检测野生型腺相关病毒的通用引物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物工程技术领域的病毒检测方法，具体涉及一种检测野生型腺相关病毒的通用引物对/组合、检测方法及其应用。本发明专利技术提供一种可用于检测12种血清型的野生型腺相关病毒的通用引物对/组合，利用该引物组合，可实现12种血清型的野生型腺相关病毒的qPCR检测。相比传统的野生型腺相关病毒PCR检测方法，利用该引物组合的qPCR检测方法可有效提高检测灵敏度和准确性，更快捷、可定量。可定量。

【技术实现步骤摘要】
检测野生型腺相关病毒的通用引物及其应用


[0001]本专利技术涉及生物工程
的病毒检测方法，具体涉及一种检测野生型腺相关病毒的通用引物、检测方法及其应用。

技术介绍

[0002]腺相关病毒(adeno-associatedvirus，AAV)属于微小病毒科依赖病毒属B19家族，无包膜，含线性单链的脱氧核糖核酸—约4.7kbp，含rep和cap两个开放阅读框，两端分别有末端重复序列(ITR)。AAV颗粒呈二十面体，直经约20nm，分子量约为5.5-6.2
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106Da。目前没有直接证据表明AAV与人类疾病相关。AAV在宿主中的复制需要宿主细胞或其他病毒的协助才能完成，如腺病毒和疱疹病毒，因此被称为腺相关病毒。AAV是作为腺病毒的污染成分被发现的，FDA在《人体细胞和基因治疗指导原则》中对腺病毒生产的AAV污染残留的质量控制有明确规定。目前已发现的不同血清型、突变型AAV种类达上百种。过去，国内外在质量控制中主要采用PCR扩增常见腺相关病毒1-8血清型的保守序列来进行质量控制。如高凯等(高凯，毕华，丁有学等.重组复制型溶瘤腺本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测野生型腺相关病毒的通用引物对/组合，其特征在于，包括第一引物和第二引物，所述第一引物的序列为5
’
-tggtgggaggagggVaagatgac-3
’
，其中简并碱基V为C、G或A；所述第二引物的序列为5
’
-cRcacatgttKgtRttgg-3
’
，其中简并碱基R为G或A，简并碱基K为G或T。2.一种试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述的通用引物对/组合。3.权利要求1所述的通用引物对/组合在制备试剂盒中的用途，所述试剂盒用于检测野生型腺相关病毒，其中，所述野生型腺相关病毒为12种血清型的野生型腺相关病毒，所述12种血清型的野生型腺相关病毒为AVV1～12。4.权利要求1所述的通用引物对/组合或权利要求2所述的检测试剂盒在检测野生型腺相关病毒中的应用，其中，所述野生型腺相关病毒为12种血清型的野生型腺相关病毒，所述12种血清型的野生型腺相关病毒为AVV1～12。5.权利要求1所述的通用引物对/组合...

【专利技术属性】
技术研发人员：林东，张玉蕊，刘兵，赵超，
申请(专利权)人：北京荷塘生华医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：