印度梨形孢在提高毛叶苕子耐干旱能力中的应用制造技术

本发明专利技术公开了印度梨形孢在提高毛叶苕子耐干旱能力中的应用。本发明专利技术将印度梨形孢纯化培养液应用在遭受干旱胁迫的毛叶苕子上。结果显示印度梨形孢处理能提高毛叶苕子对干旱胁迫的抵抗能力。本发明专利技术简单易行，具有潜在应用价值。价值。

【技术实现步骤摘要】
印度梨形孢在提高毛叶苕子耐干旱能力中的应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及印度梨形孢在提高毛叶苕子耐干旱能力中的应用。

技术介绍

[0002]印度梨形孢属于担子菌门，梨形孢属，形态与丛枝真菌类似，它会产生梨形的厚垣孢子。印度梨形孢可以在人工合成的培养基上生长，从而得到纯化菌种。印度梨形孢能够与植物共生，形成附着孢，定殖于植物的根部皮层细胞内和细胞间。印度梨形孢能够促进植物生长，加快植物对氮磷等矿物质的吸收。
[0003]毛叶苕子作为一种北方经常种植的绿肥作物，易受干旱胁迫的影响，表现为生长缓慢，叶片卷曲，干枯的表型，最终影响开花和结实。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供印度梨形孢在提高毛叶苕子耐干旱能力中的应用。
[0005]第一方面，本专利技术要求保护印度梨形孢在提高毛叶苕子耐干旱能力中的应用。
[0006]第二方面，本专利技术要求保护菌液在提高毛叶苕子耐干旱能力中的应用；所述菌液为印度梨形孢经发酵培养所得菌液。
[0007]第三方面，本专利技术要求保护上清液在提高毛叶苕子耐干旱能力中的应用；所述上清液按照包括如下步骤的方法制得：(a1)印度梨形孢经发酵培养获得菌液；(a2)将所述菌液打碎离散后离心获得所述上清液。
[0008]第四方面，本专利技术要求保护一种提高毛叶苕子耐干旱能力的方法。
[0009]本专利技术所要求保护的提高毛叶苕子耐干旱能力的方法，可包括如下步骤：将菌液稀释后灌溉毛叶苕子；所述菌液为印度梨形孢经发酵培养所得菌液。
[0010]第五方面，本专利技术要求保护一种提高毛叶苕子耐干旱能力的方法。
[0011]本专利技术所要求保护的提高毛叶苕子耐干旱能力的方法，可包括如下步骤：将上清液稀释后喷施毛叶苕子；所述上清液按照包括如下步骤的方法制得：(a1)印度梨形孢经发酵培养获得菌液；(a2)将所述菌液打碎离散后离心获得所述上清液。
[0012]第六方面，本专利技术要求保护一种提高干旱胁迫下毛叶苕子的株高和/或生物量和/或SOD活性和/或POD活性和/或CAT活性的方法。
[0013]本专利技术所要求保护的提高干旱胁迫下毛叶苕子的株高和/或生物量和/或SOD活性和/或POD活性和/或CAT活性的方法，可包括如下步骤：将菌液稀释后灌溉毛叶苕子；所述菌液为印度梨形孢经发酵培养所得菌液。
[0014]第七方面，本专利技术要求保护一种提高干旱胁迫下毛叶苕子的株高和/或生物量和/或SOD活性和/或POD活性和/或CAT活性的方法。
[0015]本专利技术所要求保护的提高干旱胁迫下毛叶苕子的株高和/或生物量和/或SOD活性和/或POD活性和/或CAT活性的方法，可包括如下步骤：将上清液稀释后喷施毛叶苕子；所述
上清液按照包括如下步骤的方法制得：(a1)印度梨形孢经发酵培养获得菌液；(a2)将所述菌液打碎离散后离心获得所述上清液。
[0016]在上述各方法中，在所述菌液中，印度梨形孢的孢子数大于等于1
×
109个/L；所述稀释为稀释20倍。
[0017]在上述各方法中，所述灌溉为每周灌溉一次，每次每株毛叶苕子灌溉0.01L稀释后菌液，持续2周。
[0018]在上述各方法中，所述喷施为每周喷施一次，每次每株毛叶苕子喷施0.01L稀释后上清液，持续2周。
[0019]在上述各方法中，所述菌液是用PDA培养基对所述印度梨形孢进行发酵培养后获得的。
[0020]本专利技术将印度梨形孢纯化培养液应用在遭受干旱胁迫的毛叶苕子上。结果显示印度梨形孢处理能提高毛叶苕子对干旱胁迫的抵抗能力。本专利技术简单易行，具有潜在应用价值。
附图说明
[0021]图1为印度梨形孢能提高毛叶毛叶苕子干旱条件下的生物量。A为不同处理条件下的毛叶苕子表型；B为株高测量分析；C为生物量测定分析。
