谷氨酰胺合酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及重组微生物技术领域，具体涉及谷氨酰胺合酶突变体及其应用。本发明专利技术通过易错PCR方法强化异源谷氨酰胺合酶，促进谷氨酰胺或者谷氨酰胺衍生物的生产。具体地，通过对不同来源的谷氨酰胺合酶编码基因进行密码子优化，然后通过易错PCR的方法构建突变体文库，获得谷氨酰胺合酶突变体。发酵实验证实，含有本发明专利技术提供的谷氨酰胺合酶突变体的菌株更利于谷氨酰胺的生产；谷氨酰胺产量可达到32.7

【技术实现步骤摘要】
谷氨酰胺合酶突变体及其应用


[0001]本专利技术涉及重组微生物
，具体涉及谷氨酰胺合酶突变体及其应用。

技术介绍

[0002]谷氨酰胺是一种非必需氨基酸。化学名称为2
‑
氨基
‑4‑
氨甲酰基丁酸。谷氨酰胺是蛋白质合成中的编码氨基酸，可促进蛋白质的合成，抑制蛋白质的分解，可用于治疗胃及十二指肠溃疡，在医药行业中有重要作用。
[0003]目前，谷氨酰胺最常用的生产方法为发酵法，主要以谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)为生产菌发酵生产谷氨酰胺。谷氨酸棒状杆菌是异养需氧型，为革兰氏阳性菌，具有生长速度快、非致病、对自身代谢物弱降解能力的特性。发酵法具有原料来源广泛、生产成本低、产品质量可控、产物单一等优点。谷氨酸棒杆菌自身的谷氨酰胺合酶会发生腺苷酰化现象，导致酶活急剧降低，造成底物谷氨酸不能充分利用。因此寻找高活性的谷氨酰胺酶，促进谷氨酸转化为谷氨酰胺具有重要意义。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是通过易错PCR方法强化异源谷氨酰胺合酶，促本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.谷氨酰胺合酶突变体，其特征在于，所述谷氨酰胺合酶突变体含有点突变F106L和Y305F。2.根据权利要求1所述的谷氨酰胺合酶突变体，其特征在于，所述谷氨酰胺合酶突变体含有点突变F211L、Q257T和F379S。3.根据权利要求1所述的谷氨酰胺合酶突变体，其特征在于，所述谷氨酰胺合酶突变体含有点突变L299P和E378G。4.根据权利要求1
‑
3任一项所述的谷氨酰胺合酶突变体，其特征在于，所述谷氨酰胺合酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.2、SEQ ID No.4或SEQ ID No.6所示。5.权利要求1
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4任一项所述的谷氨酰胺合酶突变体的编码基因，其特征在于，所述编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1、SEQ ID No.3或SEQ ID No.5所示。...

【专利技术属性】
技术研发人员：栾明月，吴涛，姚嘉琪，赵津津，李岩，
申请(专利权)人：廊坊梅花生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：