一种转铁蛋白修饰的具有主动靶向功能的紫杉醇薏苡仁油纳米微乳的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种转铁蛋白修饰的具有主动靶向功能的紫杉醇薏苡仁油纳米微乳的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：将薏苡仁油、助乳化剂、乳化剂和紫杉醇混合，40～45℃搅拌混合4～6h，得到初乳；在同样温度和搅拌条件下，使用去离子水对初乳进行滴定，缓慢滴加去离子水至凝胶区，凝胶区后可快速滴加去离子水至体系透明澄清，得到紫杉醇薏苡仁油纳米微乳；将紫杉醇薏苡仁油纳米微乳与EDC、NHS、转铁蛋白、去离子水混合进行孵育，即可得到转铁蛋白修饰的具有主动靶向功能的紫杉醇薏苡仁油纳米微乳，此种方法可提高难溶性药物紫杉醇的溶解度，且所制得的载药微乳具有类球形结构、粒径分布较小。粒径分布较小。粒径分布较小。

【技术实现步骤摘要】
一种转铁蛋白修饰的具有主动靶向功能的紫杉醇薏苡仁油纳米微乳的制备方法


[0001]本专利技术属于中药
，具体涉及一种转铁蛋白修饰的具有主动靶向功能的紫杉醇薏苡仁油纳米微乳的制备方法。

技术介绍

[0002]紫杉醇为白色结晶体粉末，无臭，无味，难溶于水，易溶于甲醇、乙腈、氯仿、丙酮等有机溶剂。是目前已发现的最优秀的天然抗癌药物，在临床上已经广泛用于乳腺癌、卵巢癌和部分头颈癌和肺癌的治疗。
[0003]但是紫杉醇在水中的溶解度较低，溶解度在10.8μg/mL左右，口服难以被吸收，绝对生物利用度较低，约为2％，同时具有一定的毒性，限制了紫杉醇在临床中的应用。

