新型罗非鱼病毒及其用途制造技术

本发明专利技术的发明专利技术名称为新型罗非鱼病毒及其用途。本发明专利技术涉及分离的罗湖病毒或TiLV，以及其分离的核酸序列和多肽。本发明专利技术还涉及探针和引物，并且涉及针对来自TiLV的抗原的抗体，以及这些试剂用于在动物中检测TiLV的存在或不存在的用途。本发明专利技术还涉及靶向TiLV的核酸序列的iRNA。本发明专利技术还涉及用于在动物中诱导针对TiLV的免疫应答的免疫原性组合物，包括抗体和疫苗。本发明专利技术还涉及用于开发预防和治疗剂的基因构建体和细胞，所述基因构建体和细胞包含TiLV以及其分离的核酸序列和多肽。TiLV以及其分离的核酸序列和多肽。TiLV以及其分离的核酸序列和多肽。

【技术实现步骤摘要】
新型罗非鱼病毒及其用途
[0001]本申请为申请日是2015年12月15日、申请号是201580073920.9 (PCT/US2015/065795)、专利技术名称为“新型罗非鱼病毒及其用途”的 中国申请的分案申请。
[0002]相关申请的交叉引用
[0003]本申请要求于2014年12月15日提交的美国临时申请序列号 62/091,824的优先权，其全文特此以引用方式并入。
专利

[0004]本专利技术属于病毒领域并且涉及在罗非鱼(tilapia)中发现的一种新 病毒，名为罗湖病毒(Tilapia Lake Virus，TiLV)。本专利技术包括分离 的TiLV，以及其分离的核酸序列和多肽。本专利技术还涉及引物和探针。 本专利技术还涉及针对来自TiLV的抗原的抗体。本专利技术涉及用于使用引 物、探针和抗体检测动物中TiLV的存在或不存在的方法。本专利技术还 涉及靶向TiLV的核酸序列的iRNA。本专利技术还涉及用于在动物中诱 导针对TiLV的免疫应答的免疫原性组合物。
[0005]专利技术背景
[0006]罗非鱼(tilapine)是世界范围内养殖鱼类的第二重要群组，年产量 250万吨(联合国粮食及农业组织(Food and Agriculture Organization) 2010)，并且它们作为发展中国家的主要蛋白质来源。以色列的加利 利海(Sea of Galilee)(基内雷特湖(Kinneret Lake))是商业捕鱼的一个 主要来源。近年来，捕鱼量持续下降。
[0007]尽管湖里生活着约27种鱼，涵盖慈鲷科(Cichlidae)、鲤科(Cyprinidae)、鯔科(Mugillidae)和鲇科(Claridae)的成员，但是只有罗 非鱼(慈鲷科)的捕捞量明显降低。该湖泊的主要可食用鱼加利略帚 齿非鲫(Sarotherodon(Tilapia)galilaeus)(圣彼得鱼(St.Peter
’
s fish)) 的年产量从2005年的316吨分别下降到2007年的51吨、2009年的 8吨和2010年的45吨。
[0008]加利略帚齿非鲫有助于维持该湖泊的生态平衡。因此，除了其经 济影响之外，圣彼得鱼种群以及其他湖泊罗非鱼(诸如吉利罗非鱼 (Tilapia zilli)[普通罗非鱼]、奥利亚口孵非鲫(Oreochromis aureus)[约 旦罗非鱼]和中间三列丽鲷(Tristamella simonis intermedia))的显著下 降代表对整个生态系统的明确威胁。
[0009]加利利海中湖泊罗非鱼的这种下降是由罗非鱼物种的野生种群 (包括加利略帚齿非鲫、吉利罗非鱼、奥利亚口孵非鲫和中间三列丽 鲷)以及以色列的鱼塘养殖的杂交罗非鱼尼罗罗非鱼
‑
奥利亚口孵非 鲫(O.niloticus x O.aureus)中的新发严重疾病造成的。疾病爆发与 季节(五月至十月，当水具有相对高的温度时)的关联进一步表明感 染物的涉及，因为水温影响鱼的广泛的寄生虫性、细菌性和病毒性疾 病的出现。已知寄生生物、细菌、病毒病原体或毒素的常规监测未显 示任何异常，并且未鉴定出致病原。
[0010]还在厄瓜多尔发现罗非鱼疾病的类似爆发。
[0011]因此，需要在两个不同的地理位置中鉴定罗非鱼种群的这种下降 的致病原，并且需要用于检测鱼类种群内致病原的存在并且保护鱼类 种群免受这种下降的致病原的侵害
的工具和方法。本专利技术解决了这些 需要。

