一种用于IgA肾病检测的系统、方法及方法的建立技术方案

本发明专利技术公开了一种用于IgA肾病检测的系统、方法及方法的建立，其中，所述建立方法包括：S10、采集IgA型肾病患者、非IgA型肾病的肾病患者以及健康者的尿液；S20、检测尿液中miRNA的表达量；S30、利用2

【技术实现步骤摘要】
一种用于IgA肾病检测的系统、方法及方法的建立
[0001]本申请是申请号为201410143612.6的专利技术专利申请的分案申请，该专利技术专利申请的申请日为2014年04月10日，专利技术创造名称为“一种用于IgA肾病检测的系统、方法及方法的建立”。


[0002]本专利技术涉及医疗诊断
，尤其是涉及一种用于IgA肾病检测的系统、方法及方法的建立。

技术介绍

[0003]目前，IgA肾病诊断的主要的检测方法是肾活检，特征是肾小球系膜区IgA团块样或颗粒样沉积，肾活检时患者呈俯卧位，穿刺针在超声的引导下于患者背部进针，快速取出肾组织，在一系列固定和染色后在光学显微镜或电子显微镜下观察肾脏变化情况，以诊断肾病类型和判断预后，但肾活检存在着至少下列所述的技术缺点：
[0004]1、肾活检为创伤性检查，在早期患者尿常规正常的情况下，不推荐进行肾活检。在患者病情加重需要重新评估肾脏病理时，多次穿刺不仅加重肾损伤，还有合并出血、感染等并发症的风险，难以反复进行。
[0005]2、肾活检有许多禁忌症。如绝对禁忌症、出血倾向明显、重度高血压、精神病或不配合者、孤立肾、小肾等；相对禁忌症，肾脏感染呈活动期(如活动性肾盂肾炎、肾结核、肾脓肿)、肾肿瘤或肾动脉瘤、多囊肾、过度肥胖、慢性肾功能衰竭、重度腹水、心功能衰竭、妊娠等。因此，不是每个肾脏病患者都适合做肾活检检查。
[0006]3、肾活检还有许多的并发症。最常见的如血尿，肾周围脓肿，腰痛及腰部不适，发热，动静脉瘘等。
[0007]4、肾活检从准备穿刺到得到病理结果耗时较长，准备步骤较多，反应较慢。由于是有创检查，患者需要术前停用抗凝药，对于有心血管疾病必须长期使用抗凝药的患者不利，且患者术后必须躺在床上24小时绝对卧床，不得下床走动。而从穿刺出肾组织到固定、石蜡包埋、免疫组化染色，直到最后显微镜下观察得出病理结果，一般需要5
‑
7天时间，对于进展较快的急进性肾小球肾炎等肾病往往会造成诊断不及时，错诊或漏诊的情况时有发生。
[0008]因此，目前IgA肾病的诊断技术有待进一步改进。

