一种不依赖于抗体类型的抗体检测方法及其应用技术

本发明专利技术属于免疫生物学检测领域，涉及一种不依赖于抗体类型的抗体检测方法及其应用，具体涉及一种免疫血清学病原微生物和自身免疫性疾病总抗体检测及其应用方法。本发明专利技术是利用一种能同时识别抗体κ轻链和λ轻链的检测抗体分析病原微生物和自身免疫性疾病特异性总抗体水平。抗体水平。

【技术实现步骤摘要】
一种不依赖于抗体类型的抗体检测方法及其应用


[0001]本专利技术属于免疫生物学检测领域，涉及一种病原微生物和/或自身免疫性疾病的特异性总抗体检测诊断及其应用。

技术介绍

[0002]抗体是免疫系统产生的抵御病毒、细菌等外来物质的免疫球蛋白。脊椎动物体内的抗体是由重链和轻链组成，抗体重链可分为μ、δ、γ、ε和α五种重链亚型，对应的免疫球蛋白名称分别为：免疫球蛋白M(IgM)，免疫球蛋白D(IgD)，免疫球蛋白G(IgG)，免疫球蛋白A(IgA)，免疫球蛋白E(IgE)。抗体轻链可分为κ链和λ链两种亚型。
[0003]当病原微生物感染人或其它动物后，被感染人或动物体液中会产生针对病原微生物特异性IgM和/或IgG抗体。初次感染后，IgM型抗体10
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14天产生，然后逐渐降低，IgG抗体14
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20天产生，然后逐渐降低。再次感染同一种病原体后，IgM持续时间较短，IgG持续时间较长。
[0004]病原微生物免疫血清型检测包括抗病原微生物抗原的IgG抗体、IgM抗体和总抗体检测等。其中，IgG抗体检本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.样本中病原微生物和/或自身免疫性疾病的特异性总抗体检测方法，包括：用总抗体检测抗体检测样本中的病原微生物和/或自身免疫性疾病的特异性总抗体，所述总抗体包括IgA、IgG、IgM、IgD和/或IgE抗体类型，所述总抗体检测抗体为同时识别抗体κ轻链和λ轻链的检测抗体。2.根据权利要求1所述的方法，包括：使样本与固定在固相载体上的病原微生物和/或自身免疫性疾病抗原接触，并用信号分子标记的总抗体检测抗体检测样本中是否存在针对所述抗原的总抗体或者确定针对所述抗原的总抗体的水平。3.根据权利要求1或2所述的方法，包括：1)使样本与固定在固相载体上的病原微生物和/或自身免疫性疾病抗原接触；2)使步骤1)中与抗原接触后的样本与信号分子标记的总抗体检测抗体接触；3)测定信号分子的信号水平，并根据信号水平确定所述样本中是否存在针对所述抗原的总抗体或者确定针对所述抗原的总抗体的水平。4.根据权利要求3所述的方法，其中：步骤1)包括使样本与固定在固相载体上的病原微生物和/或自身免疫性疾病抗原孵育，洗涤；步骤2)包括将信号分子标记的总抗体检测抗体加入步骤1)处理后的固相载体上，孵育，洗涤。5.根据权利要求1
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4中任一项所述的方法，其中所述样本为血清、血浆或全血。6.根据权利要求1
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5中任一项所述的方法，其中所述样本包含抗病原微生物特异性和/或自身免疫性疾病的特异性抗体IgA、IgG、IgM、IgD和IgE抗体中的任一种抗体或任何抗体的组合。7.根据权利要求1
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6中任一项所述的方法，其中所述样本来源于人或动物。8.根据权利要求1
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7中任一项所述的方法，其中所述总抗体检测抗体是小鼠单克隆抗体、大鼠单克隆抗体、兔单克隆抗体、人源化单克隆抗体、羊驼单克隆抗体、scFv单链抗体、Fab抗原结合片段、F(ab
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)2抗原结合片段、重组抗体和/或基因工程改造的嵌合抗体。9.根据权利要求1
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8中任一项所述的方法，其中所述总抗体检测抗体由一种抗κ轻链抗体和一种抗λ轻链抗体组成，或者由多种抗κ轻链抗体和多种抗λ轻链抗体组成。10.根据权利要求1
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9中任一项所述的方法，其中所述总抗体检测抗体为抗人κ轻链小鼠单克隆抗体和抗人λ轻链小鼠单克隆抗体形成的抗体混合物。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述抗人κ轻链小鼠单克隆抗体和抗人λ轻链小鼠单克隆抗体混合质量比范围是0.1
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10，优选为1：1。12.根据权利要求1
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11中任一项所述的方法，其中所述抗原为病毒抗原。13.根据权利要求12所述的方法，其中所述病毒抗原为SARS
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CoV
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2病毒抗原，所述方法用于确定人血清、血浆或全血中是否存在针对SARS
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CoV
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2病毒抗原的总抗体或者确定针对所述抗原的总抗体水平，针对SARS
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CoV
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2病毒抗原的总抗体包括SARS
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CoV
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2IgG、SARS
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CoV
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2IgM和SARS
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CoV
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2IgA中的两种或三种。14.根据权利要求13所述的方法，其中所述SARS
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CoV
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2病毒抗原为SARS
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CoV
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2病毒的核衣壳蛋白和SARS
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CoV
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2病毒的刺突糖蛋白的融合蛋白，优选为SARS
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CoV
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2病毒的核衣壳蛋白和SARS
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CoV
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2病毒的刺突糖蛋白RBD结构域的融合蛋白。
15.根据权利要求1
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14中任一项所述的方法，其中用总抗体检测抗体通过化学发光分析、免疫层析分析、免疫比浊分析、酶联免疫吸附测定法(ELISA)、免疫印迹分析检测样本中的病原微生物和/或自身免疫性疾病的特异性总抗体。16.总抗体检测抗体在制备用于检测病原微生物和/或自身免疫性疾病的特异性总抗体的试剂中的用途，所述总抗体包括IgA、IgG、IgM、IgD和/或IgE，所述总抗体检测抗体为同时识别抗体κ轻链和λ轻链的检测抗体。17.总抗体检测抗体和病原微生物和/或自身免疫性疾病抗原的组合在制备用于检测病原微生物和/或自身免疫性疾病的特异性总抗体的试剂中的用途，所述总抗体包括IgA、IgG、IgM、IgD和/或IgE，所述总抗体检测抗体为同时识别抗体κ轻链和λ轻链的检测抗体。18.总抗体检测抗体和病原微生物和/或自身免疫性疾病抗原在制备用于检测病原微生物和/或自身免疫性疾病的特异性总抗体的试剂盒中的用途，所述总抗体包括IgA、IgG、IgM、IgD和/或IgE，所述总抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：覃喜建，汤双双，程朝霞，
申请(专利权)人：南京金斯瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：