金属有机框架纳米酶生物探针和ELISA试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种金属有机框架纳米酶生物探针和ELISA试剂盒，涉及生物免疫传感技术领域。本发明专利技术采用的金属有机框架纳米复合材料ZIF

【技术实现步骤摘要】
金属有机框架纳米酶生物探针和ELISA试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物免疫传感
，特别涉及金属有机框架纳米酶生物探针和ELISA试剂盒。

技术介绍

[0002]癌症被认为是世界上最主要的公共卫生问题之一。其中，乳腺癌常被称为“粉红杀手”，其发病率位居女性恶性肿瘤的首位。癌症的致死率一直高居不下的最大原因在于早期的诊断十分困难。故开发能够快速、简便且低成本的检测方法，用于癌症的早期诊断对后期的治疗效果及患者的存活率等方面具有重要意义。
[0003]目前，酶联免疫吸附测定法(ELISA)是常用的乳腺癌检测方法，具有快速、高通量和低成本等优点。国内外已报道的乳腺癌的ELISA检测方法，主要是以抗原抗体反应为依据，利用二抗上偶联的辣根过氧化物酶(HRP)的底物显色作用，实现检测。但由于天然酶在非生理条件下不稳定，导致乳腺癌检测的精确度较低。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术目的在于提供金属有机框架纳米酶生物探针和ELISA试剂盒。本专利技术提供的金属有机框架纳米酶生物探针对特异性检测乳腺癌细胞具有特异性，对乳腺癌细胞的检测精度高、灵敏度高。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了金属有机框架纳米复合材料在制备特异性检测乳腺癌细胞的生物探针或制备特异性检测乳腺癌细胞的ELISA试剂盒中的应用；所述金属有机框架纳米复合材料的化学组成为ZIF
‑
67/Cu
0.76
Cor/>2.24
O4。
[0007]本专利技术提供了一种金属有机框架纳米酶生物探针，包括特异性识别乳腺癌细胞的含巯基生物材料和金属有机框架纳米复合材料；所述金属有机框架纳米复合材料的化学组成为ZIF
‑
67/Cu
0.76
Co
2.24
O4。
[0008]优选的，所述含巯基生物材料包括巯基修饰的适配体、识别多肽和抗体中的一种或几种。
[0009]优选的，所述金属有机框架纳米复合材料与含巯基生物材料的质量比为1：10
‑5～10
‑4。
[0010]本专利技术提供了上述技术方案所述的金属有机框架纳米酶生物探针在制备特异性检测乳腺癌细胞的ELISA试剂盒中的应用。
[0011]本专利技术提供了一种特异性检测乳腺癌细胞的ELISA试剂盒，包括上述技术方案所述的金属有机框架纳米酶生物探针。
[0012]优选的，还包括包被有乳腺癌抗体的酶标板、非特异性蛋白、样品稀释液、洗涤液和显色底物。
[0013]优选的，所述非特异性蛋白包括牛血清蛋白、酪蛋白和卵清蛋白中的一种或几种。
[0014]优选的，所述显色底物包括过氧化物酶活性显色底物和/或漆酶活性显色底物。
[0015]优选的，所述过氧化物酶活性显色底物包括3,3',5,5'
‑
四甲基联苯胺和H2O2；
[0016]所述漆酶活性显色底物包括2,4
‑
二氯苯酚。
[0017]本专利技术提供了金属有机框架纳米复合材料在制备特异性检测乳腺癌细胞的生物探针或制备特异性检测乳腺癌细胞的ELISA试剂盒中的应用；所述金属有机框架纳米复合材料的化学组成为ZIF
‑
67/Cu
0.76
Co
2.24
O4。本专利技术采用的ZIF
‑
67/Cu
0.76
Co
2.24
O4具有良好的吸附性，能溶于水，ZIF
‑
67/Cu
0.76
Co
2.24
O4中的铜可以与抗体、适配体、多肽等具有特异性识别乳腺癌细胞的含巯基生物材料中的巯基结合；该复合材料同时具有良好的过氧化物酶活性和漆酶活性，且结构稳定，为后续制备检测乳腺癌的产品提供了材料。
[0018]本专利技术提供了一种金属有机框架纳米酶生物探针，包括特异性识别乳腺癌细胞的含巯基生物材料和金属有机框架纳米复合材料；所述金属有机框架纳米复合材料的化学组成为ZIF
‑
67/Cu
0.76
Co
