抗甲型流感病毒的抗体和试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种抗甲型流感病毒的抗体和试剂盒，涉及抗体技术领域。本发明专利技术公开的抗甲型流感病毒的抗体包括重链互补决定区和轻链互补决定区。该抗体对甲型流感病毒抗原的亲和力较好，使用该抗体检测甲型流感病毒具有较好的灵敏度和特异性。好的灵敏度和特异性。好的灵敏度和特异性。

【技术实现步骤摘要】
抗甲型流感病毒的抗体和试剂盒


[0001]本专利技术涉及抗体
，具体而言，涉及一种抗甲型流感病毒的抗体和试剂盒。

技术介绍

[0002]流行性感冒病毒(Influenza virus，Flu)，简称流感病毒，是正粘病毒科的代表种，包括人类流感病毒、猪流感病毒、马流感病毒、禽流感病毒等，其中人流感病毒根据其核蛋白的抗原性可分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型，是流行性感冒的病原体。流感病毒可引起人、禽、猪、马、蝙蝠等多种动物感染和发病。其中可感染人主要是甲型流感病毒和乙型流感病毒，主要引起上呼吸道的感染，也可引起儿童与成年人的下呼吸道感染，主要为肺炎，婴幼儿的重症流感常伴有支气管、高热。
[0003]甲型流感病毒(Influenza A，Flu-A)于1933年分离成功，其抗原易发生变异，可以进一步分为H1N1、H3N2、H5N1、H7N9等亚型(H代表流感病毒的血凝素、N代表流感病毒的神经氨酸酶)，多次引起世界性大流行，每年均有一个高峰。甲型流感病毒感染发病程度与个人免疫相关，典型症状以畏寒、持续高热、头痛为主，同时伴有喉痛、咳嗽、鼻塞，一般会有浑身酸痛、乏力等全身症状。文献报道流行期阳性检出率为20～40％，而在非流行季节的阳性率为2-20％。甲型流感病毒的持续性流行会给人们的健康、生活及社会公共防疫系统带来极大的干扰和压力，它已经成为流行病学的主要研究对象之一。
[0004]目前市场上针对甲型流感病毒的检测方法主要有荧光PCR法、免疫法、病毒分离培养鉴定。荧光PCR法是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测，定性或定量检测目的，该方法是病原检测的金标准；免疫法是通过抗原抗体发出特异性结合来检测目的蛋白；病毒分离培养常用的方法有鸡胚接种、动物接种、组织(细胞)培养等，再对产生的结果进行观察分析。荧光PCR法虽有较好的灵敏度和特异性，其检测窗口期较短，为疫病的早诊断、早治疗、降低死亡率及控制疫情争取时间，可作为诊断的金标准。但该法对检测人员要求较高，需要经过专业的技能培训，诊断检测需在具备资质的专业实验室使用专业的仪器设备才能进行，因此该法并不适用于临床或流行病监测一线的快速诊断。病毒分离培养鉴定检测耗时较长，环境要求高，操作者的感染风险大，培养效果差，在临床诊断和流行病监测等方面的应用非常有限。免疫法检测试剂针对的是样品中的抗原或者抗体，检测速度较快，准确性较好，同时对实验室与操作人员要求较低，普遍适用于医院检验科、疾控系统实验室等基层筛查，对甲型流感的初始检测、在医院及社区中成功控制爆发和指导治疗具有非常重要的作用。
[0005]目前市场上针对甲型流感的免疫诊断试剂产品主要有酶联免疫吸附法(ELISA法)、胶体金免疫层析法，如广州万孚的甲型流感病毒抗原检测试剂(胶体金法)、R&D的甲型流感ELISA试剂盒等。以上各种诊断试剂产品中，均需要针对甲型流感病毒的特异性抗体，目前市场上针对甲型流感病毒的特异性抗体在特异性及灵敏度均存在一定的缺陷。
[0006]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供一种抗甲型流感病毒的抗体和试剂盒，该抗体对甲型流感病毒抗原的亲和力较好，使用该抗体检测甲型流感病毒具有较好的灵敏度和特异性。
[0008]本专利技术是这样实现的：
[0009]一方面，本专利技术提供一种抗甲型流感病毒的抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段具有如下互补决定区：
[0010]CDR-VH1：G-F-X1-F-S-X2-X3-W-M-D；其中：X1是T或S；X2是N或D；X3是G或A；
[0011]CDR-VH2：E-X1-R-T-K-X2-S-N-H-A-X3-Y-Y-A-E-S-X4-K-G；其中：X1是I、V或L；X2是T或S；X3是T或S；X4是I、V或L；
[0012]CDR-VH3：T-X1-Y-D-Y-E-X2；其中：X1是I或L；X2是L、V或I；
[0013]CDR-VL1：S-X1-X2-S-S-X3-S-Y-M-H；其中：X1是G或A；X2是T或S；X3是I、V或L；
[0014]CDR-VL2：D-X1-S-K-X2-A-S；其中：X1是T或S；X2是I、V或L；
[0015]CDR-VL3：X1-Q-W-S-T-X2-P；其中：X1是H或Q；X2是R、H或N。
[0016]本专利技术提供的抗甲型流感病毒的抗体或其功能性片段，具有上述互补决定区结构，上述互补决定区结构可使抗体或其功能性片段能够特异性结合甲型流感病毒抗原，对甲型流感病毒抗原具有较好的亲和力，用该抗体或其功能性片段检测甲型流感病毒，具有较好的特异性和灵敏度。
[0017]在可选的实施方式中，
[0018]CDR-VH1中，X3是A；
[0019]CDR-VH2中，X3是T；
[0020]CDR-VH3中，X1是L；
[0021]CDR-VL1中，X1是A；
[0022]CDR-VL2中，X1是T；
[0023]CDR-VL3中，X1是Q。
[0024]本专利技术的专利技术人发现，在各互补决定区中的上述突变位点为上述氨基酸残基时，该抗体对甲型流感病毒表现出更好的亲和力。
