【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】环状多核糖核苷酸的给药方法
相关申请的交叉引用
[0001]本申请要求于2019年6月19日提交的美国临时申请号62/863,725的优先权和权益，其全部内容通过援引并入本文。背景
[0002]某些环状多核糖核苷酸普遍存在于人的组织和细胞中，包括健康个体的组织和细胞。概述
[0003]本披露总体上涉及环状多核糖核苷酸的给药方法。如本文所披露的方法总体上涉及一种在细胞或受试者中表达蛋白质的方法，其包括向细胞或受试者提供编码蛋白质的环状多核糖核苷酸的组合物；一种在细胞或受试者中结合蛋白质的方法，其包括向细胞或受试者提供包含结合位点的环状多核糖核苷酸的组合物，或两者。一种给药方法包括向细胞或受试者提供多次给药。例如，多次给药是再给药或交错给药。一种再给药环状多核糖核苷酸的组合物的方法包括通常在延长的时间段内向细胞或受试者(例如哺乳动物)提供两种或更多种组合物。一种交错给药环状多核糖核苷酸的组合物的方法包括通常在短时间间隔内提供两种或更多种组合物。
[0004]在一个方面，本专利技术的特征在于一种维持哺乳动物中蛋白质表达的方法，其包括...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种维持哺乳动物中蛋白质表达的方法，其包括：(a)向所述哺乳动物提供包含编码所述蛋白质的环状多核糖核苷酸的第一组合物；和(b)在步骤(a)后6小时至90天，向所述哺乳动物提供包含编码所述蛋白质的环状多核糖核苷酸的第二组合物，从而维持所述蛋白质在所述哺乳动物中的表达。2.如权利要求1所述的方法，其中提供所述第二组合物发生在提供所述第一组合物之后，并且(i)在所述哺乳动物中基本上检测不到由所述第一组合物表达的蛋白质的第一水平之前；或(ii)在所述哺乳动物中基本上检测不到由所述第一组合物表达的蛋白质的第一水平之后；或(iii)在所述哺乳动物中由所述第一组合物表达的蛋白质的第一水平降低超过50％之前。3.如权利要求1
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2中任一项所述的方法，其中所述环状多核糖核苷酸：(i)是外源、合成环状多核糖核苷酸；和/或(ii)缺少聚A序列、复制元件、或两者。4.如权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中所述第一组合物包含第一环状多核糖核苷酸，并且所述第二组合物包含第二环状多核糖核苷酸，其中：(i)所述第一环状多核糖核苷酸和所述第二环状多核糖核苷酸是相同的；或(ii)所述第一环状多核糖核苷酸和所述第二环状多核糖核苷酸是不同的。5.如权利要求1
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4中任一项所述的方法，其进一步包括：(i)在所述第二组合物后向所述哺乳动物提供所述环状多核糖核苷酸的第三组合物，从而维持所述哺乳动物中所述蛋白质的表达，或(ii)在所述第二组合物后向所述哺乳动物提供所述环状多核糖核苷酸的第三组合物，从而恢复所述哺乳动物中所述蛋白质的表达；并且任选地，其中提供所述第三组合物发生在提供所述第二组合物之后，并且(a)在所述哺乳动物中基本上检测不到由所述第一和第二组合物表达的所述蛋白质的第二水平之前；或(b)在所述哺乳动物中由所述第一和第二组合物表达的所述蛋白质的第二水平降低超过50％之前；和/或(iii)提供编码所述蛋白质的环状多核糖核苷酸的第四、第五、第六、第七、第八、第九或第十组合物。6.如权利要求1
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5中任一项所述的方法，其中：(i)由所述第一组合物表达的所述蛋白质的第一水平是在提供所述第一组合物后1
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2天所述蛋白质的最高水平；或(ii)由所述第一组合物表达的所述蛋白质的第一水平是在提供所述第一组合物后一天所述蛋白质的最高水平的40％、50％、60％、70％、80％或90％；并且任选地，(iii)在提供所述第二组合物后至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、15、20、25或30天，所述蛋白质的第二水平是在提供所述第一组合物后一天所述蛋白质的最高水平的至少30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、110％、120％或130％；并且任选地，(iv)在提供所述第三组合物后至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、15、20、25或30天，所述
