一种新型蛋白质生物素连接酶及基于其的邻近标记系统PhastID技术方案

本发明专利技术公开了一种新型蛋白质生物素连接酶及基于其的邻近标记系统PhastID。具体公开了蛋白质生物素连接酶BPL及改造后的突变蛋白质生物素连接酶BPL*及基于上述生物素连接酶BPL或BPL*的邻近蛋白标记系统PhastID。所述包含蛋白质生物素连接酶BPL*的标记系统，相比与传统的BioID邻近标记系统，其标记强度更高，所需标记时间更短，具有较大的应用前景。具有较大的应用前景。具有较大的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种新型蛋白质生物素连接酶及基于其的邻近标记系统PhastID


[0001]本专利技术涉及基因工程
，具体地，涉及新型蛋白质生物素连接酶BPL及经过突变的蛋白质生物素连接酶融合蛋白BPL*及基于上述蛋白质生物素连接酶BPL或BPL*的邻近标记系统PhastID。

技术介绍

[0002]蛋白质生物素连接酶可以通过活化生物素(Biotin)形成生物素酰
‑5’‑
腺苷酸Biotinyl
‑5’‑
AMP，将生物素标记到其底物上。而经过人工改造，该连接酶可失去对底物的特异性标记，释放的Biotinyl
‑5’‑
AMP化学性质极不稳定，可随机与邻近的赖氨酸残基发生反应，使其共价标记生物素，该范围约为10nm以内。结合生物素与链霉亲和素之间的高亲和力和稳定性，可对蛋白进行示踪、纯化等操作。由于其标记半径约为10nm，该距离恰好是蛋白质
‑
蛋白质相互作用(Protein
‑
Protein Interaction,PPI)的前提，因此在蛋白质组学中具有广泛的应用前景。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蛋白质生物素连接酶BPL，其特征在于，(a)其氨基酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所述；或(b)与SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所述氨基酸序列具有70％以上同源性且具有生物素蛋白连接酶活性的蛋白。2.一种突变蛋白质生物素连接酶BPL*，其特征在于，为SEQ ID NO.1所述氨基酸序列R48G或R48S突变；或SEQ ID NO.2所述氨基酸序列R48G或R48S突变；或SEQ ID NO.3所述氨基酸序列R40G突变。3.一种编码权利要求2所述突变蛋白质生物素连接酶BPL*的核苷酸序列。4.一种包含权利要求3所述突变蛋白质生物素连接酶BPL*编码核苷酸序列的重组表达载体。5.一种包含权利要求4所述重组表达载体的...

【专利技术属性】
技术研发人员：松阳洲，冯然，刘峰，吴苏，李克成，李影影，周志芬，李若菲，刘熠，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：