一种检测β-蒿甲醚含量和有关物质的高效液相色谱法制造技术

本发明专利技术公开了一种检测β

【技术实现步骤摘要】
一种检测
β
‑
蒿甲醚含量和有关物质的高效液相色谱法


[0001]本专利技术属于药物分析
具体而言，本专利技术涉及一种检测β
‑
蒿甲醚含量和有关物质的高效液色谱相法。

技术介绍

[0002]β
‑
蒿甲醚(结构式见附图1)分子式：C
16
H
26
O5，为白色结晶或结晶性粉末。β
‑
蒿甲醚可以制成β
‑
蒿甲醚片、β
‑
蒿甲醚胶囊和β
‑
蒿甲醚注射液，也可与本芴醇制成复方β
‑
蒿甲醚片。β
‑
蒿甲醚为一高效、速效的疟原虫红细胞内期杀灭剂。用于抗氯喹恶性疟及凶险型疟疾的治疗，显效迅速，近期疗效好。目前关于β
‑
蒿甲醚含量和有关物质检验方法方面，中国药典和国际药典都使用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱(国际药典规定了规格为4.6
×
250mm 5μm)；以乙腈
‑
水(62：38)为流动相；检测波长为216nm；进样体积20μL的检验方法。在使用药典方法检验β
‑
蒿甲醚的过程中，在相对保留时间约6处发现一色谱峰，经调查发现，该色谱峰为β
‑
蒿甲醚杂质。同时该杂质在欧洲药品质量管理局(EDQM)和中国食品药品检定研究院购买的β
‑
蒿甲醚法定对照品、其他厂家生产或者购买的β
‑
蒿甲醚中均有发现。
[0003]在使用中国药典和国际药典β
‑
蒿甲醚方法检验过程中，如需检验该杂质，在β
‑
蒿甲醚主峰为约8分钟的情况下，该杂质的保留时间约为50分钟，检验效率低下。
[0004]故需要重新建立一个高效率的检验方法用于β
‑
蒿甲醚中该杂质的检测。同时，也需要提供一种能够分析含有β
‑
蒿甲醚的样品中的杂质含量的方法。