蛋白质的第三水平是在提供所述第一组合物后一天所述蛋白质的最高水平的至少30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、110％、120％或130％；和/或(v)对于在所述第一组合物后提供的每种后续组合物，在提供每种后续组合物后至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、15、20、25或30天，在每种后续组合物后表达的所述蛋白质的后续水平是在提供所述第一组合物后一天所述蛋白质的最高水平的至少30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、110％、120％或130％。7.如权利要求1
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6中任一项所述的方法，其中在提供所述第二组合物后所述蛋白质的平均水平是来自所述第一组合物的蛋白质第一水平的至少40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％或110％，其中所述蛋白质的平均水平是从(i)提供所述第二组合物后一天至基本上检测不到所述蛋白质的那天；或(ii)在提供每种后续组合物之后至基本上检测不到所述蛋白质的那天测量的。8.如权利要求1
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7中任一项所述的方法，其中(i)在提供所述第一组合物后6小时至90天，在提供所述第一组合物和所述第二组合物后维持所述蛋白质的第一水平；和/或(ii)在提供所述第一组合物后6小时至270天，在提供所述环状多核糖核苷酸的第一组合物、第二组合物和第三组合物后维持所述蛋白质的第一水平；和/或(iii)在提供所述第一组合物后6小时至35天，在提供所述第一组合物和所述第二组合物后基本上检测不到所述蛋白质的第一水平。9.如权利要求1
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8中任一项所述的方法，其中：(i)在提供所述第二组合物后所述哺乳动物中蛋白质的第二水平比在提供所述第一组合物后所述哺乳动物中蛋白质的第一水平高至少1％、5％、10％、20％、30％、40％、50％或60％；和/或(ii)在提供所述第三组合物后所述哺乳动物中产生的蛋白质的第三水平比在提供所述第一组合物后蛋白质的第一水平高至少5％、10％、20％、30％、40％、50％或60％；和/或(iii)在提供所述环状多核糖核苷酸的所述第二组合物后1小时、12小时、18小时、1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、15天、20天、25天或30天蛋白质的第二水平比在提供所述第一组合物后所述蛋白质的第一水平高至少1％、5％、10％、20％、30％、40％、50％或60％；和/或(iv)在提供所述环状多核糖核苷酸的所述第三组合物后1小时、12小时、18小时、1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、15天、20天、25天或30天蛋白质的第三水平比在提供所述第一组合物后所述蛋白质的第一水平高至少1％、5％、10％、20％、30％、40％、50％或60％。10.如权利要求1
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9中任一项所述的方法，其中所述蛋白质是治疗性蛋白质，例如，促红细胞生成素；和/或其中所述蛋白质(例如，促红细胞生成素)的表达在所述哺乳动物中诱导应答(例如，网织红细胞的产生)。11.一种维持细胞或受试者中蛋白质表达的方法，其包括：(a)向所述细胞或受试者提供包含编码所述蛋白质的环状多核糖核苷酸的第一组合物；并且
