RNA病毒检测方法技术

本发明专利技术涉及通过逆转录

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】RNA病毒检测方法


[0001]本专利技术涉及通过逆转录
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聚合酶链式反应(reverse transcription
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polymerase chain reaction、RT
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PCR)来检测RNA病毒的方法、及用于执行该方法的试剂盒。更具体而言，涉及：通过在氢氧化物的存在下将待检体与表面活性剂混合，进而添加RT
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PCR反应液，由此检测RNA病毒的方法；以及，用于执行该方法的试剂盒。

技术介绍

[0002]RNA病毒是具有RNA作为基因组的病毒，分为具有由脂双层构成的膜即包膜的冠状病毒、人类免疫缺陷病毒、丙型肝炎病毒、日本脑炎病毒、登革病毒等；以及不具有包膜的诺如病毒、轮状病毒、鼻病毒等，有很多具有致病性。
[0003]诺如病毒是属于人杯状病毒科的病毒，在基因组中具有约7000个碱基的单链RNA。根据电子显微镜所观察到的形态学分类，该病毒也被称为小圆形病毒(Small Round Structured Virus，SRSV)，而且是被称为诺瓦克样病毒(Norw本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种检测待检体中的RNA病毒的方法，其包括如下工序：(1)将待检体悬浮于蒸馏水、生理盐水或缓冲液的工序；(2)提取工序(1)中生成的悬浮液的离心上清液的工序；(3)将工序(2)中提取出的离心上清液与包含1种以上的表面活性剂的待检体处理液混合的工序；(4)将工序(3)中得到的混合液与包含逆转录酶和DNA聚合酶的一步法RT
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PCR反应液混合，进行RT
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PCR的工序；及(5)对所述RT
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PCR产物进行检测的工序。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述RNA病毒选自由诺如病毒、轮状病毒、鼻病毒、冠状病毒、人类免疫缺陷病毒、丙型肝炎病毒、日本脑炎病毒和登革病毒组成的组。3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述RNA病毒为诺如病毒。4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述诺如病毒基因型为基因组I(GI)或基因组II(GII)。5.根据权利要求1～4中任一项所述的方法，其中，所述待检体源自选自由生物试样、生物来源试样、环境试样和环境来源试样组成的组中的试样。6.根据权利要求1～4中任一项所述的方法，其中，所述待检体源自选自由排泄物试样、排泄物来源试样、呕吐物和呕吐物来源试样组成的组中的试样。7.根据权利要求1～6中任一项所述的方法，其中，所述表面活性剂为阴离子表面活性剂。8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述阴离子表面活性剂为选自由烷基硫酸盐、烷基醚硫酸盐、多库酯、磺酸盐含氟表面活性剂、烷基苯磺酸盐、烷基芳基醚磷酸盐、烷基醚磷酸盐、烷基羧酸盐、月桂酰肌氨酸钠、羧酸盐含氟表面活性剂、胆酸钠和脱氧胆酸钠组成的组中的1种以上的阴离子表面活性剂。9.根据权利要求7所述的方法，其中，所述阴离子表面活性剂为烷基硫酸盐。10.根据权利要求9所述的方法，其中，所述烷基硫酸盐为十二烷基硫酸钠或十二烷基硫酸铵。11.根据权利要求1～10中任一项所述的方法，其中，所述表面活性剂的浓度为0.02～0.5％(w/v)。12.根据权利要求1～11中任一项所述的方法，其中，所述待检体处理液包含氢氧化物。13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述氢氧化物为氢氧化钠或氢氧化钾。14.根据权利要求12或13所述的方法，其中，所述氢氧化物的浓度为10～100mM。15.根据权利要求1～14中任一项所述的方法，其中，所述工序...

【专利技术属性】
技术研发人员：小林慎一郎，四方正光，高冈直子，二宫健二，
申请(专利权)人：株式会社岛津制作所，
类型：发明
国别省市：