一种同时包埋有竹红菌素和顺铂的载药纳米粒子的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种同时包埋有竹红菌素和顺铂的载药纳米粒子的制备方法，包括：竹红菌素和顺铂一起包埋到纳米脂质体中获得载药脂质体，在其表面包覆或修饰细胞膜，获得表面包覆或修饰有细胞膜的纳米复合粒子，竹红菌素和顺铂的混合物与纳米脂质体的质量比为1:1

【技术实现步骤摘要】
一种同时包埋有竹红菌素和顺铂的载药纳米粒子的制备方法


[0001]本专利技术涉及一种载药纳米粒子的制备方法，尤其涉及用脂质体和细胞膜同时包埋竹红菌素和顺铂形成载药纳米粒子的方法，属于材料和生物医学领域。

技术介绍

[0002]药物发挥药效的前提是药物能在水相中有很高的溶解度，在注入体内后还要尽量避免在发挥药效之前被免疫系统清除。竹红菌素是从天然竹红菌中提取分离的苝醌类色素，是一种性能优异的光敏剂，可用于抗菌、消炎、抗病毒等，暗毒性低。竹红菌素能很好地溶于三氯甲烷、吡啶、丙酮、二甲基亚砜，可溶于乙醇和甲醇，然而竹红菌素难溶于水，限制了其临床应用。因此，提高竹红菌素在水相中的溶解或分散能力很有必要。研究者对竹红菌素分子进行改造制备竹红菌素衍生物，如在吡啶溶液中，将竹红菌素与乙醇胺在50℃条件下反应5h,得到七元环胺基取代的竹红菌素衍生物[夏万林,张曼华,蒋丽金.竹红菌素与乙醇胺的作用.有机化学,1992,12(6):618
‑
623]；竹红菌甲素与含NaOH的亚硫酸钠水溶液反应生成14
‑
脱羟基
‑
15
‑
脱乙酰基
‑
13
‑
磺酸钠竹红菌素[Hu Y Z,An J Y,Jiang L J.Studies of sulfonation of hypocrellin A and the photodynamic actions of the product.J Photochem Photobiol B:Biol,1993,17(2):195
‑
201.]。这些竹红菌素的衍生物在水相中溶解度与单纯竹红菌素相比有显著提高，但对药物分子通过化学反应进行改造可能影响药物进入细胞行为和药物疗效，这些方法对其水溶性的改善有限。此外，单一药物对细胞的杀伤能力有限，将两种药物或多种药物进行联合，往往在抑制细胞生长方面发挥协同效应。即使满足上述条件(水溶性好、联合治疗)，药物在注入体内后由于难以逃避免疫系统清除，使得部分药物因难以抵达病灶部位而不能在病灶部位发挥作用。

