白灵片中芍药苷含量的HPLC检测方法技术

本发明专利技术公开了一种白灵片中芍药苷含量的HPLC检测方法，包括，制备对照品溶液和供试品溶液，分别将对照品溶液与供试品溶液注入液相色谱仪测定获得色谱图，采用外标法计算供试品中芍药苷含量；其中采用液相色谱仪测定获得色谱图的色谱条件包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈

【技术实现步骤摘要】
白灵片中芍药苷含量的HPLC检测方法


[0001]本专利技术涉及白灵片中有效成分含量的检测方法，尤其涉及白灵片中芍药苷含量的HPLC检测方法，属于白灵片中有效成分含量的检测领域。

技术介绍

[0002]白灵片为当归、三七、红花、牡丹皮、桃仁、防风、苍术、白芷、马齿苋、赤芍、黄芪11种药材组成，具有活血化瘀，增加光敏作用，用于白癜风。本品收载于《部颁标准》第五册，标准中只有常规检查和一般的薄层鉴别，未建立含量测定标准。
[0003]芍药苷是白灵片中的主要有效成分之一，对其含量提供一种结果准确、专属性高、重现性良好的检测方法，有利于白灵片的质量控制并提高该品种有效监控指标。

技术实现思路

[0004]本专利技术的主要目的是提供一种白灵片中芍药苷含量的HPLC检测方法；
[0005]本专利技术的上述目的是通过以下技术方案来实现的：
[0006]一种白灵片中芍药苷含量的HPLC检测方法，包括，制备对照品溶液和供试品溶液，分别将对照品溶液与供试品溶液注入液相色谱仪测定获得色谱图，采用外标法计算供试品中芍药苷含量；其中，采用液相色谱仪测定获得色谱图的色谱条件包括：
[0007]以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈
‑
水为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于300；
[0008]其中，采用外标法计算供试品中芍药苷含量的方法包括：以对照品溶液中芍药苷浓度与峰面积为对照，按照公式C
x
＝C
R
×/>A
x
/A
R
，计算供试品中芍药苷的含量；式中C
R
为对照品溶液浓度，A
R
为对照品芍药苷的色谱峰面积，A
x
为供试品中芍药苷的色谱峰面积。
[0009]作为本专利技术一种优选的具体实施方案，所述的采用液相色谱仪测定获得色谱图的色谱条件还包括：进样量为5ul，柱温为30℃。
[0010]作为本专利技术一种优选的具体实施方案，所述的对照品溶液的制备方法包括：将芍药苷对照品中加入甲醇，即得对照品溶液；优选的，将芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含40μg芍药苷对照品的溶液，即得对照品溶液。
[0011]作为本专利技术一种优选的具体实施方案，所述的供试品溶液的制备方法包括：白灵片除去包衣，研细，加入70％乙醇超声处理，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取过滤液，即得供试品溶液；优选的，取白灵片10片，除去包衣，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率150W，频率50kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取过滤液，即得供试品溶液；优选的，所述超声处理的参数是150W/50HZ。
[0012]作为本专利技术一种优选的具体实施方案，所述的检测方法还包括分别制备缺赤芍阴性对照溶液、缺牡丹皮阴性对照溶液以及同时缺赤芍和牡丹皮双阴性对照溶液；
[0013]其中，所述缺赤芍阴性对照溶液的制备方法包括，按照处方组成及生产工艺制得
缺赤芍的阴性样品，按权利要求5或6所述的供试品溶液制备法制得缺赤芍阴性对照溶液；
[0014]所述缺牡丹皮阴性对照溶液的制备方法包括，按照处方组成及生产工艺制得缺牡丹皮的阴性样品，按权利要求5或6所述的供试品溶液制备法制得缺牡丹皮阴性对照溶液；
[0015]所述同时缺赤芍和牡丹皮阴性对照溶液的制备方法包括，按照处方组成及生产工艺制得同时缺赤芍和牡丹皮的阴性样品，按权利要求5或6所述的供试品溶液制备法制得同时缺赤芍和牡丹皮阴性对照溶液。
[0016]作为本专利技术一种优选的具体实施方案，所述的流动相中乙腈与水的质量比可以为(15
‑
17)：(83
‑
85)；优选的，乙腈与水的质量比为15：85或17：83。
[0017]作为本专利技术一种优选的具体实施方案，色谱条件中的色谱柱可以是Ecosil(5μm，4.6
×
150mm)，Kromasil(5μm，4.6
×
150mm)或者Agilent(5μm，4.6
×
150mm)。
