FIPVN重组蛋白及所得快速检测FIPV感染的胶体金试纸条制造技术

本发明专利技术提供了一种FIPV N重组蛋白及所得快速检测FIPV感染的胶体金试纸条，属于生物检测技术领域。本发明专利技术提供的FIPV N重组蛋白，其氨基酸序列如Seq ID No.1所示。本发明专利技术基于N蛋白高保守性及优良的免疫性，应用原核表达系统表达出FIPV N蛋白，并且利用该蛋白及其免疫幼猫后获得的多抗研发得到了胶体金试纸条以检测FIPV阴阳性血清，为建立FIPV快速诊断方法奠定了基础。定了基础。定了基础。

【技术实现步骤摘要】
FIPV N重组蛋白及所得快速检测FIPV感染的胶体金试纸条


[0001]本专利技术属于生物检测
，尤其涉及一种FIPV N重组蛋白及所得快速检测FIPV感染的胶体金试纸条。

技术介绍

[0002]猫冠状病毒(FIPV)是一种猫的高致死率的疾病，发生在全世界的猫科动物中，主要经接触或经消化道和呼吸道在猫群之间传播，FIPV的主要靶细胞是猫单核细胞和巨噬细胞，并且能够在单核细胞/巨噬细胞中有效感染和激活并复制，可导致包括血管炎，腹腔积液以及纤维性和肉芽肿性炎症性病变。
[0003]FIPV有4种主要的结构蛋白，包括纤突糖蛋白(spike，S)，膜(membrane，M)蛋白、小膜(small envelope，E)蛋白、核衣壳(nucleocapsid，N)蛋白。虽然S蛋白是FIPV中和性抗原，产生具有中和活性的抗体。但S蛋白变异性高，并且含有ADE表位，故无法用作检测。N蛋白也是FIPV的主要结构蛋白，研究表明，N蛋白具有较强的抗原性可诱导强烈的细胞免疫及体液免疫，而且冠状病毒N基因相对刺突蛋白高度保守，可作为抗原抗体检测的优良靶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.FIPV N重组蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如Seq ID No.1所示。2.根据权利要求1所述的FIPV N重组蛋白的编码基因。3.用于扩增权利要求2所述的编码基因基因的特异性PCR引物。4.根据权利要求1所述的FIPV N重组蛋白在制备快速检测猫冠状病毒感染的IELISA试剂盒中的应用。5.快速检测猫冠状病毒感染的胶体金试纸条，其特征在于，所述试纸条以权利要求1所述FIPV N重组蛋白作为待检抗原分子。6.根据权利要求5所述的胶体金试纸，其特征在于，包括底板和吸附层；所述吸附层从加样端开始依次为样品垫、胶体金标记垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其中，样品垫及胶体金标记垫由玻璃纤维棉制成；胶体金标记垫上吸附有胶体金标记的FIPV N重组蛋白；硝酸纤维素膜上设有质控线C和检测线T；吸水垫由吸水滤纸制成。7.根据权利要求6所述的胶体金试纸条，其特征在于，所述FIPV N重组蛋白制备方法如下：通过对N蛋白进行二级机构以及NLS核定位信号分析，合成大小为1134bp的基因片段，通过对所述基因片段进行PCR扩增，得到重组N基因；将所得重组N基因与经相同酶切后的pET32a载体用连接酶连接，并转化到大肠杆菌T7 shuffle感受态细胞，经氨苄西林抗性筛选阳性克隆，提取PCR鉴定阳性菌液质粒，经酶切鉴定得到阳性重组质粒pET32a
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FIPV
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N；将阳性重组质粒pET32a
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FIPV<...

【专利技术属性】
技术研发人员：查丽莎，周宇杭，郑琪，周婕，洪亮，汪石鹏，傅舟宇，王磊，黄茜，
申请(专利权)人：深圳赫兹生命科学技术有限公司，
类型：发明
国别省市：