鉴别不同食粮所产蜂王浆的方法技术

本发明专利技术提供一种鉴别不同食粮所产蜂王浆的方法，将蜂王浆样品用锡杯包裹后，置于元素分析仪

【技术实现步骤摘要】
鉴别不同食粮所产蜂王浆的方法


[0001]本专利技术属于食品检验与分析
，具体地说，涉及一种鉴别不同食粮所产蜂王浆的方法。

技术介绍

[0002]蜂王浆（Royal Jelly）又名蜂皇浆、蜂皇乳等，是由蜜蜂蜂群中的哺育蜂头部上颚腺和咽下腺分泌的一种淡黄色或者乳白色的乳块状物质，是工蜂饲喂蜂王以及蜜蜂幼虫的一种食物，对于蜜蜂的级型分化有着重要的作用。国内外大量的研究表明，蜂王浆中含有丰富的活性物质，是适宜人类的天然保健食品，具有抗菌消炎、抗氧化、调节血压血脂等作用。其中，蜂王浆中的多种生物活性物质与蜜蜂食用的食粮密切相关，因而饲喂不同食粮所产蜂王浆的品质差别较大。与此同时，由于蜂王浆的高价值以及不同食粮所生产的蜂王浆在品质上的差异，导致不法分子为了追求高额利润，在生产蜂王浆时给蜜蜂饲喂相对便宜的糖水和代用花粉，这对蜂王浆市场造成了极大的负面影响，损害了广大消费者的利益，也引起了公众对蜂王浆来源真实性的广泛关注。
[0003]传统检测方法（如花粉鉴别、感官鉴别和理化指标鉴别）能在一定程度上鉴别蜂王浆真实性，但存在一定局限性。目前，仪器分析法是蜂产品真实性识别的核心，新兴技术的应用为蜂产品品质研究提供了便利，核磁共振、气相色谱、液相色谱和稳定同位素质谱等技术在蜂王浆研究中得到应用。其中稳定同位素质谱法被认为能够提供更加准确、可靠的溯源信息而在蜂产品真实性识别研究中得到了广泛应用。迄今为止，尚无鉴别不同食粮所产蜂王浆的有关报道。而蜂王浆富含多种生物活性成分，其品质特性与蜜蜂食用的食粮密切相关，因此，建立简单、快速和准确的方法，从而实现不同食粮所产蜂王浆的区分是十分必要的。近年来，稳定同位素技术由于操作简单、无需样品前处理、环境友好和分析时间短等优点在食品鉴别上发挥了重要的作用，但目前尚未发现该技术鉴别不同食粮饲喂下所产蜂王浆差异的相关研究。此外，由于环境因素如：温度、降水量等变化，使得由单一同位素测得的结果会出现较大的误差，无法确定数据的真实性。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种鉴别不同食粮所产蜂王浆的方法。
[0005]为了实现本专利技术目的，第一方面，本专利技术提供一种鉴别不同食粮所产蜂王浆的方法，将0.1~0.5 mg蜂王浆样品用锡杯（8 mm
×
5 mm）包裹后，置于元素分析仪
‑
稳定同位素比值质谱仪的氧化柱中，测定其δ
13
C、δ
15
N和δ
18
O值，经显著性分析后可根据数值判断蜂王浆的来源：δ
13
C在
‑
27.97
‰
~
‑
27.56
‰
范围内，可以鉴别为采食天然蜜粉源（油菜花粉）所产的蜂王浆；δ
18
O/δ
15
N值在
‑
32.34~
‑
9.64范围内，可以鉴别为饲喂糖水（市售白糖，主要成分为蔗糖；糖水比例为1 g：1.5 mL）所产的蜂王浆；δ
18
O/δ
15
N值在
‑
94.29~
‑
51.37范围内，可以鉴别为饲喂代用花粉（市售代用花粉，主要成分为大豆粉）所产的蜂王浆。
[0006]进一步地，碳和氮稳定同位素测定条件为：
反应管温度：960~1000℃；色谱柱温度：65~70℃；氦气（纯度≥99.999%）载气流速：100~110 mL/min；氧气流速：250~280 mL/min；注氧时间：3~4 s。
[0007]氧稳定同位素测定条件为：反应管温度：1380~1400℃；色谱柱温度：85~90℃；氦气（纯度≥99.999%）载气流速：100~120 mL/min。
[0008]本专利技术中，碳、氮和氧稳定同位素的测定结果按照以下公式计算：δX (