[0025]在可选的实施方式中，CDR-VH1中，X1是T。
[0026]在可选的实施方式中，CDR-VH1中，X1是S。
[0027]在可选的实施方式中，CDR-VH1中，X2是N。
[0028]在可选的实施方式中，CDR-VH1中，X2是D。
[0029]在可选的实施方式中，CDR-VH2中，X1是I。
[0030]在可选的实施方式中，CDR-VH2中，X1是V。
[0031]在可选的实施方式中，CDR-VH2中，X1是L。
[0032]在可选的实施方式中，CDR-VH2中，X2是T。
[0033]在可选的实施方式中，CDR-VH2中，X2是S。
[0034]在可选的实施方式中，CDR-VH2中，X4是I。
[0035]在可选的实施方式中，CDR-VH2中，X4是V。
[0036]在可选的实施方式中，CDR-VH2中，X4是L。
[0037]在可选的实施方式中，CDR-VH3中，X2是L。
[0038]在可选的实施方式中，CDR-VH3中，X2是V。
[0039]在可选的实施方式中，CDR-VH3中，X2是I。
[0040]在可选的实施方式中，CDR-VL1中，X2是T。
[0041]在可选的实施方式中，CDR-VL1中，X2是S。
[0042]在可选的实施方式中，CDR-VL1中，X3是I。
[0043]在可选的实施方式中，CDR-VL1中，X3是V。
[0044]在可选的实施方式中，CDR-VL1中，X3是L。
[0045]在可选的实施方式中，CDR-VL2中，X2是I。
[0046本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗甲型流感病毒的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包括如下互补决定区：CDR-VH1：G-F-X1-F-S-X2-X3-W-M-D；其中：X1是T或S；X2是N或D；X3是G或A；CDR-VH2：E-X1-R-T-K-X2-S-N-H-A-X3-Y-Y-A-E-S-X4-K-G；其中：X1是I、V或L；X2是T或S；X3是T或S；X4是I、V或L；CDR-VH3：T-X1-Y-D-Y-E-X2；其中：X1是I或L；X2是L、V或I；CDR-VL1：S-X1-X2-S-S-X3-S-Y-M-H；其中：X1是G或A；X2是T或S；X3是I、V或L；CDR-VL2：D-X1-S-K-X2-A-S；其中：X1是T或S；X2是I、V或L；CDR-VL3：X1-Q-W-S-T-X2-P；其中：X1是H或Q；X2是R、H或N。2.根据权利要求1所述的抗甲型流感病毒的抗体或其功能性片段，其特征在于，CDR-VH1中，X3是A；CDR-VH2中，X3是T；CDR-VH3中，X1是L；CDR-VL1中，X1是A；CDR-VL2中，X1是T；CDR-VL3中，X1是Q；优选的，CDR-VH1中，X1是T；优选的，CDR-VH1中，X1是S；优选的，CDR-VH1中，X2是N；优选的，CDR-VH1中，X2是D；优选的，CDR-VH2中，X1是I；优选的，CDR-VH2中，X1是V；优选的，CDR-VH2中，X1是L；优选的，CDR-VH2中，X2是T；优选的，CDR-VH2中，X2是S；优选的，CDR-VH2中，X4是I；优选的，CDR-VH2中，X4是V；优选的，CDR-VH2中，X4是L；优选的，CDR-VH3中，X2是L；优选的，CDR-VH3中，X2是V；优选的，CDR-VH3中，X2是I；优选的，CDR-VL1中，X2是T；优选的，CDR-VL1中，X2是S；优选的，CDR-VL1中，X3是I；优选的，CDR-VL1中，X3是V；优选的，CDR-VL1中，X3是L；优选的，CDR-VL2中，X2是I；优选的，CDR-VL2中，X2是V；优选的，CDR-VL2中，X2是L；
优选的，CDR-VL3中，X2是R；优选的，CDR-VL3中，X2是H；优选的，CDR-VL3中，X2是N；优选的，所述抗体或其功能性片段的各互补决定区选自如下突变组合1-64中的任意一种：
3.根据权利要求2所述的抗甲型流感病毒的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段与甲型流感病毒抗原以K
D
≤5.48
×
10-8
mol/L的亲和力结合；优选的，K
D
≤6.23
×
10-9
mol/L。4.根据权利要求1所述的抗甲型流感病毒的抗体或其功能性片段，其特征在于，CDR-VH1中，X3是G；CDR-VH2中，X3是S；CDR-VH3中，X1是I；CDR-VL1中，X1是G；CDR-VL2中，X1是S；CDR-VL3中，X1是H；优选的，所述抗体或其功能性片段的各互补决定区选自如下突变组合65-74中的任意一种：
5.根据权利要求1-4任一项所述的抗甲型流感病毒的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体包括序列依次如SEQ ID NO:1-4所示的轻链骨架区FR1-L、FR2-L、FR3-L及FR4-L，和/或，序列依次如SEQ ID NO:5-8所示的重链骨架区FR1-H、FR2-H、FR3-H及FR4-H；优选的，所述抗体还包含恒定区；优选的，所述恒定区选自IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgM、I...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔鹏，何志强，孟媛，钟冬梅，唐丽娜，罗沛，
申请(专利权)人：东莞市朋志生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：