技术实现思路

[0003]鉴于此，本专利技术的主要目的是提供一种同时包埋有竹红菌素和顺铂的载药纳米粒子的制备方法，将竹红菌素和顺铂一起包埋于脂质体中，在脂质体表面包覆或修饰细胞膜，得到的载药纳米粒子不仅提高药物在水相中的分散能力，同时提高其生物利用度。
[0004]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0005]本专利技术提供一种同时包埋有竹红菌素和顺铂的载药纳米粒子的制备方法，包括以下步骤：
[0006](1)将竹红菌素和顺铂一起包埋到纳米脂质体中，获得载药脂质体；
[0007](2)在所述载药脂质体表面包覆或修饰细胞膜，获得表面包覆或修饰有细胞膜的纳米复合粒子，即得；
[0008]其中，所述竹红菌素和顺铂的混合物与纳米脂质体的质量比为1:1
–
20；
[0009]所述载药脂质体与所述细胞膜满足：当所述载药脂质体中含0.5mg所述竹红菌素和顺铂的混合物时，包覆在所述纳米脂质体上的细胞膜来源于0.5
×
106–
0.5
×
107个细胞提取得到，如果载药脂质体中所含药物大于0.5mg，则包覆在所述纳米脂质体上的细胞膜的量
按上述比例增加；如果载药脂质体中所含药物小于0.5mg，则包覆在所述纳米脂质体上的细胞膜的量按上述比例减少。
[0010]优选地，所述竹红菌素为竹红菌甲素。
[0011]优选地，所述竹红菌素和所述顺铂的质量比为1:1。
[0012]优选地，所述细胞膜选自红细胞膜、巨噬细胞膜、肿瘤细胞膜、干细胞膜、内皮细胞膜、血小板膜中的一种或几种组合。
[0013]优选地，所述纳米脂质体为由磷脂或其和胆固醇形成的双分子层囊泡，具有或不具有pH敏感性。
[0014]更优选地，所述磷脂为天然磷脂或人工合成的磷脂。
[0015]优选地，步骤(1)中，所述包埋的方法采用薄膜分散法，步骤为：将所述竹红菌素与所述纳米脂质体溶于有机溶剂中，然后挥干有机溶剂，使所述竹红菌素与所述纳米脂质体形成薄膜，再向所述薄膜中加入顺铂水溶液，搅拌分散或超声波分散得到。
[0016]更优选地，步骤(1)中，所述顺铂水溶液是由磷酸盐缓冲液或生理盐水溶解顺铂得到。
[0017]优选地，步骤(2)中，所述载药脂质体表面包覆或修饰细胞膜的方法为：所述载药脂质体的水相分散液与所述细胞膜的水相分散液混合，依次通过微孔孔径为800nm、650nm、400nm的微孔滤膜挤压；或者所述载药脂质体的水相分散液与所述细胞膜的水相分散液混合，通过搅拌、离心、收集沉淀。
[0018]与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：本专利技术将竹红菌素和顺铂一起包埋于脂质体中，再在脂质体表面包覆或修饰细胞膜，脂溶性的竹红菌素分子镶嵌于脂质体的磷脂双分子层中，顺铂主要分布于脂质体的内水相，不改变竹红菌素的分子结构和亲脂性，但是可以提高其在水相中的分散能力；顺铂能显著增强载药纳米粒子杀伤细胞的能力，表面包覆或修饰细胞膜能减少载药纳米粒子在体内被免疫系统清除的机会，增强其与肿瘤细胞的结合能力。
附图说明
[0019]通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本专利技术的其它特征、目的和优点将会变得更显著：
[0020]图1是同时包埋竹红菌甲素和顺铂的pH敏感纳米脂质体(磷脂成分为DSPE和DOPE，药脂比为1:1)，左、右为同一样品不同视野中样品粒子照片，箭头指向的是样品粒子。
[0021]图2是巨噬细胞Raw264.7中提取分离的细胞膜。
[0022]图3是巨噬细胞膜和pH敏感脂质体包覆的载药(竹红菌甲素+顺铂)纳米粒子(即(HA,DDP)/Lip/MM)(脂质体中的磷脂成分为DSPE和DOPE，药脂比为1:1)，用微孔孔径为800nm的微孔滤膜反复挤压5次的样品，4张照片为同一样品在不同视野中的粒子形貌。
[0023]图4是巨噬细胞膜和pH敏感脂质体包覆的载药(竹红菌甲素+顺铂)纳米粒子(即(HA,DDP)/Lip/MM)(脂质体中的磷脂成分为DSPE和DOPE，药脂比为1:1)，依次用800nm、650nm、400nm的微孔滤膜挤压获得的(HA,DDP)/Lip/MM，4张照片为同一样品在不同视野中的粒子形貌。
[0024]图5是同时包埋竹红菌甲素和顺铂的纳米脂质体(磷脂成分为大豆卵磷脂，药脂比
1mg和大豆磷脂40mg，将HA、DDP和大豆磷脂一起溶于0.5mL三氯甲烷中，后续操作以实施例1中制备脂质体的相同，所得载药纳米脂质体(HA,DDP)/Lip于4℃冰箱保存，所得样品为明显的囊泡结构，粒径在200
–
900nm之间，如图5所示。
[0034]然后按实施例1提取巨噬细胞膜MM，将获得的MM与载药脂质体(HA,DDP)/Lip进行混合，MM的量与(HA,DDP本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时包埋有竹红菌素和顺铂的载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)竹红菌素和顺铂一起包埋到纳米脂质体中，获得载药脂质体；(2)在所述载药脂质体表面包覆或修饰细胞膜，获得表面包覆或修饰有细胞膜的纳米复合粒子，即得；其中，所述竹红菌素和顺铂的混合物与纳米脂质体的质量比为1:1
–
20；所述载药脂质体与所述细胞膜满足：当所述载药脂质体中含0.5mg所述竹红菌素和顺铂的混合物时，包覆在所述纳米脂质体上的细胞膜来源于0.5
×
106–
0.5
×
107个细胞提取得到。2.根据权利要求1所述同时包埋有竹红菌素和顺铂的载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述竹红菌素为竹红菌甲素。3.根据权利要求1或2所述同时包埋有竹红菌素和顺铂的载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述竹红菌素和所述顺铂的质量比为1:1。4.根据权利要求1所述同时包埋有竹红菌素和顺铂的载药纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述细胞膜选自红细胞膜、巨噬细胞膜、肿瘤细胞膜、干细胞膜、内皮细胞膜、血小板膜中的一种或几种组合。5.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：储茂泉，桂馨，
申请(专利权)人：同济大学，
类型：发明
国别省市：