(b)在步骤(a)后6小时至90天，向所述细胞或受试者提供包含编码所述蛋白质的环状多核糖核苷酸的第二组合物，从而维持所述蛋白质在所述细胞或受试者中的表达；任选地，其中向所述受试者的第一细胞提供所述第一组合物，并且向所述受试者的第二细胞提供所述第二组合物，并且其中所述第一细胞和第二细胞是相同的细胞或不同的细胞。12.一种在细胞或受试者中表达蛋白质的方法，其包括：(a)向所述细胞或所述受试者提供包含编码蛋白质的环状多核糖核苷酸的第一组合物，其中所述细胞或所述受试者表达第一水平的经编码蛋白质；并且(b)向所述细胞或所述受试者提供包含编码蛋白质的环状多核糖核苷酸的第二组合物，其中所述细胞或所述受试者表达第二水平的经编码蛋白质，并且(i)所述第二水平至少与所述第一水平一样多，或者(ii)所述第二水平变化不超过所述第一水平的20％；从而将所述细胞或受试者中经编码蛋白质的表达至少维持在所述蛋白质的第一水平；任选地，其中向所述受试者的第一细胞提供所述第一组合物，并且向所述受试者的第二细胞提供所述第二组合物，并且其中所述第一细胞和第二细胞是相同的细胞或不同的细胞。13.一种与在提供环状多核糖核苷酸的线性对应物的第一组合物和第二组合物后细胞或受试者中的蛋白质水平相比，在向所述细胞或受试者提供所述环状多核糖核苷酸的第一组合物和第二组合物后在所述细胞或受试者中表达一定水平所述蛋白质的方法，其包括：(a)向细胞或受试者提供编码蛋白质的环状多核糖核苷酸的第一组合物，其中所述细胞或受试者在提供环状多核糖核苷酸的第一组合物后包含一定水平的所述蛋白质；和(b)在所述第一组合物后，向所述细胞或受试者提供环状多核糖核苷酸的第二组合物，其中所述细胞或受试者包含(i)在提供所述环状多核糖核苷酸的所述第二组合物后至少所述蛋白质的水平，或(ii)在提供所述环状多核糖核苷酸的所述第二组合物后变化不超过所述水平的20％的一定水平所述蛋白质；从而与在提供所述环状多核糖核苷酸的线性对应物的所述第一组合物和所述第二组合物后所述细胞或受试者中的所述蛋白质水平相比，在提供所述环状多核糖核苷酸的所述第一组合物和所述第二组合物后维持所述细胞或受试者中所述蛋白质水平的表达；并且任选地，其中向所述受试者的第一细胞提供所述第一组合物，并且向所述受试者的第二细胞提供所述第二组合物，并且其中所述第一细胞和第二细胞是相同的细胞或不同的细胞。14.如权利要求11或12所述的方法，其中提供所述第二组合物发生在提供所述第一组合物之后，并且(i)在所述细胞或受试者中基本上检测不到由所述第一组合物表达的蛋白质的第一水平之前；和/或(ii)在所述细胞或受试者中由所述第一组合物表达的蛋白质的第一水平降低超过50％之前；和/或(iii)在所述细胞或受试者中由所述第一组合物表达的蛋白质的第一水平降低25％
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75％之前。15.如权利要求12
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14中任一项所述的方法，其进一步包括在所述第二组合物后向所述
细胞或受试者提供所述环状多核糖核苷酸的第三组合物，从而将所述细胞或受试者中的所述蛋白质表达至少维持在蛋白质的第一水平，并且任选地，其中提供所述第三组合物发生在提供所述第二组合物之后，并且(i)在所述细胞或受试者中基本上检测不到由所述第一和第二组合物表达的所述蛋白质的第二水平之前，或(ii)在所述细胞或受试者中由所述第一和第二组合物表达的所述蛋白质的第二水平降低超过50％之前。16.如权利要求12
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15中任一项所述的方法，其进一步包括提供所述环状多核糖核苷酸的第四、第五、第六、第七、第八、第九或第十组合物。17.如权利要求13、15或16中任一项所述的方法，其中向所述细胞或受试者提供所述第二组合物：(i)在所述细胞或受试者中基本上检测不到由所述第一组合物表达的蛋白质水平后至少1分钟、1小时、1天、2天、3天、4天、5天、7天、2周、3周、4周、5周、6周、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月、13个月、14个月、15个月、16个月、17个月、18个月、19个月、20个月、21个月或22个月，或者(ii)在所述第一组合物后至少14天，并且在所述第一组合物后不超过90天。18.如权利要求12
