一种微环境T细胞功能调控的纳米递送系统及其制备方法和应用技术方案

本发明专利技术公开了一种微环境T细胞功能调控的纳米递送系统及其制备方法和应用，所述递送系统为核

【技术实现步骤摘要】
一种微环境T细胞功能调控的纳米递送系统及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及化学、生物医学工程领域，具体涉及一种微环境T细胞功能调控的纳米递送系统及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]先兆流产是妊娠期常见的疾病，指产妇妊娠28周前阴道出现不规则流血，但尚无异常妊娠物质排出，妇产科检查宫颈尚未开放，胎膜也并未发现有破裂现象。如果该情况得不到有效控制，将会最终导致胎儿流产，甚至影响母体健康。既往统计该病占妊娠人数的15％。但是随着二三胎政策的出台，高龄孕妇比例的增高，先兆性流产发病率和发病严重程度呈明显的逐年上升趋势，严重威胁孕妇和胎儿健康，甚至影响我国人口出生率【中国妇幼保健,2019,34(16):3748
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3751.】。发生先兆流产者，如果能获得改善胎盘功能的有效治疗避免最终流产，胎儿仍有较大存活概率。然而现在缺乏确切有效的治疗手段，多数患者仅能通过休息和改善营养等手段，期待自愈的发生以挽救胎儿。为了实现对先兆流产的治疗，需要明确其发病机制。目前发现的先兆流产的病因十分复杂，包括内分泌失调、染色体异常、母体全身感染、不良环境、子宫缺陷、创伤、情感伤害等等。但是，既往对这些病因如何影响胎盘功能、如何最终引发胎盘损害的具体机制不能明确，所以，并未开发出确切有效的治疗手段【中国医药导报,2019,16(05):30
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33.】。
[0003]众所周知，妊娠过程中，除了既往关注的生长发育因素之外，还伴随与同种异体间移植类似的，复杂的母体/胎儿免疫调控和免疫耐受机制。成功的妊娠中，在蜕膜和胎盘滋养组织构成的母
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胎界面，必须维持母体的免疫耐受，直至胎儿娩出【Front Immunol.2019 Oct 18；10:2317.】所以，近年来生殖免疫学研究手段逐渐受到重视，领域内专家开始研究流产或先兆流产胎盘、蜕膜、胎儿组织中的免疫学变化。研究发现，前述诸多病因引起的先兆流产或最终流产，绝大多数伴有胎盘的免疫耐受受损、免疫攻击激活【Aust J Gen Pract.2020 Jun；49(6):324
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330.】。但是，现在没有确切的手段对这些新发现的重要的免疫病理学损伤和变化进行纠正。
[0004]调控体内(包括胎盘内母
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胎界面)免疫耐受/免疫攻击的最重要细胞群体，是T淋巴细胞中的辅助性T细胞(helper T lymphocyte，Th)【Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol.2017 Jul；42:11
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25.】。辅助性T细胞占外周血T细胞的65％，它们的功能是广泛辅助包括细胞毒性T细胞、B细胞、巨噬细胞、DC细胞等免疫细胞的应答，其最特定的细胞表面特定标志物为CD4(cluster of differentiation 4)，另外还有CD3、TCR、CD28、CD2、CTLA
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2、CD45、CD40L、LFA
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1等。Th细胞主要包含Th1细胞和Th2细胞两种亚型【Ann Allergy Asthma Immunol.2000 Jul；85(1):9
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18；】。
[0005]其中，Th1细胞参与细胞免疫和迟发型超敏性炎症反应，是促炎症亚群，分泌IL
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2，IFN
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γ，TNF
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α等细胞因子，在胎盘中可促进炎症，抵御细菌感染。T
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bet(T
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Box Transcription Factor 21)是促进其分化的主要转录因子【Cell.2000 Mar 17；100(6):
655
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69.】。当Th1在胎盘中过度激活，超出正常生理水平时，对妊娠极为不利，会造成流产等病理妊娠。Th的另一种主要与体液免疫有关的亚型为Th2细胞，主要起抑制炎症作用，具有免疫抑制特性。此类细胞可以通过表达IL
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4、IL
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5、IL
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6、IL
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10等细胞因子起效。IL
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4和IL
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2是促使其激活的主要细胞因子【Annu Rev Immunol.2006；24:607
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56.】。其在胎盘中发挥其抗炎症作用，诱导和维持对胎儿的免疫耐受。研究证实，在先兆流产的患者胎盘内和血液中存在明显的Th2细胞比例降低和功能抑制、Th1细胞比例上调和功能激活现象【Int Arch Allergy Immunol.2004 Jun；134(2):93
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119.】。
