一种鞭毛素突变体及其在制备非洲猪瘟抗原融合蛋白中的应用制造技术

技术编号:32975729 阅读:27 留言:0更新日期:2022-04-09 11:52
本发明专利技术属于生物技术领域,公开了一种鞭毛素突变体及其在制备非洲猪瘟抗原融合蛋白中的应用。所述的鞭毛素突变体的氨基酸序列为SEQ ID NO.4所示。本发明专利技术提供的鞭毛素截短突变体Fm能够高效上清表达,每升摇瓶培养及纯化后的蛋白产率可以达到40mg,易于放大及规模化生产,可以提高鞭毛素蛋白的广泛应用。将其与非洲猪瘟抗原蛋白融合后,在保持鞭毛素佐剂活性的同时,提高重组抗原的可溶性及表达水平,大大降低了表达及纯化工艺成本。大大降低了表达及纯化工艺成本。

【技术实现步骤摘要】
一种鞭毛素突变体及其在制备非洲猪瘟抗原融合蛋白中的应用


[0001]本专利技术属于生物
,具体涉及一种鞭毛素突变体及其在制备非洲猪瘟抗原融合蛋白中的应用。

技术介绍

[0002]通过鞭毛素蛋白与目的蛋白混合或融合后免疫,可以提高机体对抗原的免疫应答,其中鞭毛素融合或偶联抗原免疫效果更为显著【1】【2】,以鞭毛素为佐剂的核酸疫苗仅在实验室阶段研究,虽然不用经过蛋白纯化工艺,但是核酸疫苗本身面临着不可预知的安全风险和临床监管;目前很多致病菌的鞭毛素可能具有潜在的危险性和毒性,免疫动物后产生大量针对自身的抗体,导致可能的耐受性及炎症反应,这主要源于鞭毛素可变区的高免疫原性。沙门氏同种属的鞭毛素蛋白的氨基及羧基末端比较保守,从结构上可以分为保守的D0,D1,可变区D2和D3区;其中鞭毛素蛋白抗原性很强的区域位于D2和D3区,根据文献报道,外源抗原通常可以与鞭毛素羧基端连接或插入高可变区(I型鞭毛素174

400位或201

368位),均保留了鞭毛素TLR5信号通路活性【3、4】。保守D0结构域由N端和C端两本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种人工合成的鞭毛素突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO.4所示。2.权利要求1所述的鞭毛素突变体在制备非洲猪瘟抗原融合蛋白中的应用。3.根据权利要求2所述的应用,所述融合蛋白的促融标签为TrxA、Sumo或Msyb。4.根据权利要求2所述的应用,是将鞭毛素突变体与非洲...

【专利技术属性】
技术研发人员:金梅林邹忠左文峰康超杨于尚霄敏黎晶晶杨丽孙小美何兴林
申请(专利权)人:华中农业大学
类型:发明
国别省市:

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