碳点介导siTnfα调控炎症促进间充质干细胞软骨分化的方法技术

本发明专利技术公开了一种碳点介导siTnfα调控炎症促进间充质干细胞软骨分化的方法，步骤如下：向荧光碳点溶液中加入线性化聚乙烯亚胺混匀；将离心后的上清液加入到脱盐柱，收集洗脱液获得荧光碳点

【技术实现步骤摘要】
碳点介导siTnf
α
调控炎症促进间充质干细胞软骨分化的方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体是一种碳点介导siTnfα调控炎症促进间充质干细胞软骨分化的方法。

技术介绍

[0002]关节软骨是无血管、神经及淋巴分布的致密结缔组织，含少量软骨细胞，营养供应有限，一旦受到创伤或退行性关节炎的损害，再生能力非常有限。目前，绝大多数修复的方法只能产生纤维软骨，虽可以暂时缓解关节疼痛，但长期功能不足，甚至可能增加关节进一步损伤的风险。另外，自体软骨细胞移植能成功促进软骨修复，但细胞供应不足，在体外获取及扩张过程中对供体部位造成新的损伤以及软骨细胞容易去分化。所以，当前包括基因治疗在内的组织工程再生修复技术已逐渐成为软骨缺损治疗的关键再生修复技术之一。软骨组织再生工程技术包括支架、细胞来源和生长因子，其中细胞来源是软骨组织工程中最重要的组成部分之一，如何才能够获得具有足够生物活性的种子细胞是目前面临的难题。
[0003]骨髓间充质干细胞具有自我更新及同时保持细胞的多向分化能力，能够分化为软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种碳点介导siTnfα调控炎症促进间充质干细胞软骨分化的方法，其特征在于：包括以下步骤：a. 将荧光碳点与PBS溶液混合，浓度为150
‑
250ug/mL；向荧光碳点溶液中加入线性化聚乙烯亚胺，将混合后的溶液在30
‑
40℃搅拌0.5
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1.5h；b. 6000
‑
8000rpm/min离心3
‑
5min，将离心后的上清液加入到脱盐柱，并采用MES溶液进行洗脱，获得荧光碳点
‑
线性化聚乙烯亚胺复合材料溶液；c.向步骤b获得的荧光碳点
‑
线性化聚乙烯亚胺复合材料溶液中加入siTnfα混匀，反应20
‑
40min，获得荧光碳点
‑
线性化聚乙烯亚胺
‑
siTnfα复合材料；d.将第三代骨髓间充质干细胞以1
×
104‑
105/孔的密度接种于细胞培养板，在37℃、5％CO2条件下培养过夜，弃去培养基，加入无血清、双抗a
‑
MEM培养基；e.将步骤c获得的荧光碳点
‑
线性化聚乙烯亚胺
‑
siTnfα复合材料加入到含有骨髓间充质干细胞的细胞培养板上，转染后更换完全培养基。2.根据权利要求1所述的一种碳点介导siTnfα调控炎症促进间充质干细胞软骨分化的方法，其特征在于：步骤a中，所述线性化聚乙烯亚胺的加入量为荧光碳点溶液体积的1/5
‑
2/5。3.根据权利要求1所述的一种碳点介导siTnfα调控炎症促进间充质干细胞软骨分化的方法，其特征在于：步骤b中，将荧光碳点
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：李杰，季子云，
申请(专利权)人：杭州凤喆凰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：