假单胞菌zjut126在降解N-月桂酰谷氨酸中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种假单胞菌zjut126在降解N

【技术实现步骤摘要】
假单胞菌zjut126在降解N
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月桂酰谷氨酸中的应用
(一)

[0001]本专利技术涉及一种表面活性剂的降解，特别涉及利用假单胞菌(Pseudomonas sp.)zjut126降解N
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月桂酰谷氨酸的方法，该方法具有较好的降解能力。
(二)
技术介绍

[0002]微生物是维持生态境中生态网络结构稳定的重要组成部分，是推动重要生源元素(例如：碳、氮、硫、磷等)循环和生态系统能量流动的重要驱动者。因此，寻找能降解有机物的微生物有助于推动微生物在生源元素的生物地球化学循环过程中的作用。
[0003]大量前人研究表明，微生物的功能也直接或间接地响应气候及上述环境变化，例如改变有机质分解和温室气体(如CO2、CH4等)释放的速率或改变营养物质的生物可利用性及转化过程等。因此，研究微生物多样性及功能对环境条件(如盐度、有机碳组成等)变化的响应，有助于我们理解微生物驱动环境中生源元素的地球化学循环过程，进而为评估全球环境变化对生物圈带来的影响提供理论依据。
[0004]N
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酰基氨基酸表面活性剂大量使用在化妆品、洗护用品上，人类大量使用这些用品使其在环境中沉积，使土壤、水体富营养化造成环境的破坏，因此，寻找到能降解N
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酰基氨基酸表面活性剂的菌株，可以评估N
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酰基氨基酸表面活性剂在环境中存在的时间和浓度，从而准确评估它们对环境的影响以及它们在整个地球碳氮循环中的作用。另外，获得高效降解N
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酰基氨基酸表面活性剂的菌株，可以应用于相应的废水处理过程，如工厂的废水生物处理池及城市污水处理厂等。
(三)
技术实现思路

