急性心肌梗死三项标志物的检测试剂及制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种急性心肌梗死三项标志物的检测试剂及制备方法和应用，所述检测试剂包括cTnI检测试剂、CK

【技术实现步骤摘要】
急性心肌梗死三项标志物的检测试剂及制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及心梗三项标志物检测领域，特别涉及一种急性心肌梗死三项标志物的检测试剂及制备方法和应用。

技术介绍

[0002]急性心肌梗死(简称，心梗)是临床上一种常见的急危重症。随着社会老龄化，现代生活节奏的加快，饮食习惯的改变，心梗的发病率也呈现逐年升高的趋势，每年新发心梗患者至少50万，现患至少200万人。心梗的发病直接原因是由于冠状动脉的突然堵塞导致心肌缺血性坏死。对于心肌梗死的治疗方法，无论是溶栓治疗或是手术治疗，都对时间的依赖性非常大。梗死相关的血管开通越早，治疗效果越好，病死率越低。对于心梗患者而言，时间就是生命，因此对于心梗疾病的快速准确诊断对患者的生命健康具有重大意义。
[0003]临床上对于心梗的诊断方法主要包括：临床症状识别，心电图，血清标志物检查。由于近年来年轻的心梗患者不断增多，约1/4的心梗患者都没有典型的心梗临床表现症状，心电图异常的相关特征也不具有特异性，除心内科常见的心肌炎、心包炎、心肌病等外，也常见于急腹症、脑血管意外、高钾血症等，利用临床症本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种急性心肌梗死三项标志物的检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括cTnI检测试剂、CK
‑
MB检测试剂和Myo检测试剂；所述的cTnI检测试剂采用由偶联纳米金颗粒的cTnI核酸适配体和偶联量子点1的互补ssDNA1链复合形成的生物探针；所述的CK
‑
MB检测试剂采用由偶联纳米金颗粒的CK
‑
MB核酸适配体和偶联量子点2的互补ssDNA2链复合形成的生物探针；所述的Myo检测试剂采用由偶联纳米金颗粒和量子点3的Myo核酸适配体形成的生物探针。2.根据权利要求1所述的一种急性心肌梗死三项标志物的检测试剂，其特征在于，所述的cTnI核酸适配体修饰巯基，DNA序列为:5
′‑
SH
‑
C6
‑
CGT GCA GTA CGC CAA CCT TTC TCA TGC GCT GCC CCT CTT A
‑3′
；所述的互补ssDNA1链修饰氨基，DNA序列为:5
′‑
NH2‑
C6
‑
TAA GAG GGG CA
‑3′
。3.根据权利要求1所述的一种急性心肌梗死三项标志物的检测试剂，其特征在于，所述的CK
‑
MB核酸适配体修饰巯基，DNA序列为:5
′‑
SH
‑
C6
‑
CAT TGA GAG GGG GTG GCC GTA GTC AGG TGG GTG GGG GTT TGA G
‑3′
；所述的互补ssDNA2链修饰氨基，DNA序列为:5
′‑
NH2‑
C6
‑
CTC AAA CCC CCA C
‑3′
。4.根据权利要求1所述的一种急性心肌梗死三项标志物的检测试剂，其特征在于，所述的Myo核酸适配体修饰巯基，DNA序列为:5
′‑
SH
‑
C6
‑
CCC TCC TTT CCT TCG ACG TAG ATC TGC TGC GTT GTT CCG A
‑
NH2‑3′
。5.根据权利要求1所述的一种急性心肌梗死三项标志物的检测试剂，其特征在于，所述的量子点1为由柠檬酸和尿素制备的石墨烯量子点，激发峰在350nm，发射峰在450nm；所述的量子点2为柠檬酸一水合物和二乙烯三胺制备的石墨烯量子点，激发峰在450nm，发射峰在525nm；所述的量子点3为2,5
‑
二氨基苯磺酸和4
‑
氨基苯基硼酸盐酸盐制备的石墨烯量子点，激发峰在550nm，发射峰在605nm。6.一种权利要求1所述的急性心肌梗死三项标志物的检测试剂的制备方法，其特征在于，将cTnI检测试剂、CK
‑
MB检测试剂和Myo检测试剂1:1:1的体积比混合，即得到急性心肌梗死三项标志物的检测试剂。7.根据权利要求6所述的一种急性心肌梗死三项标志物的检测试剂的制备方法，其特征在于，所述的偶联纳米金颗粒的cTnI核酸适配体和偶联量子点1的互补ssDNA1链复合形成的生物探针的制备方法，包括以下步骤：(1)将cTnI核酸适配体溶液与TCEP溶液混合并在室温下孵育1小时以还原二硫键；其中，cTnI核酸适配体溶液的浓度为100μM，TCEP溶液的浓度为20mM，且cTnI核酸适配体溶液和TCEP溶液的体积比为1:1；(2)将纳米金溶液与吐温
‑
20溶液和甲氧基聚乙二醇硫醇溶液混合得到纳米金混合溶液；其中，纳米金溶液的浓度为2.5nM，吐温
‑
20溶液的浓度为1wt％，甲氧基聚乙二醇硫醇溶液的浓度为80μM，且纳米金溶液、吐温
‑
20溶液和甲氧基聚乙二醇硫醇溶液之间的体积比为80:1:1；(3)将步骤(2)得到的纳米金混合溶液与步骤(1)得到的溶液混合，使得纳米金与cTnI核酸适配体的摩尔比为1:1
‑
1:500，并加入4M氯化钠溶液至氯化钠的浓度为800mM，室温下
静置2h后使得cTnI核酸适配体与纳米金颗粒偶联；(4)将步骤(3)得到的混合溶液离心除去上层透明溶液，并将底部沉淀分散于PBST缓冲液中，重复清洗若干次，得到偶联纳米金的cTnI核酸适配体溶液；(5)将羧基化量子点1用EDC和NHS激活后形成溶液，将过量溶液与互补ssDNA1链溶液混合并孵育过夜；其中，互补ssDNA1链溶液的浓度为100μM；(6)将步骤(4)及(5)得到的溶液混合并搅拌，使得cTnI核酸适配体与互补ssDNA1链摩尔浓度比为1:1，静置1h；(7)将步骤(6)得到的溶液用PBST缓冲液离心清洗三次以上...

【专利技术属性】
技术研发人员：韦学勇，陈轩，刘湘连，蒋庄德，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：