‰
) = (R
样品
‑
R
标准
)/R
标准
×
1000其中，R
样品
和R
标准
分别代表样品和标准品的稳定同位素比值。
[0009]借由上述技术方案，本专利技术至少具有下列优点及有益效果：（一）本专利技术首次利用稳定同位素仪测定不同食粮来源（天然蜜粉源、糖水和代用花粉）所产蜂王浆的碳、氮和氧稳定同位素值，弥补了鉴别采食不同食粮所产蜂王浆差异的技术空白。
[0010]（二）相较其他鉴别蜂王浆的方法，本方法所需样品量和数据处理步骤较少，且无需建立模型便可根据蜂王浆的碳、氮和氧稳定同位素之间的差异性（直接分析数据即可）来确定蜂王浆的食粮来源。
[0011]（三）蜂王浆样品无需任何前处理过程，操作简单且避免了外来溶剂干扰。
[0012]（四）本专利技术提供一种简单、快速的鉴别蜂王浆来源方法，对于快速鉴别不同食粮所产的蜂王浆、促进蜂产品产业化以及养蜂行业健康和可持续发展有重要意义。
附图说明
[0013]图1为本专利技术方法技术路线示意图。
[0014]图2为本专利技术不同食粮所产的蜂王浆碳稳定同位素柱状图。图中小写字母不同表示差异极显著（p＜0.01），小写字母相同表示无显著性差异。
[0015]图3为本专利技术不同食粮所产的蜂王浆氧和氮稳定同位素比值柱状图。图中***表示差异极显著（p＜0.01）。
具体实施方式
[0016]本专利技术提供一种基于同位素比质谱仪对不同食粮（天然蜜粉源、糖水、代用花粉）所产蜂王浆快速鉴别的技术。通过直接用锡杯将蜂王浆样品包裹紧密后，放在具有纯氧脉冲及催化剂存在的在线式全自动燃烧管中燃烧，经化学纯化及分离后，用稳定同位素质谱仪测定其δ
13
C、δ
15
N和δ
18
O值。此外，利用Origin软件绘制柱状图，结果表明不同食粮所产蜂王浆的δ
13
C值和δ
18
O/δ
15
N值能得到很好地区分，证明该方法可用于鉴别蜂王浆的来源。本专利技术提供的鉴别方法所需样品量小，无需建立模型，直接利用蜂王浆的稳定同位素进行分析，减少数据处理量，具有操作简单、分析快速的优点。
[0017]本专利技术采用如下技术方案：将蜂王浆样品直接应用于稳定同位素仪器中并获得碳、氮和氧稳定同位素，通过分析数据之间的差异来鉴别不同食粮（天然蜜粉源、糖水和代用花粉）所产蜂王浆。技术路线图见图1。
[0018]1. 蜂王浆样品的采集
从湖北省钟祥市的蜂场采集不同食粮（天然蜜粉源、糖水和代用花粉）所产蜂王浆。为确保采样的准确性，实验期间对不同处理的蜂箱分开放置，且进行编号标记。采集蜂种为意大利浆蜂，蜂王均是同源繁殖而来，蜂群群势良好无病虫害。蜂王浆储存在500 mL的塑料瓶中。所有样品在分析前均保存在
‑
18℃冰箱中。
[0019]2. 稳定同位素标准物质C、N同位素测定：USGS40（δ
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.鉴别不同食粮所产蜂王浆的方法，其特征在于，将0.1~0.5mg蜂王浆样品用锡杯包裹后，置于元素分析仪
‑
稳定同位素比值质谱仪的氧化柱中，测定其δ
13
C、δ
15
N和δ
18
O值，经显著性分析后可根据数值判断蜂王浆的来源：δ
13
C在
‑
27.97
‰
~
‑
27.56
‰
范围内，可以鉴别为采食天然蜜粉源所产的蜂王浆；δ
18
O/δ
15
N值在
‑
32.34~
‑
9.64范围内，可以鉴别为饲喂糖水所产的蜂王浆；δ
18
O/δ
15
N值在
‑
94.29~
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈兰珍，刘肇龙，尹欣，黎洪霞，
申请(专利权)人：中国农业科学院蜜蜂研究所，
类型：发明
国别省市：