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16中任一项所述的方法，其中所述蛋白质的第一水平是(i)在提供所述第一组合物后一天所述蛋白质的最高水平，和/或(ii)在提供所述第一组合物后一天所述蛋白质的最高水平的40％、50％、60％、70％、80％或90％。19.如权利要求18所述的方法，其中：(i)在提供所述第二组合物后至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、15、20、25或30天，所述蛋白质的第二水平是在提供所述第一组合物后一天所述蛋白质的最高水平的至少30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、110％、120％或130％；和/或(ii)在提供所述第三组合物后至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、15、20、25或30天，所述蛋白质的第三水平是在提供所述第一组合物后一天所述蛋白质的最高水平的至少30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、110％、120％或130％；和/或(iii)对于在所述第一组合物后提供的每种后续组合物，在提供每种后续组合物后至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、15、20、25或30天，在每种后续组合物后表达的所述蛋白质的后续水平是在提供所述第一组合物后一天所述蛋白质的最高水平的至少30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、110％、120％或130％；和/或(iv)在提供所述第二组合物后所述蛋白质的平均水平是所述第一水平的至少40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％或110％，其中所述蛋白质的平均水平是从提供所述第二组合物后一天至基本上检测不到所述蛋白质的那天测量的；和/或(v)在所述第一组合物后提供每种后续组合物后所述蛋白质的平均水平是所述第一水平的至少40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％或110％，其中所述蛋白质的平均水平是从提供每种后续组合物后一天至基本上检测不到所述蛋白质的那天测量的；和/或(vi)在提供所述第一组合物后至少6小时、1天、2天、3天、5天、7天、14天、21天、28天或30天，在提供所述环状多核糖核苷酸的所述第一组合物和所述第二组合物后维持所述蛋白质的第一水平；和/或(vii)在提供所述第一组合物后至少6小时、1天、2天、3天、5天、7天、14天、21天、28天或
30天，在提供所述环状多核糖核苷酸的所述第一组合物、所述第二组合物和所述第三组合物后维持所述蛋白质的第一水平；和/或(viii)在提供所述第二组合物后所述细胞或受试者中蛋白质的第二水平比在提供所述第一组合物后所述细胞或受试者中蛋白质的第一水平高至少1％、5％、10％、20％、30％、40％、50％或60％；和/或(ix)在提供所述第三组合物后所述细胞或受试者中产生的蛋白质的第三水平比在提供所述第一组合物后所述多个中蛋白质的第一水平高至少5％、10％、20％、30％、40％、50％或60％；和/或(x)在提供所述环状多核糖核苷酸的所述第二组合物后1小时、12小时、18小时、1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、15天、20天、25天、30天、40天或45天蛋白质的第二水平比在提供所述第一组合物后所述蛋白质的第一水平高至少1％、5％、10％、20％、30％、40％、50％或60％；和/或(xi)在提供所述环状多核糖核苷酸的所述第三组合物后1小时、12小时、18小时、1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、15天、20天、25天或30天蛋白质的第三水平比在提供所述第一组合物后所述蛋白质的第一水平高至少1％、5％、10％、20％、30％、40％、50％或60％。20.如权利要求13或15
