一种同时降解呕吐毒素和玉米赤霉烯酮的贝莱斯芽孢杆菌及应用制造技术

一种贝莱斯芽孢杆菌Vel

【技术实现步骤摘要】
一种同时降解呕吐毒素和玉米赤霉烯酮的贝莱斯芽孢杆菌及应用


[0001]本专利技术涉及微生物学和植物病害生防
，尤其涉及一种同时降解呕吐毒素和玉米赤霉烯酮的贝莱斯芽孢杆菌及应用。

技术介绍

[0002]呕吐毒素又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒素(DON)，是一种B型单端孢霉烯族毒素，主要由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)和黄色镰刀菌(Fusarium culmorum)等产生的次级代谢物，广泛存在于污染的谷物、饲料及食品中。由于呕吐毒素具有较高的细胞毒性和免疫抑制性质，进入人和动物体内影响消化系统造成呕吐等症状，降低机体免疫力，对人和动物的健康造成严重危害。
[0003]目前国内外主要采用物理法、化学法和生物法进行呕吐毒素去除。物理和化学法存在脱毒效果不理想和引入其他有害物质等缺点。与传统的物理、化学法相比，生物法能将呕吐毒素转化为无毒或低毒物质，且不会造成农产品营养损失，因此是一种绿色安全的去毒方法，被认为去除呕吐毒素的最佳方法。
[0004]玉米赤霉烯酮(ZEN)是由玉米赤霉菌、禾谷镰刀菌等真菌产生的具有雌激素毒性作用的一种甾体霉菌毒素，广泛存在于谷物当中，对人和动物构成巨大威胁，人或动物食用被玉米赤霉烯酮污染的食物后会出现细胞毒性、生殖毒性、免疫毒性和生殖毒性，对人和动物造成巨大威胁。
[0005]玉米赤霉烯酮同样可以用物理、化学和生物的方法脱毒，由于物理和化学方法在生活中难以使用，生物降解对生态环境、产品质量的影响最小，且减少或消除食品和饲料中玉米赤霉烯酮温和而有效，故使用生物降解逐渐成为主流。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种同时降解呕吐毒素和玉米赤霉烯酮及应用。
[0007]本专利技术是通过以下技术方案实现的：一种贝莱斯芽孢杆菌 Vel
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HNGD
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F2菌株，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，其保藏编号为CGMCCNO：23365。
[0008]优选的，该菌株能同时降解有镰刀菌属真菌毒素产生的呕吐毒素和玉米赤霉烯酮。
[0009]优选的，该贝莱斯芽孢杆菌Vel
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HNGD
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F2菌株发酵液对呕吐毒素降解，当菌体浓度108‑
109CFU/mL时，降解率为70％
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80％。
[0010]优选的，该贝莱斯芽孢杆菌Vel
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HNGD
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F2菌株对玉米赤霉烯酮有降解效果，对玉米赤霉烯酮降解率为70％
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80％。
[0011]优选的，该贝莱斯芽孢杆菌Vel
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HNGD
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F2对呕吐毒素和玉米赤霉烯酮具有降解有显著降解的效果成为为胞外酶。
[0012]优选的，该贝莱斯芽孢杆菌Vel
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HNGD
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F2菌株应用于食品或饲料加工过程中降解有镰刀菌属真菌产生的具有生物毒性的次级代谢物呕吐毒素和玉米赤霉烯酮。
[0013]优选的，该贝莱斯芽孢杆菌Vel
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HNGD
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F2具有耐高温的特性，能够在85℃20min的情况下存活菌体数高达108‑
109CFU/mL。
[0014]贝莱斯芽孢杆菌Vel
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F2全培养液培养物的制备方法为：
[0015]取冻存在
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80℃贝莱斯芽孢杆菌Vel
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F2菌株划线到发酵培养基上，培养48h，挑取单菌落接种到装有50mL的发酵液体培养基锥形瓶中，在37℃震荡培养48h。
[0016]在上述方案的基础上，贝莱斯芽孢杆菌Vel
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HNGD
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F2菌悬液的制备方法为：
[0017]取20mL的贝莱斯芽孢杆菌Vel
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F2全培养液培养物，经 10000r/min离心10min后，分离得到菌体和上清液，制备的菌体经磷酸盐缓冲液洗涤后离心，加入磷酸盐缓冲液补齐至20mL，悬浮菌体获得Vel
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F2菌株菌悬液。
[0018]在上述方案的基础上，贝莱斯芽孢杆菌Vel
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F2胞外代谢物的制备方法为：
[0019]取20mL的贝莱斯芽孢杆菌Vel
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F2全培养液培养物，经 10000r/min离心10min后，分离得到菌体和上清液，上清液即为贝莱斯芽孢杆菌Vel
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F2胞外代谢物。
[0020]在上述方案的基础上，贝莱斯芽孢杆菌Vel
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F2粗提物的制备方法为：
[0021]贝莱斯芽孢杆菌Vel
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F2菌悬液经低温超声破碎后， 10000r/min离心10min得到的液体经0.22μm滤膜过滤制备 Vel
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F2菌株的粗提物。
[0022]本专利技术提供的菌株能够有效的对呕吐毒素和玉米赤霉烯酮进行有效的降解，且降解的效果达到了70％
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80％，且该菌株具有很好的耐高温的效果，能够很好的应用在食品或饲料的加工中。
附图说明
[0023]图1为Vel
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F2菌株降解呕吐毒素前和降解后高效液相色谱图；
[0024]图2为Vel
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F2菌株形态图；
[0025]图3为Vel
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F2菌株降解玉米赤霉烯酮前和降解后高效液相色谱图。
具体实施方式
[0026]在本专利技术的描述中，还需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“设置”、“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本专利技术中的具体含义。
[0027]下面将结合专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0028]实施例1贝莱斯芽孢杆菌Vel
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F2的筛选及鉴定
[0029]1.从猪肠道微生物中取得样品，称取1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时降解呕吐毒素和玉米赤霉烯酮的贝莱斯芽孢杆菌，其特征在于：所述贝莱斯芽孢杆菌为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)Vel
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F2，保藏与中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号：CGMCCNO：23365。2.一种如权利要求1所述的同时降解呕吐毒素和玉米赤霉烯酮的贝莱斯芽孢杆菌的应用，其特征在于，该菌株Vel
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F2可以有效的对呕吐毒素进行降解，用于降解呕吐毒素。3.一种如权利要求1所述的同时降解呕吐毒素和玉米赤霉烯...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢岩黎，曹荣耀，马卫宾，孙淑敏，李倩，杨玉辉，
申请(专利权)人：河南工业大学，
类型：发明
国别省市：