[0022]图2为抗旱指标SOD、POD和CAT活性分析。A为SOD活性；B为POD活性；C为CAT活性。
[0023]各图中，标注“对照”的为水对照(喷施)；标注“培养基”的为培养基对照(喷施)；标注“培养液上清”的为喷施上清液；标注“印度梨形孢”的为菌体(灌溉印度梨形孢菌液)。标注**的表示与对照组相比差异极显著。
具体实施方式
[0024]下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0025]下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0026]实施例1、印度梨形孢提高毛叶苕子耐干旱能力
[0027]1、印度梨形孢培养
[0028](1)PDA土豆液体培养基制备：1L纯水，200克土豆，煮20分钟，过滤，纯水定容至1L，加20克蔗糖，高压灭菌15
‑
20分钟。
[0029](2)将印度梨形孢接种于PDA土豆液体培养基，28℃恒温培养箱，黑暗，转速200r/min，培养3～5天。
[0030](3)取步骤(2)的培养物，PDA土豆固体培养基平板划线，3
‑
5天扩散出一个个菌丝圆圈，挑出菌丝镜检，视野中都是梨形孢子，取切割好的菌丝块在液体培养基(步骤1中的PDA土豆液体培养基)中(50ml离心管)小摇3
‑
5天(28℃恒温培养箱，黑暗，转速200r/min)，加10％
‑
20％(％表示体积百分含量)甘油，
‑
80℃保藏。
[0031](4)印度梨形孢的纯化培养：用人工液体培养基(步骤1中的PDA土豆液体培养基)培养活化过的印度梨形孢。在28℃，200r/min摇床上发酵培养7
‑
10天，获得纯化菌液(印度梨形孢生长最迅速的时间是在孢子萌发的7天后)；菌液包括菌体和培养滤液，菌体包括印度梨形孢菌丝和孢子。孢子的数量达到每升约1
×
109个。
[0032]菌液打碎离散至均匀，经高速离心获得上清液。
[0033]2、在受干旱影响的毛叶苕子上，随水灌施印度梨形孢菌液或喷施菌液上清(印度梨形孢菌液或上清液稀释20倍)，一周处理一次，每次每株毛叶苕子灌溉0.01L稀释后菌液或喷施0.01L稀释后上清液，持续2周。实验设置只灌溉或喷施等量水或PDA培养基的对照组。每组处理50～100株毛叶苕子。
[0034]3、观察各组毛叶苕子的表型，并测定株高和生物量，以及测定抗旱指标SOD、POD和CAT活性。结果每组取均值。
[0035]结果显示：与对照组相比，处理组毛叶苕子受干旱影响卷曲的叶片能恢复伸展，株高有明显的增加，生物量也显著提高(图1)，抗旱指标SOD、POD和CAT活性也有显著的提高(图2)。
[0036]结论：用印度梨形孢处理后，毛叶苕子提高了对干旱胁迫的耐受性，表现为株高和生物量明显增加，抗旱指标SOD、POD和CAT活性显著提高。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.印度梨形孢在提高毛叶苕子耐干旱能力中的应用。2.菌液在提高毛叶苕子耐干旱能力中的应用；所述菌液为印度梨形孢经发酵培养所得菌液。3.上清液在提高毛叶苕子耐干旱能力中的应用；所述上清液按照包括如下步骤的方法制得：(a1)印度梨形孢经发酵培养获得菌液；(a2)将所述菌液打碎离散后离心获得所述上清液。4.一种提高毛叶苕子耐干旱能力的方法，包括如下步骤：将菌液稀释后灌溉毛叶苕子；所述菌液为印度梨形孢经发酵培养所得菌液。5.一种提高毛叶苕子耐干旱能力的方法，包括如下步骤：将上清液稀释后喷施毛叶苕子；所述上清液按照包括如下步骤的方法制得：(a1)印度梨形孢经发酵培养获得菌液；(a2)将所述菌液打碎离散后离心获得所述上清液。6.一种提高干旱胁迫下毛叶苕子的株高和/或生物量和/或SOD活性和/或POD活性和/或CAT活性的方法，包括如下步骤：将菌液稀释后灌溉毛叶苕子；所述菌液为印度梨形孢经发酵培养所得菌液。7.一种提高...

【专利技术属性】
技术研发人员：易可可，郭贞慧，阮文渊，
申请(专利权)人：中国农业科学院农业资源与农业区划研究所，
类型：发明
国别省市：