一种耐热甘露糖苷酶基因及其表达蛋白和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种耐热甘露糖苷酶基因及其表达蛋白和应用，通过蛋白质工程的相关技术手段，对酶进行定向改造以获得更符合要求的甘露糖苷酶。该甘露糖苷酶具有较好耐高温性能和偏酸性pH条件下高活性的特性。在75℃、pH为6.0的条件下酶活性最高，比酶活达到8.2μmol/mg min；该甘露糖苷酶在温度为70

【技术实现步骤摘要】
一种耐热甘露糖苷酶基因及其表达蛋白和应用


[0001]本专利技术属于生物工程
，涉及一种甘露糖苷酶，特别涉及一种耐热甘露糖 苷酶基因及其表达蛋白和应用。

技术介绍

[0002]低聚甘露糖是由D
‑
甘露糖通过β
‑
1,4糖苷键链接，聚合度在2
‑
10之间的寡糖，其 作为一种益身元，能调节人肠道双歧杆菌与乳酸菌，保持肠道微生态平衡。现有的低聚甘露 糖生产，主要依靠使用多种酶制剂联合水解底物如魔芋粉、酵母、椰子粕等农副产品制备， 但是存在许多问题：1.魔芋粉原料昂贵，实际应用受限大。2.酵母细胞壁中甘露糖含量低。 3.椰子粕农副产品结构坚硬，酶解效率低下，需要将原材料预处理，造成一定的成本问题 和环保问题。
[0003]转糖苷作用是指将在酶的作用下，将糖基转给其他物质。最广泛的例子是利用β
‑
半 乳糖苷酶的转糖苷性质，通过半乳糖反向水解生成低聚半乳糖。但是，类似的方法由于甘露 糖苷酶很少表现出转糖苷的特性，使其在低聚甘露糖生产上鲜见。所以需要发掘、构建耐热 的重组α本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种耐热甘露糖苷酶基因，其特征在于，所述基因的DNA序列如SEQ NO:1所示。2.一种如权利要求1所述的耐热甘露糖苷酶基因表达的耐热甘露糖苷酶。3.根据权利要求2所述的耐热甘露糖苷酶，其特征在于，所述耐热甘露糖苷酶为如下（1）或（2）的蛋白：（1）具有如SEQ NO:2所示氨基酸序列的蛋白；（2）如SEQ NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失及添加形成的具有甘露糖苷酶活性的衍生蛋白质。4.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体由权利要求1所述的基因在空载体上克隆而成。5.根据权利要求4所述的一种重组载体，其特征在于：所述空载体为pET
‑
28a。6.一种重组...

【专利技术属性】
技术研发人员：时号，言行，聂新玲，李青飞，高凤，王士岩，李相前，
申请(专利权)人：淮阴工学院，
类型：发明
国别省市：