[0005]本专利技术目的是提供一种假单胞菌(Pseudomonas sp.)zjut126在高效降解N
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月桂酰谷氨酸表面活性剂中的应用，它能够高效水解N
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月桂酰谷氨酸生成谷氨酸和月桂酸，当生产该表面活性剂的工厂产能很高时，废水处理车间的BOD往往不能达标，添加该菌可以有效地水解N
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月桂酰谷氨酸，其水解产物月桂酸和谷氨酸可作碳源和氮源促进菌体生长，使BOD迅速达标。
[0006]本专利技术采用的技术方案是：
[0007]本专利技术提供一种假单胞菌zjut126在降解N
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月桂酰谷氨酸中的应用，所述假单胞菌(Pesudomonas sp.)zjut126，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2017年10月30日，保藏编号CCTCC NO：M2017635，保藏地址：中国，武汉，武汉大学，邮编430072，已在专利申请CN109321487A中公开。
[0008]本专利技术所述假单胞菌zjut126降解N
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月桂酰谷氨酸的应用为：以假单胞菌zjut126经发酵培养获得的湿菌体为催化剂，以N
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月桂酰谷氨酸为底物，以pH7～9(优选pH8.0)的50mM Tris
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HCl缓冲液为反应介质构成反应体系，在35～40℃、150～200r/min(优选37℃、180rpm)条件下进行反应，实现对该表面活性剂的降解。
[0009]进一步，所述反应体系中，催化剂用量以湿菌体重量计为3
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15g/L，优选10g/L；所
述底物加入量为3
‑
15g/L，优选10g/L。
[0010]进一步，本专利技术所述湿菌体的制备方法为：
[0011](1)斜面培养
[0012]将假单胞菌zjut126接种至斜面培养基，30℃培养2天，获得斜面菌体；所述斜面培养基组成为：K2HPO4·
3H2O 2.1g/L，KH2PO
4 0.4g/L，NaCl 0.1g/L，MgSO4·
7H2O 0.2g/L，CaCl
2 0.025g/L，NH4NO
3 0.5g/L、N
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月桂酰谷氨酸1.0g/L，琼脂20g/L，溶剂为水，pH值自然；
[0013](2)种子培养
[0014]将步骤(1)制备的斜面菌体接种至种子培养基，30℃培养24h，获得种子液；所述种子培养基组成为：NaCl 0.5g/L，KH2PO
4 0.4g/L，K2HPO
4 1.6g/L，NH4Cl 1.0g/L，MgSO4·
7H2O 0.2g/L，CaCl
2 0.03g/L，N
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月桂酰谷氨酸1.0g/L，微量元素液10mL/L，用NaOH调节pH值为8.0，溶剂为去离子水；微量元素液组成：CoCl
2 0.1g/L，MnSO
4 0.5g/L，FeSO4·
7H2O 0.1g/L，CuSO
4 0.1g/L，ZnSO4·
7H2O 0.1g/L，H3BO
3 0.01g/L，Al(SO4)2·
12H2O 0.01g/L，Na2MoO4·
2H2O0.01g/L，EDTA
·
2Na 1g/L，溶剂为去离子水；
[0015](3)发酵培养
[0016]将步骤(2)制备的种子液以体积浓度10％的接种量接种于发酵培养基，30℃、180rpm培养48h，离心，倒掉上清液，将湿菌体用50mM Tris
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Hcl缓冲液(pH 8.0)洗涤1
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3次，获得湿菌体；所述发酵培养基组成为：NaCl 0.5g/L，MgSO4·
7H2O0.2g/L，K2HPO
4 1.6g/L，KH2PO
4 0.4g/L，NH4Cl 5.0g/L，微量元素液10mL/L，N
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月桂酰谷氨酸5.0g/L，溶剂为去离子水，用NaOH调节pH值为8；微量元素液组成：CoCl
2 0.1g/L，MnSO
4 0.5g/L，FeSO4·
7H2O 0.1g/L，CuSO
4 0.1g/L，ZnSO4·
7H2O 0.1g/L，H3BO
3 0.01g/L，Al(SO4)2·
12H2O 0.01g/L，Na2MoO4·
2H2O 0.01g/L，EDTA
·
2Na 1g/L，溶剂为去离子水。
[0017]与现有技术相比，本专利技术的有益效果主要体现在：
[0018]本专利技术首次报道了假单胞菌zjut126能高效水解N
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月桂酰谷氨酸生成谷氨酸和月桂酸，水解速度快。底物N
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月桂酰谷氨酸浓度10g/L时，在初始1h内转化率是83％，平均水解速率为8.3g/L/h。
(四)附图说明
[0019]图1为假单胞菌zjut126催化水解N
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月桂酰谷氨酸的HPLC图；A为0小时，B为1小时。
[0020]图2为温度对假单胞菌zjut126催化水解N
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种假单胞菌zjut126在降解N
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月桂酰谷氨酸中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述应用为：以假单胞菌zjut126经发酵培养获得的湿菌体为催化剂，以N
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月桂酰谷氨酸为底物，以pH7.0
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9.0的50mM Tris
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HCl缓冲液为反应介质构成反应体系，在35～40℃、150～200r/min条件下进行反应，实现对N
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月桂酰谷氨酸的降解。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述反应体系中，催化剂用量以湿菌体重量计为3
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15g/L，所述底物加入量为3
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15g/L。4.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述湿菌体的制备方法为：(1)斜面培养将假单胞菌zjut126接种至斜面培养基，30℃培养2天，获得斜面菌体；所述斜面培养基组成为：K2HPO4·
3H2O 2.1g/L，KH2PO
4 0.4g/L，NaCl 0.1g/L，MgSO4·
7H2O 0.2g/L，CaCl
2 0.025g/L，NH4NO
3 0.5g/L、N
‑
月桂酰谷氨酸1.0g/L，琼脂20g/L，溶剂为水，pH值自然；(2)种子培养将步骤(1)制备的斜面菌体接种至种子培养基，30℃培养24h，获得种子液；所述种子培养基组成为：NaCl 0.5g/L，KH2PO
4 0.4g/L，K2HPO
4 1.6g/L，NH4Cl 1.0g/L，MgSO4·
7H2O 0.2g/L，CaCl
2 0.03g/L，N
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月桂酰谷氨酸1.0g/L，微量元...

【专利技术属性】
技术研发人员：张朝晖，覃海瞧，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：