[0006]所以，流产(尤其是早期的先兆流产)的发生与免疫失衡引起的促炎细胞激活、促炎因子大量释放，进而引发的抑制炎症的Th1细胞激活、Th2抑炎因子释放不足有关。而这些因子的正常分泌释放有赖于Th1细胞和Th2细胞通过相互作用，调节母
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胎界面免疫耐受的平衡，进而维持妊娠的正常进行。一旦它们之间的平衡被打破，则导致胎盘和胎儿的免疫损伤，最终产生流产等不良妊娠结局【Am J Reprod Immunol.1997 Jun；37(6):427
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34.】。
[0007]研究表明，在正常妊娠孕妇体内Th1/Th2平衡会转向Th2优势。而包括先兆流产在内的生殖失败胎盘中的Th细胞，则以Th1优势为主。在此类情况下，Th2细胞及其相关细胞因子对妊娠结局有利，而Th1细胞及其相关细胞因子则不利于妊娠【APMIS.2011 Sep；119(9):597
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604.】。先兆流产患者的CD4+Th细胞中，Th2和Th1细胞关键调控因子IL
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4和T
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bet分别表达下调和上调，导致Th2的细胞比例明显降低，Th1细胞比例明显升高，Th2/Th1比例明显下调【PLoS One.2014 Dec 19；9(12):e115554.】。
[0008]在既往其他免疫相关疾病的体内和体外实验研究中，开发了很多可以调控辅助性T细胞(Th)功能的小分子或基因治疗药物。如前所述，Th1细胞的激活依赖T
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bet相关通路的激活。如果可以抑制转录因子T
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bet的表达，可导致Th1细胞比例的下降【J Immunol.2017 May 15；198(10):3939
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3948.】。我们可以使用siRNA技术，进行对CD4+Th细胞转录因子T
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bet表达的确切抑制，期望在胎盘免疫中实现对Th1的抑制。亮菌甲素(Armillarisin A)是一种免疫功能调控药物，具有在特定器官抗炎的功效，更为突出的是，它可以确切激活IL
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4通路、上调IL
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4的生物活性【Cell Biochem Biophys.2015 May；72(1):103
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种微环境T细胞功能调控的纳米递送系统，其特征在于，所述纳米递送系统为核
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壳双层结构，以在接触胎盘组织间液高表达的酶的作用下靶向崩解的酶底物多肽
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PEG修饰的脂质双分子膜作为外壳，以胎盘内辅助性T细胞表面特异性高表达的标志物抗体修饰的药物载体作为内核，所述药物载体中负载超顺磁性四氧化三铁SPIO纳米粒子、调控胎盘内辅助性T细胞功能的小分子药物、治疗基因或其组合；所述胎盘组织间液高表达的酶为基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶9、溶菌酶、激肽酶、组胺酶、催产素酶或蛋白激酶C中的一种或几种；所述药物载体为聚乙二醇修饰的聚阳离子载体与疏水性可降解聚酯形成的共聚物；所述胎盘内辅助性T细胞表面特异性高表达的标志物抗体为CD4抗体的Fab段。2.根据权利要求1所述的微环境T细胞功能调控的纳米递送系统，其特征在于，所述胎盘组织间液高表达的酶为基质金属蛋白酶3。3.根据权利要求1所述的微环境T细胞功能调控的纳米递送系统，其特征在于，所述共聚物为聚乙二醇
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聚乙烯亚胺
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聚己内酯PEG
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PEI
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PCL、聚乙二醇
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聚乙烯亚胺
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聚乳酸PEG
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PEI
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PLA或聚乙二醇
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聚乙烯亚胺
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聚乳酸
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羟基乙酸PEG
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PEI
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PLGA中的一种或几种，优选聚乙二醇
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聚乙烯亚胺
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聚己内酯PEG
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P...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭宇，
申请(专利权)人：中山大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：