一种超嗜热II型普鲁兰酶及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种超嗜热II型普鲁兰酶及应用，属于基因工程技术领域。本发明专利技术通过对超嗜热II型普鲁兰酶进行氨基酸突变，获得了超嗜热II型普鲁兰酶突变体Q13H、I25E和Q13H/I25E。本发明专利技术获得的突变体催化性能有了很大的提高，且突变体在反应过程中不需要其他金属离子辅助(例如Ca

【技术实现步骤摘要】
一种超嗜热II型普鲁兰酶及应用


[0001]本专利技术涉及一种超嗜热II型普鲁兰酶及应用，属于基因工程


技术介绍

[0002]普鲁兰酶(EC 3.2.1.41)是糖苷水解酶家族中最重要的成员之一，通常由多个结构域组成，并且根据水解方式及产物的不同而被分为I型和II型。I型普鲁兰酶只作用于
ɑ
‑
1，6糖苷键，可以将淀粉，普鲁兰糖，
ɑ
‑
极限糊精等水解为麦芽三糖，线性寡糖。而II型普鲁兰酶是一种双功能酶，可以作用于
ɑ
‑
1，6和
ɑ
‑
1,4糖苷键，其水解产物是麦芽三糖和葡萄糖。普鲁兰酶在制糖工业(葡萄糖浆和果糖糖浆)、发酵工业(啤酒和有机酸)、饲料、抗性淀粉的制备等具有很好的应用。
[0003]在制糖工业中，通常分为两个步骤，首先是淀粉的液化，此步骤是在
ɑ
‑
淀粉酶的作用下，条件为95℃，pH 6.0，将淀粉水解为
ɑ
‑
环糊精；第二个是糖化，此步骤是普鲁兰酶和糖化酶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种超嗜热II型普鲁兰酶突变体，其特征在于，所述突变体是在SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的基础上，进行了如下至少一种突变：(1)将第13位谷氨酰胺突变为组氨酸；(2)将第25位异亮氨酸突变为谷氨酸。2.编码权利要求1所述超嗜热II型普鲁兰酶突变体的基因。3.携带权利要求2所述基因的质粒。4.表达权利要求1所述超嗜热II型普鲁兰酶突变体的重组微生物细胞。5.一种重组大肠杆菌，其特征在于，以pET系列质粒为表达载体，表达权利要求1所述的超嗜热II型普鲁兰酶突变体。6.根据权利要求5所述的重组大肠杆菌，其特征在于，以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主。7.一种生产权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：周哲敏，周丽，谢婷，韩来闯，崔文璟，刘中美，程中一，郭军玲，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：