技术实现思路

[0005]本专利技术的一个目的在于提供一种能够快速检测含β
‑
蒿甲醚的样品中是否含有杂质A的方法。
[0006]本专利技术的另一目的在于提供一种能够同时对含β
‑
蒿甲醚的样品中的杂质，包括α
‑
双氢青蒿素、β
‑
双氢青蒿素、青蒿素和α
‑
蒿甲醚进行定量的方法。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术提供了如下的技术方案：
[0008]首先，本专利技术提供了一种利用HPLC快速检测含β
‑
蒿甲醚的样品中是否含有杂质A的方法，其包括：
[0009]将含β
‑
蒿甲醚的样品溶解于适量的溶剂中，制成供试品溶液；
[0010]采用HPLC对供试品溶液进行检测，观察保留时间26
‑
27min处有无色谱峰；其中，HPLC所使用的色谱条件为：
[0011]色谱柱：Thermo HYPERSIL BDS C18；
[0012]进样量：1
‑
20μL；
[0013]柱温：30℃；
[0014]检测波长：190nm
‑
400nm；
[0015]流动相流速：0.8
‑
1.5mL/min；
[0016]洗脱条件：以乙腈作为流动相A，水作为流动相B，按照以下方式进行梯度洗脱：
[0017][0018]根据本专利技术的具体实施方案，本专利技术提供的检测方法中，所述方法还包括在上述洗脱条件结束后，以68％的流动相A和32％的流动相B继续运行6min左右，保持色谱柱平衡。
[0019]根据本专利技术的具体实施方案，本专利技术提供的检测方法中，所述含β
‑
蒿甲醚的样品包括β
‑
蒿甲醚原料药、β
‑
蒿甲醚法定对照品、含β
‑
蒿甲醚的组合物或药物制剂，例如蒿甲醚片、复方蒿甲醚片或蒿甲醚注射剂。
[0020]根据本专利技术的具体实施方案，本专利技术提供的检测方法中，所述进样量可以为1μL、2μL、3μL、4μL、5μL、6μL、7μL、8μL、9μL、10μL、11μL、12μL、13μL、14μL、15μL、16μL、17μL、18μL、19μL、20μL或者它们所构成的范围。
[0021]根据本专利技术的具体实施方案，本专利技术中提供的检测方法中，流动相的流速可以为0.8mL/min、0.9mL/min、1.0mL/min、1.1mL/min、1.2mL/min、1.3mL/min、1.4mL/min、1.5mL/min或者它们所构成的范围。
[0022]根据本专利技术的具体实施方案，本专利技术中提供的检测方法中，所述溶剂为乙腈和水的混合溶剂；优选为乙腈和水体积比为1:1的混合溶剂。
[0023]根据本专利技术的具体实施方案，本专利技术提供的检测方法中，以β
‑
蒿甲醚计，供试品溶液的浓度为1mg/mL
‑
10mg/mL。在一些具体的实施方案中，所述供试品溶液的浓度以β
‑
蒿甲醚计可以为1mg/mL、2mg/mL、3mg/mL、4mg/mL、5mg/mL、6mg/mL、7mg/mL、8mg/mL、9mg/mL、10mg/mL或者它们所构成的范围。
[0024]根据本专利技术的具体实施方案，本专利技术提供的检测方法中，所述色谱柱Thermo HYPERSIL BDS C18的粒径为3
‑
5μm、色谱柱的长度为150mm或250mm。
[0025]根据本专利技术的具体实施方案，本专利技术提供的检测方法中，所述色谱条件进一步优选为：
[0026]色谱柱：Thermo HYPERSIL BDS C18，规格为4.6
×
250mm 5μm；
[0027]进样量：5μL；
[0028]柱温：30℃；
[0029]检测波长：216nm；
[0030]流动相流速：1.0mL/min；
[0031]洗脱条件：以乙腈作为流动相A，水作为流动相B，按照以下方式进行梯度洗脱：
[0032][0033]其次，本专利技术还提供了一种利用HPLC同步检测供试品中α
‑
双氢青蒿素、β
‑
双氢青蒿素、青蒿素、α
‑
蒿甲醚和β
‑
蒿甲醚含量的方法，其包括：
[0034]对照品溶液的制备：取β
‑
蒿甲醚对照品适量，精密称定，置容量瓶中，加溶剂，稀释
至刻度，摇匀，作为对照品溶液；
[0035]供试品溶液的制备：取供试品适量，精密称定，置容量瓶中，加溶剂，稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；
[0036]测定：分别取对照品溶液和供试品溶液，采用本专利技术提供的色谱条件进行高效液相色谱分析，通过外标法测得β<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用HPLC快速检测含β
‑
蒿甲醚的样品中是否含有杂质A的方法，其包括：将含β
‑
蒿甲醚的样品溶解于适量的溶剂中，制成供试品溶液；采用HPLC对供试品溶液进行检测，观察保留时间26
‑
27min处有无色谱峰；其中，HPLC所使用的色谱条件为：色谱柱：Thermo HYPERSIL BDS C18；进样量：1
‑
20μL；柱温：30℃；检测波长：190nm
‑
400nm；流动相流速：0.8
‑
1.5mL/min；洗脱条件：以乙腈作为流动相A，水作为流动相B，按照以下方式进行梯度洗脱：2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述含β
‑
蒿甲醚的样品包括β
‑
蒿甲醚原料药、β
‑
蒿甲醚法定对照品、含β
‑
蒿甲醚的组合物或药物制剂。3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述溶剂为乙腈和水的混合溶剂；优选为乙腈和水体积比为1:1的混合溶剂。4.根据权利要求1所述的方法，其中，以β
‑
蒿甲醚计，供试品溶液的浓度为1mg/mL
‑
10mg/mL。5.根据权利要求1所述的方法，其中，Thermo HYPERSIL BDS C18的粒径为3
‑
5μm、色谱柱的长度为150mm或250mm。6.根据权利要求1
‑
5中任一项所述的方法，其中：HPLC所使用的色谱条件为：色谱柱：Thermo HYPERSIL BDS C18，规格为4.6
×
250mm 5μm；进样量：5μL；柱温：30℃；检测波长：216nm；流动相流速：1.0mL/min；洗脱条件：以乙腈作为流动相A，水作为流动相B，按照以下方式进行梯度洗脱：7.一种利用HPLC同步检测供试品中α
‑
双氢青蒿素、β
‑
双氢青蒿素、青蒿素、α
‑...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭学东，张梅，赵金召，陈亚平，
申请(专利权)人：张家港威胜生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：