[0018]本专利技术对所建立的白灵片中芍药苷含量的HPLC检测方法进行方法学验证，结果表明本专利技术检测方法操作简便，结果准确，专属性高，重现性良好；在9.89～98.91μg/ml范围内，具有良好的线性关系，平均回收率(n＝6)102.50％，RSD＝1.66％，该方法准确、可靠，可用于白灵片的质量控制。
附图说明
[0019]图1为白灵片HPLC色谱图，A
‑
芍药苷对照品溶液、B
‑
供试品溶液、C
‑
缺牡丹皮、赤芍阴性对照溶液、D
‑
缺赤芍阴性对照溶液、E
‑
缺牡丹皮阴性对照溶液。
[0020]图2为芍药苷线性关系图。
具体实施方式
[0021]以下结合具体实施例来进一步描述本专利技术，本专利技术的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本专利技术的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本专利技术的精神和范围内可以对本专利技术的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本专利技术的保护范围内。
[0022]仪器与试验试剂
[0023]1、仪器：Agilent 260型高效液相色谱仪(8.6.1.013)，超声处理器(150W/50HZ),XS105DU电子天平(8.6.3.031)，锥形瓶。
[0024]2、试剂：甲醇(色谱纯，分析纯)，芍药苷对照品(中国食品药品检验所110736
‑
201438，110736
‑
201539，含量：96.4％)。
[0025]试验例1白灵片中芍药苷含量的HPLC检测方法的建立以及方法验证1.HPLC检测方法的建立
[0026]1.1色谱条件
[0027]色谱柱：Kromasil(150mm
×
4.6mm)；流动相：乙腈
‑
水(15:85)；检测波长：230nm；流速：1.0mL
·
min
‑1；柱温30℃；进样量：5μL。
[0028]1.2对照品溶液的制备
[0029]取芍药苷对照品5mg，置50ml容量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每1ml含100μg的溶液。
[0030]1.3供试品溶液的制备
[0031]取本品10片，除去包衣，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇50ml。密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，在称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0032]1.4阴性对照溶液的制备
[0033]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种白灵片中芍药苷含量的HPLC检测方法，包括，制备对照品溶液和供试品溶液，分别将对照品溶液与供试品溶液注入液相色谱仪测定获得色谱图，采用外标法计算供试品芍药苷含量；其特征在于，采用液相色谱仪测定获得色谱图的色谱条件包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈
‑
水为流动相；检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算不低于300。2.根据权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于，所述采用外标法计算供试品芍药苷含量的方法包括：以对照品溶液中芍药苷浓度与峰面积为对照，按照公式C
x
＝C
R
×
A
x
/A
R
，计算供试品中芍药苷的含量；式中C
R
为对照品溶液浓度，A
R
为对照品芍药苷的色谱峰面积，A
x
为供试品中芍药苷的色谱峰面积。3.根据权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于，所述的采用液相色谱仪测定获得色谱图的色谱条件还包括：进样量为5ul，柱温为30℃。4.根据权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于，所述的对照品溶液的制备方法包括：将芍药苷对照品中加入甲醇，即得对照品溶液；优选的，所述的对照品溶液的制备方法包括：将芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含40μg芍药苷对照品的溶液。5.根据权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于，所述的供试品溶液的制备方法包括：白灵片除去包衣，研细，加入70％乙醇超声处理，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗吉，霍嘉茵，林淑明，林佩贤，
申请(专利权)人：国药集团冯了性佛山药业有限公司，
类型：发明
国别省市：