富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸及其抗肝炎病毒的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸及其抗肝炎病毒的应用。具体地，本发明专利技术公开了一种包含(A

【技术实现步骤摘要】
富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸及其抗肝炎病毒的应用


[0001]本专利技术涉及医药生物领域，具体涉及一种富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸及其抗肝炎病毒的应用。

技术介绍

[0002]世界卫生组织公布的数据显示，2015年全球有超过2亿人慢性感染HBV，有88.7万人因HBV感染引起的并发症而死亡。虽然全球已经批准了一些抗病毒药物用于治疗HBV感染，但是现有药物的疗法或组合疗法除了在小部分患者(<3％)外，无法引起能够提供感染的持久控制或者功能性治愈的有效免疫反应或HBsAg的血清学转换。
[0003]感染HBV的成年人90％能够自愈，但是婴幼儿感染HBV后，90％会发展成为慢性肝炎。慢性HBV感染可能会导致肝纤维化，进一步发展为肝硬化和肝细胞癌(HCC)。另外，有研究表明乙肝会增加胰腺癌风险。治愈或功能性治愈以HBV慢性感染是巨大的未满足的临床需求。
[0004]HBV感染人肝细胞后主要产生两种不同的颗粒，一种是Dane颗粒，也就是完整的HBV病毒本身，包括由乙肝核心抗原(HBcAg)和病毒核酸(RcDNA)组装而成的病毒核衣壳，且具有由乙肝表面抗原(HBsAg)组成的病毒包膜；另一种是亚病毒颗粒(SVP)，其是由脂质、胆固醇、胆固醇酯和乙肝表面抗原(HBsAg)组成的非感染性颗粒。SVP所包含的乙肝表面抗原占患者血液中乙肝表面抗原的绝大多数(>99.9％)。HBV感染的肝细胞还分泌一种e-抗原(HBeAg)到血液中。乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)、乙肝e抗原(HBeAg)以及乙肝e抗体(HBeAb)是评价药物对病毒干预情况的重要分子标记物。
[0005]丁型肝炎病毒(HDV)是HBV的卫星病毒，依赖乙肝表面抗原(HBsAg)形成其完整的具有感染性的HDV病毒颗粒，HDV感染仅可在伴随HBV感染的患者中发生。HDV/HBV共感染并发症显著增加了肝纤维化至肝硬化的进展速率。对于HDV慢性感染的患者，目前仅有干扰素治疗一种干预手段，无直接靶向HDV病毒的上市药物，现有治疗方法疗效不佳，副作用显著。
[0006]临床上用于治疗乙型肝炎的药物主要有干扰素类和核苷(酸)类药物。干扰素类药物有普通干扰素和聚乙二醇修饰的长效干扰素，后者包括派罗欣(PEG-IFNα-2a)和佩乐能(PEG-IFNα-2b)。核苷(酸)类药物包括拉米夫定、替比夫定、阿德福韦酯、富马酸替诺福韦二吡呋酯(TDF)、富马酸替诺福韦艾拉酚胺(TAF)、恩替卡韦等。这些核苷类药物能有效的控制病毒的复制，改善肝功能，因而应用最为广泛。干扰素需要注射给药，个体反应差异大，不良反应明显，且疗效不佳。核苷类药物仅作用于病毒从pgRNA到rcDNA的复制过程，对乙肝病毒生命周期中其他的环节没有抑制作用。长期治疗，乙肝e抗原(HBeAg)转阴率仍然较低，极少数患者乙肝表面抗原(HBsAg)能够转阴。恩替卡韦(354例)和替诺福韦(176例)治疗48周，在乙肝e抗原(HBeAg)阳性的患者中乙肝表面抗原(HBsAg)转阴率分别为2％和3.2％，在乙肝e抗原(HBeAg)阴性的患者中乙肝表面抗原(HBsAg)转阴率分别为0.3％和0％。由于现有的治疗方案不能治愈乙肝，需要患者长期服药，可能使患者面临重大副作用，例如长期服用阿德福韦酯和富马酸替诺福韦二吡呋酯均可导致肾毒性和骨毒性。
[0007]HBV慢性感染患者血液中大量的以亚病毒颗粒(SVP)形式存在的乙肝表面抗原(HBsAg)可以中和B淋巴细胞分泌的特异性乙肝表面抗体(HBsAb)，进而导致免疫耐受，而仅占少数的HBV病毒颗粒则能够逃逸免疫检查，这可能是HBV保持慢性感染的重要原因之一。尽管研究表明，三种病毒抗原乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝核心抗原(HBcAg)、乙肝e抗原(HBeAg)都具有免疫抑制性质，但乙肝表面抗原(HBsAg)在HBV感染对象的血液中占所有病毒抗原的绝大多数，并有可能是抑制宿主免疫的最主要的诱导物。乙肝表面抗原(HBsAg)的血清学转换(HBsAg从血液中清除，游离的HBsAb的出现)是治疗时，病毒感染获得功能性控制的公认的预后指标。HBV保持慢性感染特征的另一关键原因是其在感染的肝细胞的细胞核中借助宿主DNA修复酶合成了稳定的环状DNA存储库，即HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)。cccDNA可在肝细胞中长期稳定存在，并能够持续获得补充，其可通过转录和逆转录产生HBV病毒的核酸RcDNA及编码全部病毒抗原所需的mRNA。cccDNA的转录抑制或清除对于治愈或功能性治愈HBV感染是至关重要的。核苷(酸)类似物长期治疗并不能彻底清除cccDNA，也不能抑制其转录，因此乙肝表面抗原(HBsAg)表达水平几乎不受核苷(酸)类药物的影响。免疫调节可介导体液和细胞免疫，进而抑制cccDNA转录或者清除被感染的细胞，但大的抗原负荷会极大的抑制该免疫过程，因此大幅降低抗原，尤其是乙肝表面抗原(HBsAg)，结合免疫调节是帮助患者获得持久免疫控制的有效手段。
[0008]目前，尚缺乏活性高且安全窗足够大的硫代磷酸酯化寡核苷酸，以用于治疗HBV和HBV/HDV共感染。

