一种刀孢蜡蚧菌油剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种刀孢蜡蚧菌油剂及其制备方法和应用，属于生物防治技术领域。以刀孢蜡蚧菌HFLP006菌株孢子液为原药，研制出货架期长且对烟粉虱有较高杀虫效果的蜡蚧菌油剂。对油剂载体、助剂与HFLP006菌株的孢子生物相容性测定，确定配方为：30％的HFLP006菌株孢子液、0.05％的油酸聚氧乙烯脂为乳化剂、0.5％的T

【技术实现步骤摘要】
一种刀孢蜡蚧菌油剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于生物防治
，具体地说，涉及一种刀孢蜡蚧菌油剂及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]烟粉虱(Bemisia tabaci(Gennadius)(Hemiptera：Aleyrodidae))，又名小白蛾、甘薯粉虱，是农作物中造成巨大损失的“超级害虫”的害虫之一，可直接刺吸及间接传播病毒为害农作物、经济作物等。且已对化学合成农药和昆虫激素类等药物产生抗药性，开发新型生物农药势在必行。
[0003]蜡蚧菌Lecanicillium属于子囊菌门(Ascomycota)、粪壳菌纲(Sordariomycetes)、肉座菌目(Hypocreales)、麦角菌科(Clavicipitaceae)，是一类重要的昆虫病原真菌，其致病性广、宿主种类多，对小型刺吸式口器害虫的防治效果较好，如蚜虫、粉虱、蚧虫、叶蝉等。其作为害虫生物防治的重要因子发挥着重要作用，在世界范围内的应用正在稳步增长。蜡蚧菌主要以分生孢子侵染害虫，目前以蜡蚧菌分生孢子为主要活性成分的蜡蚧菌制剂在害虫生物防治中取得了明显成效，但有关刀孢蜡蚧菌(Lecanicillium psalliotae)的剂型研制却鲜有报道。
[0004]真菌油剂通常是以一定的比例将真菌孢子液或孢子粉加入载体油中并辅以其他助剂制成的害虫防治剂，具有较好的附着性和渗透性，在孢子萌发和对害虫侵染时可以降低对环境湿、温度的依赖，从而提高杀虫效果。本研究采用液体发酵菌体，添加各种助剂将刀孢蜡蚧菌HFLP006菌株制备成油剂，以期为害虫生物防治提供新的生防材料。

