.根据权利要求1所述的一种基于AM真菌的脐橙园磷素面源污染消减方法，其特征在于：所述步骤(1)具体包括(1.1)、样品采集：在脐橙园内选择相距200m的三个台面，每个台面选择3棵脐橙树；在距离每棵树50cm处通过五点采样法收集30cm以上表土，混合后作为一个样品；通过冰盒运输至实验室，过2mm筛掉根系和砾石后，置于
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80℃冰箱保存；(1.2)、总DNA的提取与检测：利用试剂盒提取土壤总DNA，进行0.8％琼脂糖凝胶电泳进行分子大小判断，利用紫外分光光度计对DNA进行定量；样品质量是否合格以后续PCR能否扩增出有效目的条带为准；(1.3)、DNA扩增：将PCR反应所需的成分配置完后，在PCR仪上于98℃预变性30s，使模板DNA充分变性，然后进入扩增循环；在每一个循环中，先于98℃保持15s钟使模板变性，然后将温度降到50℃，保持30s，使引物与模板充分退火；在72℃保持30s，使引物在模板上延伸，合成DNA，完成一个循环；重复这样的循环25
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27次，使扩增的DNA片段大量累积；最后，在72℃保持5min，使产物延伸完整，4℃保存；(1.4)、建库；(1.5)、文库质检与测序。3.根据权利要求2所述的一种基于AM真菌的脐橙园磷素面源污染消减方法，其特征在于：所述步骤(1.4)具体包括(1.4.1)、利用试剂盒中的End Repair Mix2将DNA 5
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端突出的碱基切除，3
’
端缺失的碱基补齐，同时在5
’
端加上一个磷酸基团，具体步骤如下：a.取30ng混好的DNA片段补水至60μL，加入40μL End Repair Mix2；b.用枪吹打混匀，并置于PCR仪上30℃孵育30min；c.利用BECKMAN AMPure XP beads纯化末端修复体系，最终用17.5μL Resuspension buffer洗脱；(1.4.2)、3
’
端加A，在这一过程中，DNA的3
’
端会单独加上一个A碱基，具体步骤如下：a.向片段选择后的DNA中加入12.5μ...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘洪光，孔召玉，张利超，
申请(专利权)人：江西省水利科学院，
类型：发明
国别省市：