技术实现思路

[0012]在某些方面，本专利技术涉及罗非鱼疾病的致病原为新型罗湖病毒 (TiLV)RNA病毒的发现。病毒的广泛分布和其相关疾病的不同临床 特征的存在使得本文所述的结果对于鱼类养殖和野生动物保护具有 重要意义。
[0013]在某些方面，本专利技术涉及可用于筛选样品中的TiLV的诊断工具。
[0014]在某些方面，本文所述的本专利技术涉及用于保护鱼类免患病毒性疾 病的疫苗。在某些方面，本专利技术涉及用于在鱼类，尤其是罗非鱼中预 防罗湖病毒(TiLV)诱发的疾病的疫苗组合物。在某些方面，本专利技术涉 及用于使用疫苗来保护罗非鱼免患TiLV诱发的疾病的方法。
[0015]具体的方面，本专利技术涉及分离的TiLV核酸序列(包括与有义或 反义TiLV RNA序列相对应的cDNA序列)及其肽。本专利技术还涉及 针对源自TiLV的抗原的抗体。本专利技术还涉及靶向TiLV的核酸序列 的iRNA。本专利技术涉及用于检测动物中(例如鱼类中)TiLV的存在或 不存在的方法。本专利技术还涉及用于在动物中(例如在鱼类中)诱导针 对TiLV的免疫应答的免疫原性组合物。
[0016]在某些方面，本专利技术涉及一种分离的核酸序列，其具有SEQ IDNO:1
‑
11中的任一个的序列、与SEQ ID NO:1
‑
11中的任一个互补的 序列，以及其片段和变体。在某些实施方案中，核酸为DNA序列， 包括cDNA。在某些实施方案中，核酸为RNA序列。
[0017]在某些方面，本专利技术涉及一种包括分离的(或非分离的)核酸的 合成核酸，所述分离的(或非分离的)核酸具有SEQ ID NO:1
‑
10的 序列、与SEQ ID NO:1
‑
11中的任一个互补的序列，以及其变体。这 些合成核酸包括引物和探针。
[0018]在某些方面，本专利技术涉及用于确定生物样品中TiLV的存在或不 存在的引物组，其中引物组包括选自由本文所述的合成核酸组成的组 的至少一个合成核酸序列。
[0019]在某些方面，本专利技术涉及一种用于确定生物样品中TiLV的存在 或不存在的方法，所述方法包括：a)使来自生物样品的核酸与至少一 个引物接触，所述引物为本文所述的合成核酸；b)使核酸和引物经历 扩增条件；以及c)确定扩增产物的存在或不存在，其中扩增产物的存 在指示样品中存在与TiLV相关联的RNA。
[0020]在某些方面，本专利技术涉及用于确定生物样品中TiLV的存在或不 存在的寡核苷酸探针。
[0021]在某些方面，本专利技术涉及靶向来自TiLV的核酸(例如但不限于 SEQ ID NO:1
‑
11中的任一个及其变体)并且使靶基因沉默的iRNA 分子。
[0022]在某些方面，本专利技术涉及一种用于降低动物中TiLV蛋白、动物 中病毒mRNA或动物的细胞中病毒滴度的水平的方法，所述方法包 括向动物施用本文所述的iRNA。
[0023]在某些方面，本专利技术涉及一种分离的多肽，其由SEQ ID NO:1
‑
11 中的任一个的核酸、具有与SEQ ID NO:1
‑
11中的任一个互补的序列 的核酸，以及其片段和变体编码。
[0024]在某些方面，本专利技术涉及SEQ ID NO:12的分离的多肽，以及其 片段和变体。
[0025]在另一方面，本专利技术提供了一种计算机可读介质，其具有存储于 其上的以下各项：(i)选自由以下各项组成的组的核酸序列：SEQ ID本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分离的多肽，其由具有选自由SEQ ID NO:2
‑
11组成的组的序列的核酸编码。2.一种分离的多肽，其由与选自由SEQ ID NO:2
‑
11组成的组的序列互补的核酸编码。3.一种免疫原性组合物，其包含罗湖病毒多肽，其中所述罗湖病毒多肽是由SEQ ID NO:2
‑
11中的任一个的核酸编码的多肽。4.根据权利要求3所述的免疫原性组合物，其还包含至少一种赋形剂、添加剂或佐剂。5.一种包含融合...

【专利技术属性】
技术研发人员：W，
申请(专利权)人：台拉维夫大学拉莫特有限公司吉姆若恩兽医协会，
类型：发明
国别省市：