一种干细胞成膜培养基及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种干细胞成膜培养基及其应用，干细胞成膜培养基包括细胞基础培养基、胎牛血清、生长因子、附着骨架材料和维生素，涉及干细胞成膜培养基的配制、干细胞的分离、干细胞的培养和干细胞成膜。本发明专利技术的有益效果是：本发明专利技术成膜方法利用胶原蛋白本身的溶解性质，将其进行低温离心成膜，操作成本、技术要求低，利于大规模生产；本发明专利技术最终获得的干细胞生物补片免疫相容性高，不良反应少，膜厚度薄且厚度根据温度和离心时间可控，并且由于本发明专利技术将干细胞嵌入了生物补片膜内，移植后随着基质被机体吸收而缓慢释放干细胞，因而起效时间更长，较普通培养吸附制备的干细胞生物补片修复卵巢的效果更好优。卵巢的效果更好优。

【技术实现步骤摘要】
一种干细胞成膜培养基及其应用


[0001]本专利技术涉及细胞培养领域，尤其涉及一种干细胞成膜培养基及其应用。

技术介绍

[0002]卵巢早衰(POF)是指卵巢功能衰竭所导致的40岁之前即闭经的现象，特点是原发或继发闭经伴随血促性腺激素水平升高和雌激素水平降低，并伴有不同程度的一系列低雌激素症状如：潮热多汗、面部潮红、性欲低下、不孕不育等，严重影响育龄妇女健康。已有研究证实，间充质干细胞(MSCs)具有调节蜕膜免疫细胞的作用，通过尾静脉注射能够修复小鼠衰老的卵巢结构，改善卵巢内分泌功能，表明采用间充质干细胞(MSCs)治疗卵巢早衰(POF)具有潜在的临床应用价值。然而，卵巢损伤部位的微环境会由于炎症反应和细胞外基质的沉积，而失去正常顺应性，产生的非诱导性微环境影响干细胞迁移，使其易向其他器官扩散，而向靶器官归巢能力下降、再生能力被严重限制。
[0003]生物补片是指取自同种、异种的组织，经脱细胞处理去除组织中含有的各种细胞而完整保留细胞外基质的三维框架结构并能用于修复人体软组织的材料，目前国内外已有数十种商品化的生物补片。生物补片不含细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种干细胞成膜培养基，其特征在于：包括细胞基础培养基、胎牛血清、生长因子、附着骨架材料和维生素。2.根据权利要求1所述的一种干细胞成膜培养基，其特征在于：所述细胞基础培养基可以是DMEM、α
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MEM、F12、DMEM/F12和IMEM等中的任意一种或其任意组合。3.根据权利要求1所述的一种干细胞成膜培养基，其特征在于：所述胎牛血清的终浓度为1
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100μl/ml。4.根据权利要求1所述的一种干细胞成膜培养基，其特征在于：所述生长因子为表皮生长因子和所述碱性成纤维细胞生长因子，所述表皮生长因子的终浓度为1
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100ng/ml，所述碱性成纤维细胞生长因子的终浓度为1
‑
100ng/ml。5.根据权利要求1所述的一种干细胞成膜培养基，其特征在于：所述附着骨架材料为Ⅰ型胶原蛋白、Ⅱ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、Ⅳ型胶原蛋白、
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型胶原蛋白中的一种或其任意组合，所述附着骨架材料的终浓度为10
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500μg/ml。6.根据权利要求1所述的一种干细胞成膜培养基，其特征在于：所述维生素为维生素A、维生素B1、维生素B6、维生素B12、维生素C、维生素E种的一种或其任意组合，维生素A的终浓度为0
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50ng/ml，维生素B1的终浓度为0
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20ng/ml，维生素B6的终浓度为0
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20ng/ml，维生素B12的终浓度为0
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20ng/ml，维生素C的终浓度为0
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100ng/ml，维生素E的终浓度为0
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60ng/ml。7.根据权利要求1或2或3或4或5或6所述的一种干细胞成膜培养基在干细胞成膜培养中的应用。8.根据权利要求3所述的一种干细胞成膜培养基在干细胞成膜培养中的应用，其特征在于包含以下步骤：a、干细胞成膜培养基的配制在超净工作台...

【专利技术属性】
技术研发人员：付强，
申请(专利权)人：山东思乐基医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：