一种贝第高林的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种贝第高林的制备方法，属于微生物发酵与天然产物纯化领域。本发明专利技术提供了一种贝第高林的制备方法，此方法通过基因敲除，敲除保藏编号为CCTCC NO:M2017842的尾孢菌属JNU001基因组上的聚酮合酶CTB1基因，获得突变菌株尾孢菌属JNU001ΔCTB1，减少尾孢菌的代谢副产物利于贝第高林制备，使用微生物发酵技术制备贝第高林粗品，通过薄层层析法初步纯化，然后使用半制备液相色谱法制备高纯度贝第高林。高林。高林。

【技术实现步骤摘要】
一种贝第高林的制备方法


[0001]本专利技术涉及一种贝第高林的制备方法，属于微生物发酵与天然产物纯化领域。

技术介绍

[0002]贝第高林是一种具有复杂多环结构的天然产物，是从Cercospora beticola中分离得到的一种黄色毒素，这种毒素具有抗菌活性和植物毒性，它可以通过吸收K
+
和排除H
+
使得植物细胞跨膜电位去极化，同时在体外对依赖于质膜K
+
‑
Mg
2+
通道的ATP酶具有特殊性抑制作用，并且也具有抑制癌细胞生长的作用。
[0003]目前，由于野生型尾孢菌大量产生尾孢菌素，从而加大贝第高林的制备难度，为了找到一种简单、易操作的高纯度贝第高林制备方法，从两方面入手，一是通过构建基因突变菌株，进行微生物发酵，二是通过简单，易操作的纯化流程制备高纯度贝第高林。
[0004]由于目前受限于贝第高林的制备，贝第高林的生物活性和药理活性并没有得到开发，因此需要找到一种简单、易操作的高纯度贝第高林的制备方法，能够为贝第高林的应用开发打下基础。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌是以CCTCC NO:M 2017842的尾孢菌属JNU001为宿主细胞，敲除宿主细胞基因组上的聚酮合酶CTB1基因得到的。2.如权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述聚编码酮合酶CTB1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。3.一种贝第高林的制备方法，其特征在于，采用权利要求1或2所述的基因工程菌发酵制备得到的。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，将权利要求1或2所述的基因工程菌接种至发酵培养基中进行液体发酵培养，制备得到发酵液，将所得发酵液进行萃取，制备得到贝第高林。5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述液体发酵培养的培养时间为8～15天，培养温度25～30℃，转速100～150rpm。6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基包括：15～25g/L葡萄糖、1～3g/L大豆蛋白胨、0.5～2g/L乙酸钠、1～10mg/L L
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【专利技术属性】
技术研发人员：袁振波，饶义剑，许会宾，张艳，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：