技术实现思路

[0004]为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种转铁蛋白修饰的具有主动靶向功能的紫杉醇薏苡仁油纳米微乳的制备方法，此种方法可提高难溶性药物紫杉醇的溶解度，且所制得的载药微乳具有类球形结构、粒径分布较小，且该制备方法简单、操作简便、成本低廉、省时高效、易于规模化生产。
[0005]本专利技术采取的技术方案如下：
[0006]一种转铁蛋白修饰的具有主动靶向功能的紫杉醇薏苡仁油纳米微乳的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0007](1)将薏苡仁油、助乳化剂、乳化剂和紫杉醇混合，40～45℃搅拌混合4～6h，得到初乳；
[0008](2)在同样温度和搅拌条件下，使用去离子水对初乳进行滴定，缓慢滴加去离子水至凝胶区，凝胶区后可快速滴加去离子水至体系透明澄清，得到紫杉醇薏苡仁油纳米微乳；
>[0009](3)将紫杉醇薏苡仁油纳米微乳与EDC、NHS、转铁蛋白、去离子水混合进行孵育，即可得到转铁蛋白修饰的具有主动靶向功能的紫杉醇薏苡仁油纳米微乳。
[0010]所述助乳化剂为PEG 400，PEG 400(聚乙二醇400)是一种安全、无毒、亲水、稳定的聚合物，是很好的溶剂和增溶剂，在体内能溶于组织液中，能在体内迅速代谢排出体外而不产生毒副作用。
[0011]所述乳化剂为HS 15，HS 15为非离子型增溶剂和乳化剂，由15mol环氧乙烷和1mol 12
‑
羟基硬脂酸反应制得的15
‑
羟基硬脂酸聚乙二醇酯，其对多种难溶性药物都具有强大的增溶能力。
[0012]所述紫杉醇与薏苡仁油的质量比为1：20～40。薏苡仁油具有抗肿瘤、镇痛消炎、抗病毒等作用，以其作为紫杉醇纳米微乳制备的油相，可与紫杉醇抗肿瘤活性成分达到协同作用。
[0013]所述薏苡仁油的质量与助乳化剂、乳化剂质量之和的比值为1：1.5～3.0。
[0014]所述助乳化剂、乳化剂的质量之比为1：3。
[0015]所述搅拌的速度为600rpm～800rpm。
[0016]步骤(3)中，所述紫杉醇薏苡仁油纳米微乳、EDC、NHS、转铁蛋白、去离子水的用量比为1mL:0.5
‑
1.0mg:0.2
‑
0.6mg:0.3
‑
0.8mg:3
‑
5mL。
[0017]步骤(3)中，所述孵育的条件为35
‑
38℃孵育7.5
‑
8.5h。
[0018]本专利技术还提供了所述制备方法制备得到的转铁蛋白修饰的具有主动靶向功能的紫杉醇薏苡仁油纳米微乳，其微观形貌为类球形结构、粒径为30～35nm。
[0019]本专利技术提供的转铁蛋白修饰的具有主动靶向功能的紫杉醇薏苡仁油纳米微乳的制备方法中，采用HS 15与PEG 400共同作为载体，通过控制各个原料的用量配比与去离子水滴定初乳的程度，采用机械搅拌的方法稳定的制备得到了基于HS 15的紫杉醇纳米微乳，再将其经转铁蛋白修饰可达到主动靶向肿瘤部位的作用。此种方法可提高难溶性药物紫杉醇的溶解度，多种肿瘤细胞包括宫颈癌细胞表面都具有转铁蛋白受体过表达现象，本专利技术采用经典化学缩合法，在偶联剂EDC/NHS作用下，将转铁蛋白修饰在紫杉醇薏苡仁油微乳的表面，可提高紫杉醇薏苡仁油微乳的主动靶向能力，从而提高其抗肿瘤的疗效。
附图说明
[0020]图1为实施例1中制备的转铁蛋白修饰的紫杉醇薏苡仁油微乳的成品图；
[0021]图2为对比例1中制备的转铁蛋白修饰的紫杉醇薏苡仁油非成乳成品图；
[0022]图3为实施例1中制备的转铁蛋白修饰的紫杉醇薏苡仁油微乳的TEM图；
[0023]图4为实施例1中制备的转铁蛋白修饰的紫杉醇薏苡仁油微乳的体外累积释放曲线；
[0024]图5为以薏苡仁油为油相，PEG 400为助乳化剂，Tween 80(A)、RH 40(B)HS 15(C)分别作为乳化剂得到的伪三元相图，其中M为微乳区、G为凝胶区；
[0025]图6为以薏苡仁油为油相、HS 15为乳化剂，以PEG 400(A)、丙二醇(B)为助乳化剂得到的伪三元相图，其中M为微乳区、G为凝胶区；
[0026]图7为以薏苡仁油为油相、HS 15为乳化剂、PEG 400为助乳化剂，乳化剂与助乳化剂的质量比分别为1:1(A)、2:1(B)、3:1(C)得到的伪三元相图，其中M为微乳区、G为凝胶区。
具体实施方式
[0027]下面结合实施例对本专利技术进行详细说明。
[0028]实施例1
[0029]一种具有抗肿瘤活性的紫杉醇纳米微乳的制备方法，包括以下步骤：
[0030](1)称取400mg薏苡仁油、150mg PEG 400、450mg HS 15、20mg紫杉醇，加入西林瓶中，恒温42℃进行磁力搅拌4h，涡轮混匀使药物充分溶解；
[0031](2)在42℃恒温磁力搅拌下，使用去离子水进行滴定，边滴定边观察进凝胶区和出凝胶区状态，缓慢滴加去离子水至凝胶区，凝胶区后可快速滴加去离子水至10mL，此时得到透明澄清的紫杉醇薏苡仁油纳米微乳；
[0032](3)取紫杉醇薏苡仁油微乳1mL，精密称取0.70mg EDC、0.40mg NHS、0.50mg转铁蛋白，加去离子水定容至5mL，37℃孵育8h，即得转铁蛋白修饰的紫杉醇薏苡仁油微乳，测得其
平均粒径为30.39
±
1.28nm，包封率为76.29％。
[0033]实施例2
[0034]一种具有抗肿瘤活性的紫杉醇纳米微乳的制备方法，包括以下步骤：
[0035](1)称取400mg薏苡仁油、150mg PEG 400、450mg HS 15、15mg紫杉醇，加入西林瓶中，恒温42℃进行磁力搅拌4h，涡轮混匀使药物充分溶解；
[0036](2)在42℃恒温磁力搅拌下，使用去离子水进行滴定，边滴定边观察进凝胶区和出凝胶区状态，缓慢滴加去离子水至凝胶区，凝胶区后可快速滴加去离子水至10mL，此时得到透明澄清的紫杉醇薏苡仁油纳米微乳；
[0037](3)取紫杉醇薏苡仁油纳米微乳1mL，精密称取0.70mg EDC、0.40mg NHS、0.50mg转铁蛋白，加去离子水定本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种转铁蛋白修饰的具有主动靶向功能的紫杉醇薏苡仁油纳米微乳的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：(1)将薏苡仁油、助乳化剂、乳化剂和紫杉醇混合，40～45℃搅拌混合4～6h，得到初乳；(2)在同样温度和搅拌条件下，使用去离子水对初乳进行滴定，缓慢滴加去离子水至凝胶区，凝胶区后可快速滴加去离子水至体系透明澄清，得到紫杉醇薏苡仁油纳米微乳；(3)将紫杉醇薏苡仁油纳米微乳与EDC、NHS、转铁蛋白、去离子水混合进行孵育，即可得到转铁蛋白修饰的具有主动靶向功能的紫杉醇薏苡仁油纳米微乳。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述助乳化剂为PEG 400。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述乳化剂为HS 15。4.根据权利要求1
‑
3任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述紫杉醇与薏苡仁油的质量比为1：20～40。5.根据权利要求1
‑
3任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述薏苡仁油的质量与助乳化剂、乳化剂质量之和的比值为1：1.5～3.0。6.根据权利要求1

【专利技术属性】
技术研发人员：陈云艳，周凌云，汤琳，李萍，
申请(专利权)人：皖南医学院，
类型：发明
国别省市：