一种厌氧反硝化菌种及其在河道水体修复中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种厌氧反硝化菌种及其在河道水体修复中的应用，涉及环境微生物技术领域。所述的厌氧反硝化菌种为大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 20211700，保藏日期为2021年12月30日。本发明专利技术的大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8在厌氧条件下具有很强的反硝化能力，能有效降低河道水体中的总氮含量，可应用于河道修复，强化脱氮效果，在河道生物修复过程中具有较高的应用价值。物修复过程中具有较高的应用价值。物修复过程中具有较高的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种厌氧反硝化菌种及其在河道水体修复中的应用


[0001]本专利技术属于环境微生物
，特别是涉及一种厌氧反硝化菌种及其在河道水体修复中的应用。

技术介绍

[0002]随着城市化进程的加快，大量生活及工业废水未经适当处理排入河道中，对河道及周边土壤造成急性或慢性负影响。污水的不达标排放导致河水的各项污染指标（COD、N、P等）超标，造成河道水体变黑变臭，河水富营养化，严重影响生态环境和人类健康。
[0003]氮是水体污染过程中一类非常重要的污染物，是引起水体富营养化的重要因素之一。水体中的氮主要以有机氮、氨氮(NH
4+
‑
N)、硝酸盐氮(NO3‑
‑
N)及亚硝酸盐氮(NO2‑
‑
N)的形式存在，其中，亚硝酸盐氮是细菌硝化过程及反硝化过程中的重要中间产物，易形成积累，具有强氧化性，对水生生物如鱼类、软体动物及甲壳动物等均有毒性。目前水体脱氮方法中，生物法效率高，成本低，无二次污染，是一种公认的较为经济有效的脱氮方法。传统的生化脱氮要经过好氧硝化和厌氧反硝化两个过程，首先通过好氧硝化菌的作用把氨氮转变为硝氮，继而在厌氧环境下通过反硝化菌的作用把硝氮转变为氮气从而达到氮素的去除。从20世纪80年代Robertson等首次发现好氧反硝化细菌，打破了传统反硝化的概念，自此越来越多具有好氧反硝化能力的菌株被筛选出来，常见的包括假单胞菌属、芽孢杆菌属、不动杆菌属等。但是由于河道水体随着深度增加，溶氧会越来越低，接近河道底部氧气匮乏，表层以下的水体呈缺氧甚至厌氧状态，因此在微生物修复实施过程中，最重要的一环是需要拥有在厌氧条件下高效降解能力的菌种，在水体中也起到强化处理效果的作用。因此，筛选分离出高效的厌氧反硝化菌种，利用高效反硝化菌强化河道黑臭水体的生物脱氮效果，有效提高脱氮效率也是亟须解决的问题之一。

技术实现思路

[0004]鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种厌氧反硝化菌种及其在河道水体中的应用，用于解决现有技术中的问题。
[0005]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术第一方面提供一株厌氧反硝化菌种，经鉴定为大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans，保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，菌种名称为Bacillus glycinifermentans YY8，保藏日期为2021年12月30日，保藏地址为中国.武汉.武汉大学，保藏编号为CCTCC NO: M 20211700。
[0006]所述大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8，含有如SEQ ID NO.1所示的基因序列。
[0007]所述大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8，其为革兰氏阳性菌，菌落呈乳白色，黏液状，半透明，隆起，培养两天后，其菌落直径为3~4 mm。
[0008]所述大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8，属于厌氧菌，在溶解氧（DO）为0~0.5 mg/L的河道水体中生长良好。
[0009]所述大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8，在反硝化培养基中，对NO3‑
‑
N和TN的去除率分别达到92.69%和90.76%。
[0010]所述反硝化培养基的配方为：KNO
3 1 g/L、丁二酸钠10 g/L、MgSO4·
7H2O 0.1 g/L、FeSO4·
7H2O 0.05 g/L、KH2PO
4 1 g/L、K2HPO
4 1 g/L、半胱氨酸0.25 g/L。
[0011]所述大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8，最高盐耐受浓度为80 g/L氯化钠。
[0012]本专利技术第二方面提供一种液体菌剂，所述液体菌剂包含大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8，且大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8的浓度至少为1
×
10
8 cfu/mL。
[0013]本专利技术第三方面提供液体菌剂的制备方法，包括如下步骤：将大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8的纯菌种接种于液体厌氧培养基中多级扩大培养，培养结束后即得到液体菌剂。
[0014]所述液体厌氧培养基的配方为：葡萄糖5 g/L，胰蛋白胨3 g/L，牛肉粉2 g/L，(NH4)2SO
4 3 g/L，NaCl 4 g/L，K2HPO
4 0.75 g/L，KH2PO
4 0.75 g/L，FeSO4·
7H2O 0.05 g/L，MgSO4·
7H2O 0.3 g/L，半胱氨酸0.25 g/L。
[0015]本专利技术第四方面提供大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8在河道水体中脱氮的应用。
[0016]本专利技术第五方面提供一种河道水体脱氮方法，至少包括如下步骤：（1）将大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8制备的液体菌剂接种至河道水体；（2）在适宜的温度、pH值、DO值条件下进行河道水体的脱氮处理。
[0017]所述接种的接种量为河道水体体积的0.1~5%，优选为1~3%；所述温度为5~50 ℃，优选为20~40 ℃；所述pH值为5~9，优选为6~8；所述DO为0~0.5 mg/L，优选为0~0.2 mg/L。
[0018]如上所述，本专利技术的厌氧反硝化菌种及其在河道水体脱氮中的应用，具有以下有益效果：（1）本专利技术的大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8属于厌氧菌，能够在厌氧条件下高效降低河道水体中的总氮含量，从而改善河道水质；（2）本专利技术处理效率高、经济效益好、操作方便、无污染。
附图说明
[0019]图1为分离纯化菌株对NO3
‑‑
N和TN的去除效果。
[0020]图2为菌株YY8的系统进化树图谱。
[0021]图3为菌株YY8在厌氧培养基固体平板上的生长菌落形态。
[0022]图4为菌株YY8对黑臭河道水体中NO3
‑‑
N和TN的去除效果。
具体实施方式
[0023]实施例1：厌氧反硝化菌的分离筛选及性能测定
所用到的培养基及成分如下：厌氧液体培养基：葡萄糖5 g/L，胰蛋白胨3 g/L，牛肉粉2 g/L，(NH4)2SO
4 3 g/L，NaCl 4 g/L，K2HPO
4 0.75 g/L，KH2PO
4 0.75 g/L，FeSO4·
7H2O 0.05 g/L，MgSO4·
7H2O 0.3 g/L，半胱氨酸0.25 g/L，自然本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8，已保藏于中国典型培养物保藏中心，菌株保藏编号为CCTCC NO：M 20211700，保藏日期为2021年12月30日。2.根据权利要求1所述的大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8，其特征在于，所述的大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8含有如SEQ ID NO.1所示的基因序列。3.根据权利要求1所述的大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8，其特征在于，所述的大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8在反硝化培养基中，对NO3‑
‑
N和TN的去除率分别达到92.69%和90.76%。4.一种菌剂，其特征在于，包含如权利要求1所述的大豆发酵芽孢杆菌Bacillus glycinifermentans YY8。5.根据权利要求4所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂为液体菌剂，所述的液体菌剂中大豆发酵芽孢杆菌Bac...

【专利技术属性】
技术研发人员：邱建贺，翁雯，周国彪，梁锡伟，
申请(专利权)人：佛山市玉凰生态环境科技有限公司，
类型：发明
国别省市：