技术实现思路

[0005]1、要解决的问题
[0006]针对现有技术存在的问题，本专利技术提供一种刀孢蜡蚧菌油剂及其制备方法和应用，它可以有效防治烟粉虱。
[0007]2、技术方案.
[0008]为解决上述问题，本专利技术采用如下的技术方案：
[0009]一种刀孢蜡蚧菌油剂，包括以下组分：真菌孢子液、载体油、乳化剂、稳定剂、紫外线保护剂、抗氧化剂；
[0010]所述的真菌孢子液为刀孢蜡蚧菌的孢子液；
[0011]所述的载体油为稻米油；
[0012]所述的乳化剂为油酸聚氧乙烯脂；
[0013]所述的稳定剂为T
‑
80；
[0014]所述的紫外线保护剂为UV
‑
234；
[0015]所述的抗氧化剂为维生素C。
[0016]上述所述的刀孢蜡蚧菌油剂中，所述的刀孢蜡蚧菌的编号为HFLP006，2018年9月
17日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为16368。
[0017]上述所述的刀孢蜡蚧菌油剂中，所述的刀孢蜡蚧菌的孢子液的制备方法如下：
[0018](1)供试菌株活化
[0019]将供试菌株刀孢蜡蚧菌HFLP006接种于SDAY培养基，并于微生物培养箱内培养15d，其中培养温度为26
±
1℃；
[0020](2)液体发酵
[0021]将活化后的菌株于无菌操作台内接种于SDAY培养基平板上，在微生物培养箱内28
±
1℃培养10d；用无菌打孔器在菌落边缘打取菌碟，接种至SDAY液体培养基内，在28
±
1℃恒温摇床下以转速160r
·
min
‑1震荡培养5d；在500mL锥形瓶内加入发酵液，其中发酵液中葡萄糖、蛋白胨、酵母浸粉之间的用量比为4∶1∶1，随后121℃灭菌20min，取刀孢蜡蚧菌HFLP006孢子悬浮液以体积百分比1％的接入量在无菌操作台内加入锥形瓶中，每个处理重复三次；置于28
±
1℃恒温摇床以160r
·
min
‑1的转速连续震荡培养7d，用血球计数板计算孢子浓度，重复测定三次；发酵完成的孢子液中孢子浓度为1.032
×
108cfu/mL，活孢率为99.58％。
[0022]上述所述的刀孢蜡蚧菌油剂中，在每100mL的刀孢蜡蚧菌油剂中，真菌孢子液用量为30mL，乳化剂用量为0.05mL，稳定剂用量为0.5mL，紫外线保护剂用量为0.3g，抗氧化剂用量为0.05g，用载体油补足至100mL。
[0023]一种刀孢蜡蚧菌油剂的制备方法，包括以下步骤：
[0024]准备真菌孢子液、载体油、乳化剂、稳定剂、紫外线保护剂、抗氧化剂，搅拌混匀，即可。
[0025]一种刀孢蜡蚧菌油剂在烟粉虱防治中的应用。
[0026]上述所述的刀孢蜡蚧菌油剂在烟粉虱防治中的应用中，所述的烟粉虱为Q型烟粉虱。
[0027]上述所述的刀孢蜡蚧菌油剂在烟粉虱防治中的应用中，所述的刀孢蜡蚧菌油剂的剂型为药学上可接受的剂型。
[0028]上述所述的刀孢蜡蚧菌油剂在烟粉虱防治中的应用中，所述的刀孢蜡蚧菌油剂的剂型为油剂。
[0029]3、有益效果
[0030]相比于现有技术，本专利技术的有益效果为：
[0031]通过对载体和各种助剂的筛选，确定刀孢蜡蚧菌HFLP006菌株油剂的配方，稻米油为菌株的载体油，油酸聚氧乙烯脂为乳化剂，T
‑
80为稳定剂，UV
‑
234为紫外保护剂，VC为抗氧化剂。具体来说，与现有技术相比，本申请作为CK处理组，对烟粉虱二龄若虫的累计死亡率最高为90.33％，LT
50
最短为3.21d；同时，CK处理组在贮存7个月后，孢子活孢率仍为96.53％和95.63％，而其他处理组孢子活孢率下降幅度较高，显著低于CK处理组。
附图说明
[0032]图1为HFLP006在9种供试油中的活孢率；
[0033]图2为HFLP006在7种不同浓度乳化剂中的活孢率；
[0034]图3为HFLP006在7种不同乳化剂中的孢子生长状况及菌丝分布图；注：A：CK、B：TW
‑
80、C：农乳
‑
600、D：农乳
‑
1602、E：硬脂酸聚氧乙烯脂、F：油酸聚氧乙烯脂、G：松香酸聚氧乙烯脂、H：乳化剂EL；
[0035]图4为HFLP006在4种不同浓度稳定剂中的活孢率；
[0036]图5为HFLP006菌株油剂在4种不同稳定剂中的稳定性；
[0037]图6为HFLP006在5种紫外保护剂中的活孢率；
[0038]图7为HFLP006在UV
‑
5不同浓度中的活孢率；
[0039]图8为两种环境下HFLP006油剂孢子的活孢率；
[0040]图9为CK组两种环境下HFLP006油剂孢子的活孢率；
[0041]图10为A组两种环境下HFLP006油剂孢子的活孢率；
[0042]图11为B组两种环境下HFLP006油剂孢子的活孢率；
[0043]图12为C组两种环境下HFLP006油剂孢子的活孢率；本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种刀孢蜡蚧菌油剂，其特征在于：包括以下组分：真菌孢子液、载体油、乳化剂、稳定剂、紫外线保护剂、抗氧化剂；所述的真菌孢子液为刀孢蜡蚧菌的孢子液；所述的载体油为稻米油；所述的乳化剂为油酸聚氧乙烯脂；所述的稳定剂为T
‑
80；所述的紫外线保护剂为UV
‑
234；所述的抗氧化剂为维生素C。2.根据权利要求1所述的刀孢蜡蚧菌油剂，其特征在于：所述的刀孢蜡蚧菌的编号为HFLP006，2018年9月17日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为16368。3.根据权利要求2所述的刀孢蜡蚧菌油剂，其特征在于：所述的刀孢蜡蚧菌的孢子液的制备方法如下：(1)供试菌株活化将供试菌株刀孢蜡蚧菌HFLP006接种于SDAY培养基，并于微生物培养箱内培养15d，其中培养温度为26
±
1℃；(2)液体发酵将活化后的菌株于无菌操作台内接种于SDAY培养基平板上，在微生物培养箱内28
±
1℃培养10d；用无菌打孔器在菌落边缘打取菌碟，接种至SDAY液体培养基内，在28
±
1℃恒温摇床下以转速160r
·
min
‑1震荡培养5d；在500mL锥形瓶内加入发酵液，其中发酵液中葡萄糖、蛋白胨、酵母浸粉之间的用量比为4∶1∶1，随后12...

【专利技术属性】
技术研发人员：李茂业，刘苏，李世广，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：