实现转基因玉米2A-7转化事件特异定性PCR检测的扩增引物及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种实现转基因玉米2A

【技术实现步骤摘要】
实现转基因玉米2A
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7转化事件特异定性PCR检测的扩增引物及检测方法


[0001]本专利技术涉及PCR检测
，具体涉及的是一种实现转基因玉米2A
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7转化事件特异定性PCR检测的扩增引物及检测方法。

技术介绍

[0002]据国际农业生物技术应用服务组织(ISAAA)报道，2019年全球29个国家总共种植了1.904亿公顷的转基因作物，对全球粮食安全、可持续性、减缓气候变化做出了重大贡献。全球前五的转基因作物种植国家分别是美国、巴西、阿根廷、加拿大和印度，主要种植的转基因作物为大豆、玉米、棉花和油菜。
[0003]当前，随着转基因作物种植面积的持续增长和全球公众对于转基因植物及其产品安全性的关注度不断提升，包括我国在内的全球50多个国家和地区颁布实施了转基因生物标识管理制度，针对转基因作物转化体建立特异、灵敏、标准化的检测方法是保证标识管理制度顺利实施的重要技术支撑。
[0004]转基因玉米2A
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7是中国农业大学自主研发的转基因玉米新品种，该品种通过农杆菌侵染的方法把本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.实现转基因玉米2A
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7转化事件特异定性PCR检测的扩增引物，其特征在于，包括两条转基因玉米2A
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7转化体的特异性序列扩增引物：2A
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7F：CGTGGACGGCCTTCATAG2A
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7R：TGATTAGAGTCCCGCAATTATAC；其中，扩增引物的位置为转基因玉米2A
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7转化体的RB端侧翼，目的片段长度为166bp。2.一种转基因玉米2A
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7转化事件的特异定性PCR检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备DNA模板；(2)按照下表配置PCR反应体系：试剂终浓度体积ddH2O—10
×
PCR缓冲液1
×
2.5μL25mmol/L氯化镁溶液1.5mmol/L1.5μLdNTPs混合溶液(各2.5mmol/L)0.2mmol/L2.0μL10μmol/L 2A
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7F0.4μmol/L1.0μL10μmol/L 2A
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7R0.4μmol/L1.0μLTaq DNA聚合酶0.025U/μL—25mg/L DNA模板2.0mg/L2.0μL总体积25.0μL表中，“—”表示体积不确定，如果PCR缓冲液中含有氯化镁，则不加氯化镁溶液，根据Taq酶的浓度确定其体积，并相应调整ddH2O的体积，使反应体系总体积达到25...

【专利技术属性】
技术研发人员：常丽娟，刘文娟，赵海铭，宋君，王东，代晓航，魏超，熊梅，
申请(专利权)人：四川省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，
类型：发明
国别省市：