一种增强细菌中外源蛋白活性和表达的前导稳定元件制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，公开了一种增强细菌中外源蛋白活性和表达的前导稳定元件。为沙门氏菌肠亚种肠衣原体鼠伤寒菌株RM13672SspH1蛋白N端的208个氨基酸残基片段，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO：1所示，氨基酸序列如SEQ.ID.NO：2所示。本发明专利技术得到的增强细菌中外源蛋白活性和表达的前导稳定元件，可以在工业界或科研中把它用作一个提升蛋白产量和蛋白活力的工具，有助于科学研究和生物医药工业生产以及抗传染病疫苗制备。此外，谷胱甘肽S转移酶(GST)是一个含有211个氨基酸的蛋白，是最常用的蛋白表达的稳定多肽，但对不同目标蛋白效果差异大。本发明专利技术鉴定出的SspH1前导稳定元件可以提供一个新的选择，以获得理想的活性蛋白的表达。白的表达。白的表达。

【技术实现步骤摘要】
一种增强细菌中外源蛋白活性和表达的前导稳定元件


[0001]本专利技术属于生物
，具体为一种增强细菌中外源蛋白活性和表达的前导稳定元件。

技术介绍

[0002]在科学研究和生物医药工业生产和抗传染病疫苗制备中，常常需要在原核细菌中(包括但不限于大肠杆菌，沙门氏菌，志贺氏菌，结核分枝杆菌等)表达或者纯化有生物活性的蛋白。
[0003]但目前在细菌中表达外源蛋白经常遇到下列问题：
[0004](1)无产量或低产量。目标蛋白无法通过敏感技术(例如Western印迹)检测到或被检测到。含量很低(每升培养物低于微克)时，问题通常在于异源蛋白发挥有害作用或者蛋白本身不稳定。
[0005](2)蛋白质失活。获得大量的可溶性蛋白质并不是最终目标。这种蛋白质可能仍然质量不佳，即，它没有应有的活力。
[0006]因此如何增强细菌中蛋白的活性和表达一直是一个需要解决的重要问题。

技术实现思路

[0007]针对上述问题本专利技术提供了一种增强细菌中外源蛋白活性和表达的前导稳定元件。
[0008]为了达到上述本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种增强细菌中外源蛋白活性和表达的前导稳定元件，其特征在于：所述前导稳定元件为沙门氏菌肠亚种肠衣原体鼠伤寒菌株RM13672 SspH1蛋白N端的208个氨基酸残基片段，包含可变N端区域，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO：1所示。2.一种增强细菌中外源蛋白活性和表达的前导稳定元件，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，PCR克隆沙门氏菌肠亚种肠衣原体鼠伤寒菌株RM13672 SspH1基因的最小启动子和SspH1蛋白N端208个氨基酸残基的编码序列；步骤2，将步骤1克隆得到的SspH1的最小启动子和其N端208个氨基酸残基的编码序列通过XhoI/NotI限制酶酶切连接到酶切位点修饰过的pGL3
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Basic质粒的荧光素酶编码区上游，得到重组质粒；步骤3，将得到的重组质粒转染到大肠杆菌E.coli...

【专利技术属性】
技术研发人员：邢力，潘元晴，吴长新，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：