技术实现思路

[0009]本专利技术的一个目的是建立一种用于IgA肾病检测方法，旨在解决现有技术中的检测时对机体创伤大、检测时间长、适用范围小、检测步骤复杂的技术问题。
[0010]本专利技术的另外一个目的是提供一种用于IgA肾病检测方法，旨在提供一种无机体创伤、检测时间短、适用范围大、检测步骤简单的IgA肾病检测方法。
[0011]本专利技术的又一个目的是提供一种用于IgA肾病检测的系统，旨在提供一种适用于无机体创伤、检测时间短、适用范围大、检测步骤简单的IgA肾病检测方法的系统。
[0012]本专利技术提出了一种用于IgA肾病检测方法的建立，包括：
[0013]S10、采集IgA型肾病患者、非IgA型肾病的肾病患者以及健康者的尿液；
[0014]S20、检测尿液中miRNA的表达量；
[0015]S30、利用2
‑
ΔΔct
相对定量法比较所述miRNA的表达量；
[0016]S40、对所述miRNA的表达量进行ROC曲线分析。
[0017]可选的，所述miRNA为miRNA
‑
25、miRNA
‑
144以及miRNA
‑
486中的至少一种。
[0018]可选的，检测miRNA
‑
25、miRNA
‑
144以及miRNA
‑
486的表达量是通过选自荧光定量PCR、Taqman探针以及LightCycle探针中的至少一种方法进行的。
[0019]可选的，所述荧光定量PCR为SYBR Green荧光定量PCR。
[0020]可选的，MiRNA
‑
25的引物为：CAUUGCACUUGUCUCGGUCUGA；
[0021]和/或，MiRNA
‑
144的引物为：UACAGUAUAGAUGAUGUACU；
[0022]和/或，MiRNA
‑
486的引物为：UCCUGUACUGAGCUGCCCCGAG。
[0023]可选的，还包括管家基因的引物为：AAAGCAGGCUUUAAAGGAACCU。
[0024]可选的，miRNA
‑
25的临界值为0.058；
[0025]和/或，miRNA
‑
144的临界值为0.007；
[0026]和/或，miRNA
‑
486的临界值为0.025。
[0027]本专利技术的另外一个目的是提出一种用于IgA肾病检测方法，所述方法是根据以上所述的方法建立的方法，包括以下步骤：
[0028]采集尿液；
[0029]检测尿液中miRNA
‑
25、miRNA
‑
144以及miRNA
‑
486中至少一个的表达量；
[0030]判断miRNA
‑
25、miRNA
‑
144或miRNA
‑
486的表达量是否高于其各自的所述临界值。
[0031]可选的，所述荧光定量PCR为SYBR Green荧光定量PCR。
[0032]本专利技术的又一个目的是提出一种用于IgA肾病检测的系统，所述用于IgA肾病检测的系统利用以上所述的用于IgA肾病检测的方法进行检测，所述系统包括：
[0033]尿液采集装置，以采集尿液；
[0034]miRNA检测装置，以检测尿液中miRNA的表达量。
[0035]根据本专利技术的用于IgA肾病检测方法的建立，可以取得以下所述的至少一种积极技术效果：
[0036]1、可以有效地建立一种用于IgA肾病检测方法。
[0037]2、由于检测的样本是尿液，而不是肾组织，所以本专利技术的最明显的优势就是具有无创伤的特点，可以根据疾病的病情变化需要反复或连续留取和测试。另外，所需留取尿液不会给患者带来任何损伤和风险，非常安全可靠。
[0038]3、由于检测时无明显禁忌症，可以适用于所有患者的检测。
[0039]4、由于所用的光定量PCR、Taqman探针以及LightCycle探针的方法已经是常见的技术手段，并且具有检测准确、安全可靠、简单易行等的优点，一般的医护人员，例如乡镇和社区的基层医护人员，经1周左右的培训就可完全掌握该方法，大大缩短了培训周期，有效解决了现有肾组织活检对于医院和医护人员要求严格限制的问题，从而使本专利技术具有更广阔的应用空间和巨大的推广价值。
[0040]5、与现有肾组织活检的3000元的费用相比，本专利技术所用试剂盒一套仅需5700元左
右，可反复使用50次，从而大大降低了患者的诊断费用。
[0041]6、现有肾组织活检从患者入院准备到最后给出诊断报告周期大约为1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于IgA肾病检测的试剂盒，其特征在于，包括：用于检测IgA型肾病患者、非IgA型肾病的肾病患者以及健康者尿液中miRNA
‑
144表达量的miRNA引物。2.根据权利要求1所述的用于IgA肾病检测的试剂盒，其特征在于，检测所述miRNA
‑
144的表达量是通过选自荧光定量PCR、Taqman探针以及LightCycle探针中的至少一种方法进行的。3.根据权利要求2所述的用于IgA肾病检测的试剂盒，其特征在于，所述荧光定量PC...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡广研，陈香美，段智宇，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院，
类型：发明
国别省市：