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17中任一项所述的方法，其中：(i)将在提供所述环状多核糖核苷酸的所述第一组合物和所述第二组合物后所述细胞或受试者中的所述蛋白质水平维持至少1小时、12小时、18小时、1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、15天、20天、25天或30天；和/或(ii)在提供所述环状多核糖核苷酸的所述第一组合物和所述第二组合物后所述细胞或受试者中的所述蛋白质水平比在提供所述环状多核糖核苷酸的所述线性对应物的所述第一组合物和所述第二组合物后所述细胞或受试者中的所述蛋白质水平高至少5％、10％、20％、30％、40％、50％或60％；和/或(iii)在提供所述环状多核糖核苷酸的所述第二组合物后至少1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、15天、20天、25天或30天，在提供所述环状多核糖核苷酸的所述第一组合物和所述第二组合物后所述细胞或受试者中的所述蛋白质水平比在提供所述环状多核糖核苷酸的所述线性对应物的所述第一组合物和所述第二组合物后所述细胞或受试者中的所述蛋白质水平高至少5％、10％、20％、30％、40％、50％或60％。21.如权利要求11
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20中任一项所述的方法，其中所述蛋白质是治疗性蛋白质，例如，促红细胞生成素，和/或其中所述蛋白质(例如，促红细胞生成素)的表达在所述细胞或受试者中诱导应答(例如，网织红细胞的产生)。22.一种在细胞或受试者中产生环状多核糖核苷酸的方法，其包括：(a)向所述细胞或受试者提供包含所述环状多核糖核苷酸的第一组合物，其中所述细胞或受试者在提供所述第一组合物后包含第一水平的环状多核糖核苷酸；和(b)向所述细胞或受试者提供环状多核糖核苷酸的第二组合物，其中所述细胞或受试者包含第二水平的环状多核糖核苷酸，并且(i)环状多核糖核苷酸的所述第二水平至少与所述第一水平一样多，或者(ii)在提供所述第二组合物后，环状多核糖核苷酸的所述第二水平变化不超过所述第
一水平的20％；从而将所述细胞或受试者中的环状多核糖核苷酸至少维持在所述第一水平；任选地，其中所述第一组合物包含第一环状多核糖核苷酸，并且所述第二组合物包含第二环状多核糖核苷酸，其中：(i)所述第一环状多核糖核苷酸和所述第二环状多核糖核苷酸是相同的；或(ii)所述第一环状多核糖核苷酸和所述第二环状多核糖核苷酸是不同的；任选地，其中所述第一环状多核糖核苷酸包含第一结合位点和/或编码第一蛋白质，并且所述第二环状多核糖核苷酸包含第二结合位点和/或编码第二蛋白质，其中所述第一结合位点和所述第二结合位点是相同或不同的结合位点，并且/或者所述第一蛋白质和所述第二蛋白质编码所述相同的蛋白质或不同的蛋白质。23.一种与在提供所述环状多核糖核苷酸的所述线性对应物的第一组合物和第二组合物后所述细胞或受试者中所述环状多核糖核苷酸的线性对应物水平相比，在向所述细胞或受试者提供所述环状多核糖核苷酸的第一组合物和第二组合物后在所述细胞或受试者中产生一定水平环状多核糖核苷酸的方法，其包括：(a)向所述细胞或受试者提供所述环状多核糖核苷酸的第一组合物，其中所述细胞或受试者在提供所述第一组合物后包含所述环状多核糖核苷酸的水平；并且(b)向所述细胞或受试者提供所述环状多核糖核苷酸的所述第二组合物，其中所述细胞或受试者包含(i)至少在提供所述第二组合物后的所述环状多核糖核苷酸水平，或(ii)在提供所述第二组合物后变化不超过所述环状多核糖核苷酸水平的20％的一定水平所述蛋白质；从而与在提供所述环状多核糖核苷酸的所述线性对应物的所述第一组合物和第二组合物后所述细胞或受试者中的所述线性对应物水平相比，在提供所述环状多核糖核苷酸的所述第一组合物和所述第二组合物后维持所述细胞或受试者中的所述环状多核糖核苷酸水平。24.如权利要求22所述的方法，其中提供所述第二组合物发生在提供所述第一组合物之后，并且在所述细胞或受试者中基本上检测不到通过提供所述第一组合物产生的环状多核糖核苷酸水平之前。25.如权利要求24所述的方法，其中提供所述环状多核糖核苷酸的所述第二组合物发生在所述第一组合物之后，并且在所述细胞或受试者中基本上检测不到由所述第一组合物产生的环状多核糖核苷酸水平之后。26.如权利要求23或25所述的方法，其中向所述细胞或受试者提供所述第二组合物(i)在基本上检测不到由所述第一组合物产生的环状多核糖核苷酸水平后至少1分钟、1小时、1天、2天、3天、4天、5天、7天、2周、3周、4周、5周、6周、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月、13个月、14个月、15个月、16个月、17个月、18个月、19个月、20个...
【专利技术属性】
技术研发人员：阿瓦克，
申请(专利权)人：旗舰创业创新第六有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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