技术实现思路

[0009]本专利技术目的是提供一种活性高且安全窗足够大的硫代磷酸酯化寡核苷酸，以用于治疗HBV和HBV/HDV共感染。
[0010]本专利技术的第一方面，提供一种化合物，或其光学异构体、药学上可接受的盐、水合物、或溶剂化物，所述的化合物为富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸(ARON)，其中，所述的富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸包含(A
m
AAC)
n
重复序列；
[0011]其中，m各自独立地为0或1；n为≥4的正数；且所述富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸的长度为15-40个核苷酸；
[0012]所述的富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸中80-100％的磷酸酯为硫代磷酸酯。
[0013]在另一优选例中，所述的富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸中95-100％的磷酸酯为硫代磷酸酯。
[0014]在另一优选例中，所述的富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸中的磷酸酯全部为硫代磷酸酯。
[0015]在另一优选例中，所述的富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸的序列为(A
m
AAC)
n1
(AAAC)(A
m
AAC)
n2
，其中，n1和n2各自独立地为0-10(即0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10)的整数，n3为0、1、2、3或4，且
[0016]m和n的定义如上所述。
[0017]在另一优选例中，所述的富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸的序列为(R)(A
m
AAC)
n'2
、(A
m
AAC)
n'1
(R)、(R)(CA
m
AA)
n'2
或(CA
m
AA)
n'1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种化合物，或其光学异构体、药学上可接受的盐、水合物、或溶剂化物，其特征在于，所述的化合物为富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸，其中，所述的富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸包含(A
m
AAC)
n
重复序列；其中，m各自独立地为0或1；n为≥4的正数；且所述富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸的长度为15-40个核苷酸；所述的富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸中80-100％的磷酸酯为硫代磷酸酯。2.如权利要求1所述的化合物，或其光学异构体、药学上可接受的盐、水合物、或溶剂化物，其特征在于，所述的富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸的序列为(A
m
AAC)其中，n1和n2各自独立地为0-10的整数，n3为0、1、2、3或4，且m和n的定义如权利要求1所述。3.如权利要求1或2所述的化合物，或其光学异构体、药学上可接受的盐、水合物、或溶剂化物，其特征在于，各A
m
AAC片段独立地选自下组：AAAC、AAC、CAAA、CAA。4.如权利要求1所述的化合物，或其光学异构体、药学上可接受的盐、水合物、或溶剂化物，其特征在于，所述的富含腺嘌呤硫代磷酸酯化寡核苷酸为如SEQ ID NO：10-16和SEQ ID NO：7-8所示的寡核苷酸。5.如权利要求1所述的化合物，...

【专利技术属性】
技术研发人员：席志坚，伍中山，陆春平，
申请(专利权)人：浙江柏拉阿图医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：