2.24
O4。本专利技术将特异性识别乳腺癌细胞的含巯基生物材料通过配位键(巯基
‑
铜)与金属有机框架纳米复合材料ZIF
‑
67/Cu
0.76
Co
2.24
O4连接，金属有机框架纳米复合材料在非生理条件下的结构稳定，实现金属有机框架纳米复合材料表面耦合特异性识别乳腺癌细胞的含巯基生物材料的目的。本专利技术提供的金属有机框架纳米酶生物探针不仅具有高的过氧化物酶和漆酶催化活性，而且还具有特异性识别乳腺癌细胞的作用，对乳腺癌细胞检测的灵敏度和精确度高，后续制备检测乳腺癌细胞的产品提供了材料。
[0019]进一步的，本专利技术提供的金属有机框架纳米酶生物探针还具体限定了特异性识别乳腺癌细胞的含巯基生物材料包括乳腺癌细胞的适配体、乳腺癌细胞识别多肽和乳腺癌细胞的抗体。本专利技术利用识别多肽、抗体以及适配体可以特异性识别结合乳腺癌细胞的特点，与金属有机框架纳米复合材料ZIF
‑
67/Cu
0.76
Co
2.24
O4结合，构建了一个用于检测乳腺癌细胞的金属有机框架纳米酶生物探针，具有检测方便、成本低、高灵敏性、高精确度以及高通量等优点。
[0020]本专利技术提供了一种特异性检测乳腺癌细胞的ELISA试剂盒，包括上述技术方案所述的金属有机框架纳米酶生物探针。本专利技术提供的特异性检测乳腺癌细胞的ELISA试剂盒中，金属有机框架纳米酶生物探针具有特异性识别乳腺癌细胞的作用，而且具有高的过氧化物酶和漆酶催化活性以及非生理条件下的结构稳定，能够催化显色底物快速显色，从而实现对乳腺癌细胞的快速可视化检测。而且，本专利技术提供的特异性检测乳腺癌细胞的ELISA试剂盒对乳腺癌细胞的检测精确度高、灵敏度高、检测范围宽、检测限低，成本低，具有重要的科学意义和临床应用价值。如实施例测试结果所示，本专利技术提供的特异性检测乳腺癌细胞的ELISA试剂盒对乳腺癌细胞的线性检测范围为10
1.3
～10
4.5
cells/mL，检测限为10
1.3
cells/mL，回收率为98.0～105％，相对标准偏差为1.3～4.5％。
[0021]进一步的，显色底物包括过氧化物酶活性显色底物和/或漆酶活性显色底物。本专利技术采用的显色底物采用两种酶促比色信号读数，使输出信号具有更高灵敏度，进一步提高了的特异性检测乳腺癌细胞的ELISA试剂盒对乳腺癌细胞的检测灵敏度。
附图说明
[0022]图1为ZIF
‑
67和ZIF
‑
67/Cu
0.76
Co
2.24
O4的TEM图，其中，(A)～(C)为ZIF
‑
67本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.金属有机框架纳米复合材料在制备特异性检测乳腺癌细胞的生物探针或制备特异性检测乳腺癌细胞的ELISA试剂盒中的应用；所述金属有机框架纳米复合材料的化学组成为ZIF
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67/Cu
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Co
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O4。2.一种金属有机框架纳米酶生物探针，包括特异性识别乳腺癌细胞的含巯基生物材料和金属有机框架纳米复合材料；所述金属有机框架纳米复合材料的化学组成为ZIF
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67/Cu
0.76
Co
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O4。3.根据权利要求2所述的金属有机框架纳米酶生物探针，其特征在于，所述含巯基生物材料包括巯基修饰的适配体、识别多肽和抗体中的一种或几种。4.根据权利要求2或3所述的金属有机框架纳米酶生物探针，其特征在于，所述金属有机框架纳米复合材料与含巯基生物材料的质量比为1：10
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【专利技术属性】
技术研发人员：李灿鹏，周敏，赵卉，
申请(专利权)人：云南大学，
类型：发明
国别省市：