一种CD3+TCRVα7.2+T细胞培养基和扩增培养方法技术

本发明专利技术提供了一种CD3+TCRVα7.2+T细胞培养基和细胞扩增培养方法。该培养基为基础培养基中含有3～10％的FBS、10～50U/mL的IL

【技术实现步骤摘要】
一种CD3+TCRV
α
7.2+T细胞培养基和扩增培养方法


[0001]本专利技术属于生物领域，具体涉及一种CD3+TCRVα7.2+T细胞培养基和扩增培养方法。

技术介绍

[0002]目前关于CD3+TCRVα7.2+T细胞的研究较少，但MAIT细胞(其表型是CD3+TCRVα7.2+CD161+)的获取、培养方式主要有以下几种：
[0003]i.取自健康志愿者的新鲜的外周血(PBMC)，用抗体
‑
Microbeads偶联的方式分选获得CD161+的细胞，立即对分出的细胞进行抗体染色，采用流式分选仪获得CD3+TCRVα7.2+CD161+的细胞，采用完全培养基(50％AIMV+50％RPMI1640+10％FBS+谷氨酰胺+β
‑
巯基乙醇)培养，细胞密度范围在5E+05～2E+06个细胞/mL，培养箱环境是37℃，5％CO2(卢湧湧，膀胱癌患者体内粘膜相关恒定T细胞(MAIT)的数量、功能及其抗肿瘤作用研究，2017学位论文，山东大学)。
[0004]ii.用抗CD3磁珠本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种CD3+TCRVα7.2+T细胞培养基，其特征在于，为基础培养基中含有3～10％的FBS、10～50U/mL的IL
‑
2、10～50ng/mL的IL
‑
15；所述基础培养基选自RPMI 1640培养基、T009培养基、AIMV培养基、DMEM培养基、X
‑
VIVO培养基中的一种或多种。2.如权利要求1所述的CD3+TCRVα7.2+T细胞培养基，其特征在于，还含有1％
±
0.5％100X青霉素
‑
链霉素、1％
±
0.5％L
‑
谷氨酰胺、1％
±
0.5％非必需氨基酸。3.如权利要求1所述的CD3+TCRVα7.2+T细胞培养基，其特征在于，还含有5～30ng/mLIL
‑
7、20～50ng/mLIL
‑
12或20～50ng/mLIL
‑
18。4.如权利要求1所述的CD3+TCRVα7.2+T细胞培养基，其特征在于，含有20～50ng/mL的IL
‑
15。5.一种CD3+TCRVα7.2+T细胞扩增培养方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、细胞采集；S2、采用方法a或方法b进行CD3+TCRVα7.2+T细胞的分离；所述方法a：采用CD3磁珠分选出CD3+T细胞，再用抗人TCRVα7.2抗体和抗PE/APC/FITC磁珠分选得到CD3+TCRVα7.2+T细胞；所述方法b：采用流式细胞分选技术；S3、采用方法c、方...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾裕杰，徐南，康立清，俞磊，谭靖雯，叶晶，方小燕，王依婷，
申请(专利权)人：上海优卡迪生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：